Germinação de sementes e conservação de orquídeas nativas das Américas

• Autor(a) principal: Pereira, Suzana Targanski Sajovic [UNESP]
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/192448
• topic: Criopreservação; Fontes de luz; Meio de cultivo; Protocormo; Semeio in vitro; Solução pré-vitrificante; Cryopreservation; Light sources; Culture medium; Protocorm; In vitro sowing; Pre-vitrification solution

A propagação in vitro e conservação ex situ, são técnicas, que podem ser aprimoradas através da escolha adequada da fonte luminosa, das formulações do meio de cultivo e de crioprotetores. O presente estudo teve por objetivos: (i) estudar fontes de luz a partir de lâmpadas fluorescentes e diodos emissores de luz (LEDs) e formulações de meio de cultivo na germinação e no desenvolvimento inicial da espécie de orquídea Brassavola perrinii e (ii) avaliar a eficiência da solução vitrificante (PVS2) combinada ao floroglucinol 1% em nitrogênio líquido para a criopreservação de sementes maduras das espécies Encyclia cordigera e Epidendrum ciliare. Os experimentos foram instalados em delineamento inteiramente casualizado e ambos foram duplicados. No primeiro os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 5x4 com cinco condições de luz: LF - lâmpada fluorescente; LB - LED branco; LA - LED azul; LV- LED vermelho e LAV – LED azul (50%) e vermelho (50%) e quatro formulações de meio de cultivo (MS, ½MS, VW e K), com quatro repetições e média de 125 sementes por parcela. Aos 90 dias após a semeadura foram avaliadas a porcentagem de germinação, de protocormos clorofilados e o desenvolvimento dos protocormos através das classes: P1, P2, P3 e P4 para cálculo do índice de desenvolvimento protocormos. No segundo experimento foram oito tratamentos: 1) germinação in vitro direta; 2) imersão direta em nitrogênio líquido, sem crioprotetores; 3) PVS2 por 60 min; 4) PVS2 por 120 min; 5) PVS2 por 180 min; 6) PVS2 + floroglucinol1% por 60 min; 7) PVS2 + floroglucinol1% por 120 min; 8) PVS2 + floroglucinol1% por 180 min, com cinco repetições e média de 120 sementes por parcela. Imersão em nitrogênio líquido, à temperatura de -196 C por 72 horas. Foram avaliadas a viabilidade e a porcentagem de germinação das sementes, antes e após a aplicação dos tratamentos. Aos 45 dias após a recuperação da criopreservação foi avaliado o desenvolvimento dos protocormos através das classes morfológicas P1, P2 e P3. Os dados foram submetidos à análise de variância e aqueles com valor percentual foram previamente transformados em arco-seno (x/100)1/2. As médias foram comparadas pelo teste de Tukey p0,05. Para B. perrinii, concluiu-se que o percentual de germinação não foi influenciado pelos espectros de luz, mas foi maior nas formulações ½ MS e VW. O maior índice de desenvolvimento dos protocormos de B. perrinii foi observado quando submetidos ao espectro de luz da fonte de iluminação com lâmpadas fluorescentes em meio de cultivo Vacin e Went. A utilização da solução vitrificante (PVS2) combinado ao floroglucinol 1% foi eficiente na recuperação de sementes criopreservadas em nitrogênio líquido, elevou a porcentagem de germinação e desenvolvimento dos protocormos para as duas espécies em estudo. Os resultados observados indicam o uso de PVS2 combinado com floroglucinol 1% por 60 min para a criopreservação de sementes de E. cordigera, e PVS2 com floroglucinol 1% por 180 min para sementes de E. ciliare. O presente estudo também indica que a resposta à criopreservação após o armazenamento à frio é específica da espécie e requer ajustes no tempo de exposição ao PVS2 a 0 °C antes da imersão em nitrogênio líquido.