Biossensores baseados em filmes de Langmuir-Blodgett e Langmuir-Schaefer de lipídios, bisftalocianina de lutécio e tirosinase.

• Autor(a) principal: Pereira, Matheus Santos
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/191028
• topic: Biossensores; Polifenóis; Filmes de Langmuir; Chá Mate

O presente trabalho descreve o estudo da interação entre o lipídio AA (ácido araquídico), os fosfolipídios DPPC (1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidilcolina) e DPPG (1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphoglycerol) com a enzima Ty (tirosinase). Através da interação monocamada lipídica/enzima foi desenvolvido um biossensor para a detecção de polifenóis. O estudo de interação foi realizado via filmes de Langmuir, ou seja, monocamadas lipídicas dispostas na interface ar/água que mimetizaram modelos de membranas biológicas, sendo estes analisados através de isotermas (π-A) e do módulo de compressibilidade. Além disso, foram realizadas medidas de PM-IRRAS (do inglês - Polarization Modulation - Infrared Reflection-Adsorption Spectroscopy) que auxiliaram no estudo da interação membrana/enzima em nível molecular. Por meio desses estudos foi possível observar uma maior interação e incorporação da enzima nas monocamadas de DPPC/Ty. Então, os filmes de Langmuir foram depositados em ITO (substrato eletrocondutor de vidro recoberto com óxido de estanho dopado com índio) utilizando a técnica de Langmuir-Blodgett (LB). Os filmes foram avaliados como biossensores para detecção de polifenóis em amostras padrões de catecol por voltametria cíclica. Nessa etapa, foram avaliados os efeitos das matrizes lipídicas, número de camadas e concentração do eletrólito de suporte no processo eletrocatalítico de redução do catecol. Além disso, foi avaliado o efeito da incorporação do mediador eletrônico LuPc2 (bisftalocianina de Lutécio) à matriz lipídica. Os estudos eletroquímicos indicaram que os filmes de DPPC/Ty e de DPPC:LuPc2/Ty, ambos contendo 3 camadas LB, apresentaram resultados promissores para a aplicação sensorial, porem valores de limites de detecção (7.59 vs. 7,08 µmol L-1) e , intervalo linear de reposta (10,0 a 400 µmol L-1 vs. 8,00 a 400 µmol L-1) demonstram que o uso da LuPc2 mediador eletrônico não é tão vantajoso como o esperado. A partir disso, filmes LS de DPPC/Ty que apresentaram propriedades similares aos filmes LB foram testados em amostras reais de chá, sendo os valores de concentração encontrados compatíveis aos do método padrão de “Folin-Ciocalteu”.