Biotransformação de arilacetonitrilas α-substituídas, blocos construtores para síntese de drogas com atividade antiparasitária
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Trabalho de conclusão de curso |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNESP |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/11449/156074 http://www.athena.biblioteca.unesp.br/exlibris/bd/capelo/2017-09-28/000890236.pdf |
Resumo: | O presente estudo avaliou o potencial de micro-organismos isolados da diversidade brasileira quanto à presença das enzimas nitrila hidratase (NHase)/amidase e/ou nitrilase (Nase), e sua capacidade de converter mandelonitrila em ácido mandélico e/ou mandelamida. Os micro-organismos foram isolados a partir de amostras de solo obtidas de duas localidades distintas. A primeira delas foi uma região da UNESP - Rio Claro que faz divisa com a FEENA (Floresta Estadual Edmundo Navarro de Andrade), e a segunda localidade foi a Fecularia Plaza, uma usina de beneficiamento de mandioca na cidade de Santa Maria da Serra. Após o isolamento dos micro-organismos, os mesmos foram induzidos a produzirem as enzimas de interesse. Para avaliação do potencial enzimático dos micro-organismos selecionados, foi utilizado um ensaio colorimétrico em formato miniaturizado baseado em alterações de pH. Este ensaio foi uma modificação de um ensaio anterior, diferindo-se deste último pela presença do inibidor de amidase DEPA (dietilaminofosforamida), capaz de distinguir entre as rotas metabólicas da Nase e NHase/amidase. Foram avaliados 8 micro-organismos distintos por ensaio. Após incubação, foi observada a mudança de coloração do meio reacional pela leitura das placas por inspeção visual, com alteração da coloração azul (inicial) para verde claro ou amarelo, por exemplo. A partir deste ensaio, foi possível a seleção de 9 micro-organismos promissores para prosseguimento dos estudos. Foram obtidos alguns falsos-positivos, porém, estes foram identificados através de análises realizadas por GC-MS. Os 9 micro-organismos selecionados foram, então, utilizados em reações de transformação da mandelonitrila em escala um pouco maior (microtubos de 1,5 mL) comparada àquelas realizadas em microplaca de 96 poços (200 l). Decorrido o tempo de reação, foram realizadas extrações da fase aquosa de cada... |
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