Componentes estruturais da matriz do biofilme de Paracoccidioides spp. e sua interação com diferentes microrganismos

• Autor(a) principal: Oliveira, Lariane Teodoro
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/194375
• topic: Biofilme; matriz extracelular; Paracoccidioides spp.; Biofilme dupla- espécie; extracelular matrix

A habilidade de formar biofilme por Paracoccidioides brasiliensis ocorre tanto in vitro como in vivo. A paracoccidioidomicose é uma doença sistêmica que envolve, primariamente, os pulmões e, posteriormente, dissemina-se para outros órgãos e sistemas, incluindo a cavidade bucal. As lesões bucais podem estar associadas a várias bactérias e fungos e a co-agregação de Paracoccidioides spp com essas bactérias e fungos ainda não foi demonstrada. Além disso, os princípios básicos da formação de biofilme deste fungo e a sua compreensão molecular e organização estrutural precisam ser mais bem conhecidos, visando melhores abordagens terapêuticas. Assim, o estudo teve como objetivo caracterizar os elementos estruturais da matriz do biofilme monoespécie de Paracoccidioides spp., bem como avaliar a interação desse fungo com as bactérias Streptococcus mutans e Staphylococcus aureus e com o fungo Candida albicans na formação de biofilme. Foram utilizados os isolados P. brasiliensis (Pb18), P. lutzii (Pb01 e 8334) e P. restrepiensis (339 e 192), na fase leveduriforme, avaliando-se a atividade metabólica, a biomassa total e a estrutura tridimensional dos biofilmes. A matriz extracelular dos biofilmes de Paracoccidioides spp. foi extraída por sonicação e foram quantificados os polissacarídeos, proteínas e DNA extracelular (eDNA). Todas as cepas estudadas de Paracoccidioides foram capazes de formar biofilme, apresentando valores maiores de atividade metabólica e de biomassa em 144 horas. A matriz do biofilme de P. brasiliensis foi similar ao de P.lutzii, destacando-se a presença maior de polissacarídeos, seguido de proteínas e de eDNA. Os biofilmes dupla-espécies de Paracoccidioides spp. com S. mutans e S. aureus, de modo geral, mostraram antagonismo evidenciado pelos resultados de biomassa total, atividade metabólica, contagem de colônias e eletromicrografias, os quais mostraram inibição no crescimento dos fungos. Em contraste, a interação de P. brasiliensis com C. albicans mostrou que os dois microrganismos podem coexistir em um mesmo ambiente, conforme análise in vitro e in vivo no modelo Galleria mellonella. Esses dados ampliam o conhecimento associado à dinâmica de crescimento de biofilme fúngico e pode contribuir para a descoberta de novas estratégias terapêuticas para essas infecções.