Mecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifolia

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Patrícia Gomes da
Data de Publicação: 2014
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNIPAMPA
Texto Completo: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4376
Resumo: A Araucaria angustifolia (BERT.) O. Kuntze (Araucariacea), conhecida como “Pinheiro do Paraná”, é uma conífera endêmica do sul do Brasil, e tem sido utilizada tradicionalmente como inseticida natural em comunidades rurais do sul do Brasil. O objetivo desse estudo foi identificar a constituição química associada ao mecanismo inseticida do extrato metanólico de A. angustifolia (AAME) demonstrando o mecanismo de ação entomotóxico induzido pelo AAME em modelo experimental de baratas da espécie Phoetalia pallida. Os ensaios para a determinação da dose letal mínima (DLM) em baratas da espécie P. pallida, confirmaram a atividade inseticida do extrato em doses a partir de 800g/g de animal. A mesma atividade foi demonstrada pela quercetina (80μg/g), porém, com maior potência comparada ao AAME. Os ensaios de atividade biológica demonstraram uma atividade neurotóxica do AAME e da quercetina, tanto em nível central quanto periférico do inseto. Dessa forma, o AAME (200μg/g) e a quercetina (40μg/g) induziram um aumento no tempo total de grooming realizado pelo inseto, (138.11±5s /30min; p<0.05 e 2305s/30min; p<0.05), respectivamente. A administração de Atropina um inibidor colinérgico não-seletivo no receptor muscarínico (40μg/g), previamente à adição de quercetina (40μg/g) induziu um aumento significativo na atividade de grooming quando comparado à quercetina isoladamente (3503s/30min; p<0.05). Quando o animal foi pré-tratado com Metoctramina (40μg/g), um inibidor seletivo de receptores colinérgicos M2-M3, observou-se o maior aumento no tempo de grooming induzido pela quercetina (40μg/g) (6008s/30min; p<0.01 teste t). Por outro lado, o pré-tratamento com o SCH23390 (40μg/g), um inibidor seletivo de receptores DA-D1, reduziu significativamente o grooming induzido pela quercetina (40μg/g) (906s/30min; p<0.05). A administração de Tiramina agonista dos receptores de tiramina (40μg/g) e hidroxilamina um inibidor da guanilato ciclase (40μg/g), aumentaram significativamente o tempo de grooming induzido pela quercetina (20415s/30min; p<0.05) e (32515s/30min; p<0.01), 6 respectivamente. Quando ensaiados em preparação músculo coxal-adutor metatorácico de P. pallida, tanto o AAME (200μg/g de animal) quando a quercetina (40μg/g) induziram bloqueio neuromuscular irreversível em 120 min de registros (50±9%; p<0.05 e 100±7%; p<0.05), respectivamente. Este último resultado indica uma ação direta do extrato de A. angustifolia sobre o sistema nervoso periférico da barata. Neste trabalho nós demonstramos a atividade inseticida do AAME, utilizando como modelo experimental baratas da espécie P. pallida e nossos resultados confirmam os conhecimentos tradicionais de A. angustifolia como um inseticida natural. A atividade inseticida do AAME é principalmente relatada por sua atividade anti-colinesterásica em insetos, mas também por ação direta em junção neuromuscular. As atividades inibitórias do AAME e quercetina na junção neuromuscular dos insetos devem ser exploradas em uma futura investigação detalhada, mas é sugerida a inibição dos receptores NMDA.
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O objetivo desse estudo foi identificar a constituição química associada ao mecanismo inseticida do extrato metanólico de A. angustifolia (AAME) demonstrando o mecanismo de ação entomotóxico induzido pelo AAME em modelo experimental de baratas da espécie Phoetalia pallida. Os ensaios para a determinação da dose letal mínima (DLM) em baratas da espécie P. pallida, confirmaram a atividade inseticida do extrato em doses a partir de 800g/g de animal. A mesma atividade foi demonstrada pela quercetina (80μg/g), porém, com maior potência comparada ao AAME. Os ensaios de atividade biológica demonstraram uma atividade neurotóxica do AAME e da quercetina, tanto em nível central quanto periférico do inseto. Dessa forma, o AAME (200μg/g) e a quercetina (40μg/g) induziram um aumento no tempo total de grooming realizado pelo inseto, (138.11±5s /30min; p<0.05 e 2305s/30min; p<0.05), respectivamente. A administração de Atropina um inibidor colinérgico não-seletivo no receptor muscarínico (40μg/g), previamente à adição de quercetina (40μg/g) induziu um aumento significativo na atividade de grooming quando comparado à quercetina isoladamente (3503s/30min; p<0.05). Quando o animal foi pré-tratado com Metoctramina (40μg/g), um inibidor seletivo de receptores colinérgicos M2-M3, observou-se o maior aumento no tempo de grooming induzido pela quercetina (40μg/g) (6008s/30min; p<0.01 teste t). Por outro lado, o pré-tratamento com o SCH23390 (40μg/g), um inibidor seletivo de receptores DA-D1, reduziu significativamente o grooming induzido pela quercetina (40μg/g) (906s/30min; p<0.05). A administração de Tiramina agonista dos receptores de tiramina (40μg/g) e hidroxilamina um inibidor da guanilato ciclase (40μg/g), aumentaram significativamente o tempo de grooming induzido pela quercetina (20415s/30min; p<0.05) e (32515s/30min; p<0.01), 6 respectivamente. Quando ensaiados em preparação músculo coxal-adutor metatorácico