Otimização da Terapia Fotodinâmica em micro-organismos sob inibição de bomba de efluxo

• Autor(a) principal: Coletti, Tatiana Maria Starck Fogaça de Aguiar [UNESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/147071
• topic: Terapia fotodinâmica antimicrobiana; Bomba de efluxo; Azul de metileno; Biofilme

A necessidade de superar a resistência dos micro-organismos frente aos fármacos disponíveis, a fim de se chegar ao sucesso terapêutico leva a uma constante exploração de novas abordagens para este fim. Os sistemas de efluxo multidrogas tem sido um profundo obstáculo para uma terapêutica bem-sucedida utilizando-se antimicrobianos existentes hoje no mercado. A descoberta de bloqueadores desses sistemas complementa estudos envolvendo terapias nãoconvencionais, como a Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (Antimicrobial Photodynamic Therapy - aPDT). Este estudo teve como objetivo avaliar a aPDT mediada pelo azul de metileno (AM) associada com inibidores de bomba de efluxo em diferentes espécies microbianas. Para isso, foram utilizados como inibidor o verapamil, em biofilmes de Escherichia coli e Staphylococcus aureus, e verapamil e farnesol para Candida albicans. A determinação da combinação ideal de Inibidor/AM foi feita através do cruzamento de diferentes concentrações dos compostos, de tal forma que todas as combinações possíveis fossem avaliadas, nas concentrações previamente determinadas através da concentração inibitória mínima. O metabolismo celular para todas as condições experimentais foi avaliado por meio do ensaio de redução do XTT. As combinações onde foram verificadas a redução de 80% no metabolismo foram plaqueadas e a contagem de células (UFC/ml) determinada. Os resultados obtidos permitiram observar que para E. coli, foram necessárias uma dose maior de luz (44 J/cm2) e uma menor concentração de verapamil (215 µg/mL) para que houvesse uma redução de 3,4 log10 (UFC/mL), comparado a S. aureus, que necessitou de uma dose de luz menor (22 J/cm2), e uma maior concentração de verapamil (312 µg/mL), com uma redução de 3,65 log10 (UFC/mL). A concentração de AM foi a mesma para estes resultados. Em C. albicans, foi visto que o verapamil apresentou uma menor redução de células viáveis do biofilme, comparado ao farnesol. A combinação de verapamil/AM que apresentou a maior redução foi 215/400 µg/mL (2,82 log10 (UFC/mL), e para o farnesol 22/200 µg/mL (3,82 log10 (UFC/mL), com a mesma dose de luz de 44 J/cm2. De forma resumida, a aPDT mediada por AM, associada com um inibidor de bomba de efluxo, exibiu uma maior redução no biofilme microbiano, comparado ao grupo em que o inibidor não estava presente.