Influência de grânulos citoplasmático em oócitos no desenvolvimento embrionário e início do fetal em bovinos

• Autor(a) principal: Rosa, Paola Maria da Silva
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/191454
• topic: Avaliação morfológica; Qualidade oocitária; Dimorfismo citoplasmático.; Morphological evaluation; Oocyte quality; Cytoplasmic dimorphism

Análises morfológicas para seleção de oócitos podem subestimar os gametas femininos em relação ao seu potencial de desenvolvimento, pela subjetividade da técnica por identificar apenas alterações aparentes em microscopia de luz. Este método pode não ser capaz de avaliar por exemplo, a competência a nível molecular, nuclear e citoplasmática do oócito, como perfil de transcritos acumulados, organização de organelas e vias de apoptose ativas. Portanto, sob a hipótese que grânulos citoplasmáticos em oócitos não alteram a capacidade de desenvolvimento, a qualidade dos embriões gerados e o desenvolvimento embrionário e fetal, o objetivo do nosso estudo foi avaliar os efeitos de grânulos citoplasmáticos na produção in vitro de embriões. Para testar esta hipótese, utilizamos o modelo bovino em dois experimentos para avaliar grupos de oócitos com citoplasma homogêneo (controle) e oócitos que apresentam granulações no citoplasma (granular). No experimento 1, através de amostras de ovários de abatedouro, observamos que: i. Nas análises de perfil funcional do oócito, estruturas que possuem grânulos citoplasmáticos apresentam maiores níveis de caspase 3 ativa (indicador da cascata de apoptose), no entanto não demonstram nenhuma diferença em relação a atividade de junções GAP (comunicação oócito-células do cumulus), ii: Nas análises de expressão de genes marcadores de qualidade realizadas em oócitos, blastocistos e células do cumulus, apenas o transcrito ZAR1 foi diferencialmente expresso, sendo pouco detectado em oócitos do grupo granular e iii: Em análises de taxas e cinética de desenvolvimento embrionário (clivagem, blastocisto), não detectamos diferenças entre os grupos. No experimento 2, através de amostras obtidas por aspirações foliculares, observamos que, i: As taxas de desenvolvimento embrionário (clivagem, blastocisto e prenhez) não foram diferentes em relação a presença de grânulos citoplasmáticos e ii: O desenvolvimento fetal (diâmetro de vesícula embrionária, diâmetro biparietal e comprimento crânio-caudal) também foi similar. Portanto, concluímos que apesar de oócitos que apresentam grânulos citoplasmático, possuírem maiores níveis de caspase 3 ativa e menor abundância de transcritos de ZAR1, não foi detectada diferença no potencial de desenvolvimento pré e pós-implantação, bem como alterações no desenvolvimento fetal. Nossos resultados demonstram que o citoplasma granular no modelo bovino não afeta o potencial de desenvolvimento embrionário, e estas estruturas podem ser incluídas para produção in vitro de embriões sem prejuízos aparentes.