Avaliação da microbiota intestinal de ratas Wistar submetidas a dieta hipercalórica

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Santos, Vanessa Rodrigues dos
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul
Texto Completo: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2250
Resumo: A obesidade é uma doença crônica, associada a comorbidades como diabetes mellitus II, que afeta aproximadamente um terço da população mundial. Indivíduos obesos podem sofrer alterações na microbiota intestinal em comparação com indivíduos eutróficos, em função principalmente de uma dieta rica em carboidratos e gordura. A maioria dos estudos aponta como consequência da obesidade induzida por dieta uma diminuição na proporção entre os filos Bacteroidetes e Firmicutes, no entanto os resultados podem ser controversos em indivíduos de ambos os sexos. O objetivo do presente trabalho foi submeter um grupo de ratas Wistar à ingestão de dieta hipercalórica, para desenvolvimento do quadro de obesidade, e então avaliar a constituição da microbiota intestinal em comparação aos animais em dieta normal. Foram utilizadas 30 ratas da linhagem Wistar, não obesas e não diabéticas, divididas em dois grupos: grupo 1 (G1) – grupo controle com 15 ratas, alimentadas com ração comercial e água ad libitum; e grupo 2 (G2) – grupo teste com 15 ratas, alimentadas com ração modificada hipercalórica e frutose 20% diluída na água, durante 24 semanas. Foram avaliados parâmetros de crescimento como peso e índice de Lee, e também parâmetros bioquímicos como tolerância a glicose oral e glicemia. Ao final do experimento foram coletadas amostras de fezes da ampola retal de quatro ratas de cada grupo e foi realizada a avaliação da microbiota intestinal, mediante extração de DNA total (kit ZR Fecal DNA MiniPrep – Zymo Research) e sequenciamento de nova geração do gene 16S, em sequenciador MiSeq (Illumina) e com análise de sequências na plataforma Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME). Nas ratas obesas, foi verificado um aumento significativo de Firmicutes em relação ao grupo controle (83,51% versus 64,73%), ao passo que os Bacteroidetes tiveram sua proporção reduzida em função do tratamento (20,47% versus 7,79%). Dos 242 gêneros bacterianos identificados, 14 representaram mais de 50% da população e, desses, 12 apresentaram diferenças significativas de concentração entre os tratamentos. Os gêneros Lactobacillus, Allobaculum e Clostridium foram os mais abundantes na microbiota das ratas obesas, ao passo que o gênero Turicibacter foi o mais abundante no grupo controle. O tratamento com a dieta hipercalórica diminuiu a diversidade de gêneros bacterianos na microbiota intestinal.
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spelling 2021-05-25T18:57:25Z20172021-05-25T18:57:25Z2017https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2250A obesidade é uma doença crônica, associada a comorbidades como diabetes mellitus II, que afeta aproximadamente um terço da população mundial. Indivíduos obesos podem sofrer alterações na microbiota intestinal em comparação com indivíduos eutróficos, em função principalmente de uma dieta rica em carboidratos e gordura. A maioria dos estudos aponta como consequência da obesidade induzida por dieta uma diminuição na proporção entre os filos Bacteroidetes e Firmicutes, no entanto os resultados podem ser controversos em indivíduos de ambos os sexos. O objetivo do presente trabalho foi submeter um grupo de ratas Wistar à ingestão de dieta hipercalórica, para desenvolvimento do quadro de obesidade, e então avaliar a constituição da microbiota intestinal em comparação aos animais em dieta normal. Foram utilizadas 30 ratas da linhagem Wistar, não obesas e não diabéticas, divididas em dois grupos: grupo 1 (G1) – grupo controle com 15 ratas, alimentadas com ração comercial e água ad libitum; e grupo 2 (G2) – grupo teste com 15 ratas, alimentadas com ração modificada hipercalórica e frutose 20% diluída na água, durante 24 semanas. Foram avaliados parâmetros de crescimento como peso e índice de Lee, e também parâmetros bioquímicos como tolerância a glicose oral e glicemia. Ao final do experimento foram coletadas amostras de fezes da ampola retal de quatro ratas de cada grupo e foi realizada a avaliação da microbiota intestinal, mediante extração de DNA total (kit ZR Fecal DNA MiniPrep – Zymo Research) e sequenciamento de nova geração do gene 16S, em sequenciador MiSeq (Illumina) e com análise de sequências na plataforma Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME). Nas