Investigação do potencial de utilização em terapia celular de células tronco mesenquimais cultivadas em matrizes de quitosana-colágeno-genipina, em petakas e após criopreservação

• Autor(a) principal: Zotarelli Filho, Idiberto José
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/180311
• topic: Células tronco mesenquimais adiposas; Biomatrizes poliméricas; Engenharia de tecidos; Estabilidade cromossômica; Estabilidade cromatídica; Adipose mesenchymal stem cells; Polymeric biomatrices; Tissue engineering; Chromosomal stability; Chromatidic stability

Introdução: A terapia de tecidos e órgãos artificiais tem resultado no aumento da expectativa de vida de milhares de pessoas, sendo que uma a cada cinco com mais de 65 anos já foi beneficiada com tecidos e órgãos gerados in vitro. Assim, torna-se imperativo o desenvolvimento de novas estratégias de desenvolvimento e optimização de biomatrizes e de células tronco, para atender a demanda, que sejam capazes de promover regeneração de tecidos e órgãos, amortização dos custos e uso seguro em nível celular. Neste contexto, as células tronco mesenquimais adiposas (CTMA) tem despertado grande interesse científico. Objetivo: Foi analisado a biocompatibilidade em nível celular e cromossômica/cromatídica da biomatriz de quitosana-colágeno-genipina com CTMA humanas. Métodos: Foram testadas diferentes concentrações de genipina para estabelecimento da matriz, por análise de intumecimento, degradação e grau de reticulação, por espectrofotometria. As CTMA foram obtidas por processamento enzimático do lipoaspirado humano e cultivadas em Petakas (controle) e na biomatriz selecionada após caracterização físico-química, com e sem criopreservação. As CTMA foram caracterizadas quanto a adesão e proliferação por microscopia óptica convencional, contraste de fase e eletrônica de varredura, imunofenotipagem, viabilidade celular com teste de azul de Trypan, estabilidade cromossômica, por técnicas citogenéticas convencionais, potencial neoplásico por teste de Papanicolau e quanto a capacidade de diferenciação celular em três tipos de tecidos, com abordagen estatística. Resultados: A biomatriz intercruzada com 0,75% v/v de genipina foi a melhor para os estudos celulares. Os testes de adesão, proliferação e capacidade de diferenciação mostraram que as CTMA em contato com a biomatriz mantiveram suas características naturais. Os testes citogenéticos, e do papanicolau das CTMA após diferentes condições de cultivo na biomatriz não revelaram frequências estatisticamente diferentes das células controles (cultivadas sem a biomatriz). Conclusão: Os resultados sugerem que a biomatriz de quitosana-colágeno-genipina com 0,75% v/v de genipina é biocompativel em nível celular e cromossômico, com células tronco mesenquimais adiposas.