Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]
Data de Publicação: 2018
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/180356
Resumo: O objetivo deste estudo foi aplicar técnicas de manipulação cromossômica para obtenção de indivíduos tetraploides e ginogenéticos de lambari (Astyanax altiparanae). Para tetraploidização, foram aplicados diferentes choques de temperatura (40°C por 2 minutos) com 16, 18, 20, 22, 24 e 26 minutos pós-fertilização (mpf) para inibição da clivagem. A análise em citometria de fluxo mostrou que o choque aplicado com 26 mpf garantiu a maior porcentagem de tetraploides (94,55%), sendo os resultados também confirmados por esfregaço sanguíneo e cariotipagem. Para indução de ginogenéticos foi primeiramente avaliada diferentes doses de irradiação UV (40, 80 e 120 mj/cm2) para inativação dos espermatozoides, sendo verificado que a dose de 80 mj/cm2 foi suficiente para assegurar a ativação dos oócitos e obtenção de larvas 100% haploides. Posteriormente, para restaurar a diploidia foi aplicado choque de temperatura (40°C por 2 minutos) para evitar a liberação do segundo corpúsculo polar. A análise molecular confirmou que os peixes ginogenéticos apresentam herança exclusivamente materna e apresentam número de cromossomos idêntico ao grupo controle. Em relação a razão sexual, a grande quantidade de fêmeas obtidas sugere que o sistema genético de determinação sexual seja homogamético para fêmeas (XX; XY). Este foi o primeiro protocolo de ginogênese em uma espécie da região Neotropical e primeiro de tetraploidização em uma espécie da família Characidae. Portanto, os resultados são inovadores e poderão ser aplicados em futuros estudos de manipulação cromossômica em espécies nativas.
id UNSP_71e0d900ebb33e2e90995d8c53be3174
oai_identifier_str oai:repositorio.unesp.br:11449/180356
network_acronym_str UNSP
network_name_str Repositório Institucional da UNESP
repository_id_str 2946
spelling Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)Chromosome manipulation techniques in lambari (Astyanax altiparanae)AquiculturaBiotecnologiaPoliploidiaTetraploidiaGinogêneseO objetivo deste estudo foi aplicar técnicas de manipulação cromossômica para obtenção de indivíduos tetraploides e ginogenéticos de lambari (Astyanax altiparanae). Para tetraploidização, foram aplicados diferentes choques de temperatura (40°C por 2 minutos) com 16, 18, 20, 22, 24 e 26 minutos pós-fertilização (mpf) para inibição da clivagem. A análise em citometria de fluxo mostrou que o choque aplicado com 26 mpf garantiu a maior porcentagem de tetraploides (94,55%), sendo os resultados também confirmados por esfregaço sanguíneo e cariotipagem. Para indução de ginogenéticos foi primeiramente avaliada diferentes doses de irradiação UV (40, 80 e 120 mj/cm2) para inativação dos espermatozoides, sendo verificado que a dose de 80 mj/cm2 foi suficiente para assegurar a ativação dos oócitos e obtenção de larvas 100% haploides. Posteriormente, para restaurar a diploidia foi aplicado choque de temperatura (40°C por 2 minutos) para evitar a liberação do segundo corpúsculo polar. A análise molecular confirmou que os peixes ginogenéticos apresentam herança exclusivamente materna e apresentam número de cromossomos idêntico ao grupo controle. Em relação a razão sexual, a grande quantidade de fêmeas obtidas sugere que o sistema genético de determinação sexual seja homogamético para fêmeas (XX; XY). Este foi o primeiro protocolo de ginogênese em uma espécie da região Neotropical e primeiro de tetraploidização em uma espécie da família Characidae. Portanto, os resultados são inovadores e poderão ser aplicados em futuros estudos de manipulação cromossômica em espécies nativas.The aim of this study was to apply techniques of chromosome set manipulation to obtain gynogenetic and tetraploid individuals in lambari (Astyanax altiparanae). For tetraploidization, it was applied different temperature shocks (40°C for 2 min) at 16, 18, 20, 22, 24 and 26 minutes post-fertilization (mpf) to inhibit the cleavage. The flow cytometric analysis showed that heat shock applied at 26 mpf enabled the highest percentage of tetraploids (94.55%), which were also confirmed by nuclear diameter of erythrocytes and chromosome counting. For gynogenetic induction, first it was evaluated the best UV-dosage for inactivation of sperm DNA (40, 80 and 120 mj/cm2) and it was verified that the dosage of 80 mj/cm2 ensure oocyte activation and 100% haploid larvae. Afterwards, to restore the diploidy it was applied a temperature shock (40° for 2 min) to avoid the extrusion of the 2nd polar body. The molecular biology confirmed that that gynogenetic fish present exclusive maternal inheritance e also showed the same number of chromosomes of the control group. Sex ratio showed increased amount of females, which suggest that the genetic system of sexual determination are homogametic for females (XX; XY). This is the first protocol of gynogenesis in a species of the Neotropical region and the first tetraploidizaiton in a species of the family Characidae. Therefore, the results are innovative and could be applied in future studies of chromosome set manipulation in native species.