ratas obesas, foi verificado um aumento significativo de Firmicutes em relação ao grupo controle (83,51% versus 64,73%), ao passo que os Bacteroidetes tiveram sua proporção reduzida em função do tratamento (20,47% versus 7,79%). Dos 242 gêneros bacterianos identificados, 14 representaram mais de 50% da população e, desses, 12 apresentaram diferenças significativas de concentração entre os tratamentos. Os gêneros Lactobacillus, Allobaculum e Clostridium foram os mais abundantes na microbiota das ratas obesas, ao passo que o gênero Turicibacter foi o mais abundante no grupo controle. O tratamento com a dieta hipercalórica diminuiu a diversidade de gêneros bacterianos na microbiota intestinal.Obesity is a chronic disease, associated with comorbidities such as diabetes mellitus II, which affects approximately one third of the world population. Obese individuals may present changes in the intestinal microbiota compared to normal individuals, mainly due to a diet rich in carbohydrates and fat. Most of the studies indicate as a consequence of diet-induced obesity a decrease in the ratio between the Bacteroidetes and Firmicutes phyla, however the results may be controversial in individuals of both sexes. The objective of the present study was to submit a group of Wistar female rats to the intake of a hypercaloric diet for the development of obesity, and then to evaluate the constitution of the intestinal microbiota as compared to the normal diet. Thirty non-obese and non-diabetic Wistar female rats were divided into two groups: group 1 (G1) – control group with 15 rats, fed with commercial ration and water ad libitum; and group 2 (G2) – test group with 15 rats, fed with hypercaloric modified ration and 20% fructose diluted in water, for 24 weeks. Growth parameters such as weight and Lee index were evaluated, as well as biochemical parameters such as oral glucose tolerance and glycemia. At the end of the experiment fecal samples were collected from the rectal ampulla of four rats from each group and the intestinal microbiota was evaluated by extraction of total DNA (ZR Fecal DNA MiniPrep kit – Zymo Research) and new generation sequencing of the 16S gene in a MiSeq sequencer (Illumina) and sequence analysis on the Quantitative Insights Into Microbial Ecology (QIIME) platform. In the obese rats, a significant increase of Firmicutes was observed in relation to the control group (83.51% versus 64.73%), whereas Bacteroidetes had a reduced proportion as a function of the treatment (20.47% versus 7.79%). Among the 242 bacterial genera identified, 14 represented more than 50% of the population and of these, 12 presented significant concentration differences between treatments. The genera Lactobacillus, Allobaculum and Clostridium were the most abundant in the microbiota of obese rats, whereas the genus Turicibacter was the most abundant in the control group. The treatment with hypercaloric diet decreased the diversity of bacterial genera in the intestinal microbiota.porUniversidade PositivoPrograma de Pós-Graduação em Biotecnologia IndustrialUPBrasilPós-GraduaçãoCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERALBiotecnologiaMicrobiologia industrialObesidadeDietaAvaliação da microbiota intestinal de ratas Wistar submetidas a dieta hipercalóricainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisKarp, Susan Gracehttp://lattes.cnpq.br/8158732509142272Casagrande, Thaís Andrade Costahttp://lattes.cnpq.br/0664201574685996http://lattes.cnpq.br/7652019873150855Santos, Vanessa Rodrigues dosinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sulinstname:Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)instacron:UNICSULORIGINALVanessa Rodrigues dos Santos.pdfVanessa Rodrigues dos Santos.pdfDissertaçãoapplication/pdf1545733http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2250/1/Vanessa%20Rodrigues%20dos%20Santos.pdfc7530be005e4eeb874425e0b38309d95MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81748http://dev.siteworks.com.br:8080/jspui/bitstream/123456789/2250/2/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD52123456789/22502021-05-28 14:18:53.98oai:repositorio.cruzeirodosul.edu.br: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Repositório InstitucionalPRIhttps://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/oai/requestmary.pela@unicid.edu.bropendoar:2021-05-28T17:18:53Repositório Institucional da Universidade Cruzeiro do Sul - Universidade Cruzeiro do Sul (UNICSUL)false
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