Interações entre os níveis de NO,ROS e atividade HO-1 com a apoptose de células mononucleares de sangue periférico e leucócitos de baço de cães com leishmaniose visceral

• Main Author: Leal, Aline Aparecida Correa [UNESP]
• Publication Date: 2016
• Format: Master thesis
• Language: por
• Source: Repositório Institucional da UNESP
• Download full: http://hdl.handle.net/11449/141456
• topic: Cães; Leishmania infantum; Zoonoses; Dogs; Leishmania infantum; Zoonoses

Leishmania são protozoários intracelulares obrigatórios que infectam células fagocitárias de mamíferos ocasionando a leishmaniose visceral canina (LVC). Por apresentarem um intenso parasitismo cutâneo, os cães infectados possuem papel chave na transmissão da doença. Para sobreviver no hospedeiro, as leishmanias são capazes de desenvolver mecanismos de escape por alterações das respostas de células fagocitárias, tais como o NO e o ROS responsáveis pela morte intracelular do parasita. A HO-1 também pode estar envolvida na regulação da resposta imune, porém seu papel na leishmaniose visceral canina ainda não está claro. A produção excessiva de NO, ROS e HO-1 pode ser prejudicial e estar relacionada com a apoptose e desregulação imunológica na LVC. Assim o este estudo teve a finalidade de investigar os níveis de ROS, NO e atividade HO-1 em células mononucleares do sangue periférico e leucócitos do baço e sua correlação com a apoptose celular. Para isso foram utilizadas células mononucleares sanguíneas e leucócitos de baço de cães infectados e saudáveis. As células foram isoladas e cultivadas durante 24 horas, na sequencia foram incubadas com sondas para NO ou ROS e foi determinada a apoptose celular. Todos as análises foram realizadas por citômetria de fluxo. Após a lise das células em cultura, a atividade HO-1 foi determinada no lisado celular por método colorimétrico. O metabolismo oxidativo estava reduzido e a taxa de apoptose dos mononucleares sanguíneos aumentada, por influência do ROS. Os níveis de ROS e NO estavam diminuídos nos leucócitos do baço de cães infectados, e maior taxa de apoptose celular foi observada nos leucócitos de baço de cães infectados. A atividade da HO-1 obtida estava reduzida tanto nos monucleares do sangue como nos leucócitos do baço dos animais infectados, quando comparados aos animais saudáveis, porém não mostrou correlação com a apoptose. Concluímos que os mecanismos indutores de apoptose diferem nos sítios de infecção, ou seja, no baço os reativos de oxigênio e de nitrogênio estão envolvidos com a inibição do processo de morte celular, no entanto a atividade de hemooxigenase pode ter influência na apoptose.