de P. pallida, tanto o AAME (200μg/g de animal) quando a quercetina (40μg/g) induziram bloqueio neuromuscular irreversível em 120 min de registros (50±9%; p<0.05 e 100±7%; p<0.05), respectivamente. Este último resultado indica uma ação direta do extrato de A. angustifolia sobre o sistema nervoso periférico da barata. Neste trabalho nós demonstramos a atividade inseticida do AAME, utilizando como modelo experimental baratas da espécie P. pallida e nossos resultados confirmam os conhecimentos tradicionais de A. angustifolia como um inseticida natural. A atividade inseticida do AAME é principalmente relatada por sua atividade anti-colinesterásica em insetos, mas também por ação direta em junção neuromuscular. As atividades inibitórias do AAME e quercetina na junção neuromuscular dos insetos devem ser exploradas em uma futura investigação detalhada, mas é sugerida a inibição dos receptores NMDA.Araucaria angustifolia (BERT.) O. Kuntze (Araucariacea) is a conifer endemic from southern Brazil called “Parana pine”. It has been used traditionally in communities of southern Brazil. We have demonstrated, for the first time, the insecticidal activity of Araucaria angustifolia methanolic extract (AAME) and one of its chemical secondary metabolites, quercetin against Phoetalia pallida. Quercetin was more effective than AAME whole extract being lethal at 80g/g (animal weight). Both AAME (200μg/g of animal weight) and quercetin (40μg/g of animal weight) induced increase in the time of grooming activity (138.11±5s /30min; p<0.05) and (2305s/30min; p<0.05), respectively. The injection of atropine (40μg/g) combined with quercetin (40μg/g of animal weight) significantly increased the grooming levels to over the control values of quercetin (3503s/30min; p<0.05). When methoctramine (40μg/g), a selective inhibitor of M2-M3 cholinergic receptor was combined with quercetin (40μg/g of animal weight) there was the highest increase on the grooming pattern (6008s/30min; p<0.01). When the SCH 23390 (40μg/g), a selective DA-D1 receptor blocker was administrated 15min earlier the treatment with quercetin (40μg/g) there was a significative inhibition of the grooming levels (906s/30min; p<0.05). Treatments with Tyramine (40μg/g) and Hydroxylamine (40μg/g), a Guanylate Cyclase (GC) induced a significative increase in the quercetin-induced grooming activity (20415s/30min; p<0.05) and (32515s/30min; p<0.01), respectively. Both AAME and quercetin were able to complete inhibit cockroach neuromuscular transmission in 120 min recordings (50±9% n=6; p<0.05) and (100±7% n=10; p<0.05), respectively . The later result, point out to a direct action of the extract on insect peripheral nervous system. The results presented here validate the insecticide activity of A. angustifolia methanolic extract in P. pallida. Phenolic compounds presents in this extract era likely to be involved in the insecticide activity of AAME. The mechanism of insecticide activity is complex and involve both Central and Peripheral Nervous System. The activation of events that initiate with the 8 activation of Muscarinic Auto-receptors and/or cholinergic interneurons, could lead to an increase of cytosolic IP3 and Ca2+ concentration which could induce a dopamine release in the insect Nervous System. Concerning to the neuromuscular blockage, a further pharmacological investigation would be necessary to clarify this effect. However, one cannot disregard a direct action of quercetin on insect NMDA receptors.porUniversidade Federal do PampaUNIPAMPABrasilCampus São GabrielCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICASAraucaria angustifoliaInseticida naturalNeurotoxicidadeQuercetinaBaratasNatural insecticideNeurotoxicityQuercetinCockroachMecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifoliainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIPAMPAinstname:Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)instacron:UNIPAMPAORIGINALMecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifolia.pdfMecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifolia.pdfapplication/pdf706238https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/bitstream/riu/4376/1/Mecanismo%20da%20atividade%20entomot%c3%b3xica%20induzida%20pelo%20extrato%20metan%c3%b3lico%20de%20araucaria%20angustifolia.pdf6640ca5976ca6cb283b3667c85073c29MD51LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-81894https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/bitstream/riu/4376/2/license.txt8a7faf2cb3270a2d6cad91a530778753MD52TEXTMecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifolia.pdf.txtMecanismo da atividade entomotóxica induzida pelo extrato metanólico de araucaria angustifolia.pdf.txtExtracted texttext/plain56823https://repositorio.unipampa.edu.br/jspui/bitstream/riu/4376/3/Mecanismo%20da%20atividade%20entomot%c3%b3xica%20induzida%20pelo%20extrato%20metan%c3%b3lico%20de%20araucaria%20angustifolia.pdf.txt18e6cdf3aec0521301da1f1b3ec6efa4MD53riu/43762019-08-22 03:00:52.415oai:repositorio.unipampa.edu.br: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Repositório InstitucionalPUBhttp://dspace.unipampa.edu.br:8080/oai/requestsisbi@unipampa.edu.bropendoar:2019-08-22T06:00:52Repositório Institucional da UNIPAMPA - Universidade Federal do Pampa (UNIPAMPA)false
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