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)FAPESP 2016/12383-0CAPES - Código de Financiamento 001Universidade Estadual Paulista (Unesp)Nakaghi, Laura Satiko Okada [UNESP]Yasui, George Shigueki [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]2019-01-07T14:00:18Z2019-01-07T14:00:18Z2018-11-01info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11449/18035600091124933004102049P792034137339441270000-0002-0939-4865porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2024-06-05T17:31:27Zoai:repositorio.unesp.br:11449/180356Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462024-08-05T18:08:57.736283Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
dc.title.none.fl_str_mv Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
Chromosome manipulation techniques in lambari (Astyanax altiparanae)
title Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
spellingShingle Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]
Aquicultura
Biotecnologia
Poliploidia
Tetraploidia
Ginogênese
title_short Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
title_full Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
title_fullStr Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
title_full_unstemmed Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
title_sort Técnicas de manipulação cromossômica no lambari (Astyanax altiparanae)
author Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]
author_facet Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Nakaghi, Laura Satiko Okada [UNESP]
Yasui, George Shigueki [UNESP]
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.author.fl_str_mv Nascimento, Nivaldo Ferreira do [UNESP]
dc.subject.por.fl_str_mv Aquicultura
Biotecnologia
Poliploidia
Tetraploidia
Ginogênese
topic Aquicultura
Biotecnologia
Poliploidia
Tetraploidia
Ginogênese
description O objetivo deste estudo foi aplicar técnicas de manipulação cromossômica para obtenção de indivíduos tetraploides e ginogenéticos de lambari (Astyanax altiparanae). Para tetraploidização, foram aplicados diferentes choques de temperatura (40°C por 2 minutos) com 16, 18, 20, 22, 24 e 26 minutos pós-fertilização (mpf) para inibição da clivagem. A análise em citometria de fluxo mostrou que o choque aplicado com 26 mpf garantiu a maior porcentagem de tetraploides (94,55%), sendo os resultados também confirmados por esfregaço sanguíneo e cariotipagem. Para indução de ginogenéticos foi primeiramente avaliada diferentes doses de irradiação UV (40, 80 e 120 mj/cm2) para inativação dos espermatozoides, sendo verificado que a dose de 80 mj/cm2 foi suficiente para assegurar a ativação dos oócitos e obtenção de larvas 100% haploides. Posteriormente, para restaurar a diploidia foi aplicado choque de temperatura (40°C por 2 minutos) para evitar a liberação do segundo corpúsculo polar. A análise molecular confirmou que os peixes ginogenéticos apresentam herança exclusivamente materna e apresentam número de cromossomos idêntico ao grupo controle. Em relação a razão sexual, a grande quantidade de fêmeas obtidas sugere que o sistema genético de determinação sexual seja homogamético para fêmeas (XX; XY). Este foi o primeiro protocolo de ginogênese em uma espécie da região Neotropical e primeiro de tetraploidização em uma espécie da família Characidae. Portanto, os resultados são inovadores e poderão ser aplicados em futuros estudos de manipulação cromossômica em espécies nativas.
publishDate 2018
dc.date.none.fl_str_mv 2018-11-01
2019-01-07T14:00:18Z
2019-01-07T14:00:18Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11449/180356
000911249
33004102049P7
9203413733944127
0000-0002-0939-4865
url http://hdl.handle.net/11449/180356
identifier_str_mv 000911249
33004102049P7
9203413733944127
0000-0002-0939-4865
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UNESP
instname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
instname_str Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron_str UNESP
institution UNESP
reponame_str Repositório Institucional da UNESP
collection Repositório Institucional da UNESP
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1808128901798428672