Efeito de um modelo de hipóxia no acoplamento angiogênese-osteogênese : um olhar às microvesículas e potenciais aplicações biotecnológicas

• Autor(a) principal: Gomes, Anderson Moreira
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: https://hdl.handle.net/11449/251142
• topic: Osso; Angiogênese; Hipóxia; Bioengenharia de tecidos; Vesículas; Bone; Angiogenesis; Hypoxia; Endothelium; Microvesicles

Nos últimos anos, nosso grupo tem expandido a compreensão acerca dos mecanismos envolvidos no crosstalk entre célula do endotélio e células ósseas. Importante destaque tem sido dado às microvesículas extracelulares, e associar essa experiência recente do acoplamento entre angiogênese e osteogênese, com o estado de hipóxia parecesse fundamental para avanços biotecnológicos na área. Assim, conhecer de maneira aprofundada o envolvimento da hipóxia coordenando este acoplamento representa um passo extremamente significante na busca por terapias mais eficazes, no sentido de restabelecer o paciente mais rapidamente, devolvendo-o a sociedade e ao mercado de trabalho, com diminuição de custos do sistema público de saúde durante seu período de convalescença. Para tal modelo, propomos o tratamento de células endoteliais com CoCl2, um modelo químico de hipóxia. Submeter células endoteliais ao modelo de shear-stress, na presença e/ou ausência de CoCl2. Separar e caracterizar microvesículas liberadas por células endoteliais, em condição de hipóxia ou não. Com o objetivo de melhor compreender o papel de microvesículas no acoplamento da angiogênese e osteogênese em ambiente de hipóxia, pretendemos especificamente: 1. Avaliar a citotoxicidade do CoCl2 em células endoteliais e osteogênicas; 2. Submeter células endoteliais ao modelo de shear-stress, na presença e/ou ausência de CoCl2; 3. Coletar o meio condicionado e verificar seu potencial osteogênico em células indiferenciadas; 4. Separar e caracterizar microvesículas liberadas por células endoteliais, em condição de hipóxia ou não. Nossos resultados mostraram que a hipoxia afeta processos celulares e vias de sinalização que ligam angiogênese e osteogênese, principalmente via proteínas VEGF e HIF em células endoteliais e pré-osteoblastos. Os ensaios nos trazem suporte para sugerir que isso ocorre direta ou indiretamente através de vesículas extracelulares carregadas com lncRNA, que influenciam a formação de vasos sanguíneos e a diferenciação de osteoblastos.