Estudo das interações entre a hesperitina e as serina proteases de peçonhas de serpentes

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Roney Vander dos, 1989-
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1636327
Resumo: Orientador: Ljubica Tasic
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As peçonhas das Viperidae contêm uma alta percentagem de metaloproteases zinco-dependentes que desempenham um papel relevante na patogênese da hemorragia característica destes envenenamentos. Entretanto, algumas serina proteases estão diretamente envolvidas nesses eventos proteolíticos, causando perturbações na hemostasia observada após o envenenamento. Resultados de experimentos in silico e in vitro mostram que a hesperitina é capaz de se ligar a serina proteases de três espécies de serpentes distintas e inibir a serina protease de duas formas uma como inibidor reversível acompetitivo e como inibidor reversível misto. Nossos objetivos foram estudar as interações entre as quatro serina proteases e a hesperitina, e comparar com as interações entre as proteases alvo e os correspondentes anticorpos através das técnicas espectroscópicas. Os procedimentos de isolar, purificar e caracterizar as proteínas alvo foram finalizados com sucesso. Também, a hesperitina foi obtida, purificada e caracterizada. Aplicando as técnicas bioquímicas, a atividade e a inibição da ação das serina proteases alvo foram descritas e apontam para uma potente ação da hesperitina perante as quatro proteínas alvo. Métodos biofísicos foram aplicados para descrever as interações entre proteases alvo e a hesperitina. Finalmente, as serina proteases alvo em interações com os anticorpos anti-serina proteases foram estudadas e essas interações foram comparadas com as observadas e descritas com a hesperitina. Concluímos que as interações com a hesperitina poderão ser exploradas para inibir a ação das serina proteases logo após acidente ofídico e em ação sinérgica com os antídotosAbstract: Accidents caused by snake bites affect around 5.4 million people a year, with about 109,500 ending with a fatal outcome. Surviving victims may have permanent physical sequelae due to local tissue necrosis and sometimes psychological sequelae. Thus, these types of accidents represent a public health problem that mainly affects people living in rural areas of Asia, Africa and Latin America. In addition, in Latin America, most ophidian accidents are caused by species of snakes the Viperidae family. Viperidae venoms contain a high percentage of zinc-dependent metalloproteases that play a relevant role in the pathogenesis of the haemorrhaging characteristic of these poisonings. However, some serine proteases are directly involved in these proteolytic events, causing disturbances in hemostasis observed after poisoning. Results of in silico and in vitro experiments show that hesperitin is capable of binding the serine proteases of three distinct snake species and inhibiting the serine protease in four ways as a reversible uncompetitive inhibitor and a reversible mixed inhibitor. Thus, our objectives were to study the interactions between the four serine proteases and hesperitin, as well as to compare these with the interactions between the target proteases and the corresponding antibodies through the spectroscopic techniques. The procedures for isolating, purifying and characterizing target proteins were successfully completed. In addition, we obtained, purified and characterized hesperitin. Utilizing biochemical techniques the activity and inhibition of the target serine proteases were described and point to of a potent action of hesperitin on the four target proteins were calculated. Utilizing biophysical methods were used to describe the interactions between target proteases and hesperitin. Finally, target serine proteases in interactions with the anti-serine protease antibodies were studied and those interactions were compared to the ones observed and described with hesperitin. We concluded that interactions with hesperitin can be exploited to inhibit the action of serine proteases soonMestradoFísico-QuímicaMestre em QuímicaCAPES[s.n.]Tasic, Ljubica, 1970-Salles Junior, Airton GonçalvesArni, Raghuvir KrishnaswamyKawano, Daniel FábioPeroni, Luis AntonioUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de QuímicaPrograma de Pós-Graduação em QuímicaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSantos, Roney Vander dos, 1989-20192019-02-14T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online (107 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1636327SANTOS, Roney Vander dos. Estudo das interações entre a hesperitina e as serina proteases de peçonhas de serpentes. 2019. 1 recurso online (107 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1636327. 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