Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/126450
http://www.athena.biblioteca.unesp.br/exlibris/bd/cathedra/27-07-2015/000839743.pdf
Resumo: Human Cytogenetics is the study of chromosomes, their structure and their inheritance, applied to the practice of medical genetics. For nearly fifty years the chromosomal abnormalities, microscopically visible changes in the number and / or structure of chromosomes, may be responsible for a number of clinical conditions known as chromosomal aberrations, which are a category of constitutional or acquired genetic diseases. Several amendments were described in genetic diseases and neoplastic diseases of hematologic origin, aiding in the diagnosis, prognosis, classification and monitoring of the disease. The aim of this study was to standardize the classical technique in cytogenetics by evaluating the banding G by enzymatic digestion with trypsin and by denaturation with citrate buffer at high temperature, assisting in the karyotype view. In this study we used peripheral blood samples of normal individuals. Cell culture was performed by culturing in situ method, following the method of Moorhead et al. modified (1960). In all cases appropriate metaphases were obtained for analysis and the mitotic index was satisfactory. The results obtained by using different chromosome banding techniques revealed that the G banding by the enzymatic action of the trypsin although considered the gold standard it is more sensitive, cumbersome and it occurs with a larger number of retries due to a variability of the time for degradation of the proteins, requiring rework, this way becoming inefficient in samples with low mitotic index and consequently increasing the cost of the exam. While the banding technique using citrate buffer in high temperature is simple, productive, agile and less expensive
id UNSP_aac46dcab850ae4d48c2c90dfab6e05a
oai_identifier_str oai:repositorio.unesp.br:11449/126450
network_acronym_str UNSP
network_name_str Repositório Institucional da UNESP
repository_id_str 2946
spelling Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratadoEvaluation of chromosome banding by enzymatic digestion and treatment with buffer citratedCitogeneticaBandeamento cromossômicoCariotiposCromossomos - AberraçõesEnzimas - AnaliseChromosome bandingHuman Cytogenetics is the study of chromosomes, their structure and their inheritance, applied to the practice of medical genetics. For nearly fifty years the chromosomal abnormalities, microscopically visible changes in the number and / or structure of chromosomes, may be responsible for a number of clinical conditions known as chromosomal aberrations, which are a category of constitutional or acquired genetic diseases. Several amendments were described in genetic diseases and neoplastic diseases of hematologic origin, aiding in the diagnosis, prognosis, classification and monitoring of the disease. The aim of this study was to standardize the classical technique in cytogenetics by evaluating the banding G by enzymatic digestion with trypsin and by denaturation with citrate buffer at high temperature, assisting in the karyotype view. In this study we used peripheral blood samples of normal individuals. Cell culture was performed by culturing in situ method, following the method of Moorhead et al. modified (1960). In all cases appropriate metaphases were obtained for analysis and the mitotic index was satisfactory. The results obtained by using different chromosome banding techniques revealed that the G banding by the enzymatic action of the trypsin although considered the gold standard it is more sensitive, cumbersome and it occurs with a larger number of retries due to a variability of the time for degradation of the proteins, requiring rework, this way becoming inefficient in samples with low mitotic index and consequently increasing the cost of the exam. While the banding technique using citrate buffer in high temperature is simple, productive, agile and less expensiveA Citogenética humana é o estudo dos cromossomos, sua estrutura e sua herança, aplicado à prática da genética médica. Há quase 50 anos as anomalias cromossômicas, alterações microscopicamente visíveis no número e/ou na estrutura dos cromossomos, podem ser responsáveis por uma série de condições clínicas denominadas aberrações cromossômicas, que constituem uma categoria de doenças genéticas constitucionais ou adquiridas. Diversas alterações foram descritas em doenças genéticas e doenças neoplásicas de origem hematológica, auxiliando no diagnóstico, prognostico, classificação e monitoramento da doença. O objetivo do presente estudo foi padronizar a técnica clássica em citogenética através da avaliação do bandeamento G pela digestão enzimática com tripsina e pela desnaturação com tampão citratado em alta temperatura, auxiliando na visualização do cariótipo. Neste estudo utilizamos amostras de sangue periférico de indivíduos normais. A cultura celular foi realizada pelo método de cultura in situ, seguindo a metodologia de Moorhead et al. modificada (1960). Em todos os casos foram obtidas metáfases adequadas para análise e o índice mitótico foi satisfatório. Os resultados obtidos pelo emprego de diferentes técnicas de bandeamento cromossômico revelaram que o bandeamento G pela ação enzimática da tripsina embora considerado padrão-ouro é mais sensível, trabalhoso e ocorre com um número maior de tentativas devido a variabilidade do tempo para que ocorra a degradação das proteínas, sendo necessário o retrabalho tornando-se ineficiente em amostras com baixo índice mitótico e aumentando consequentemente o custo do exame. Enquanto o bandeamento pela técnica utilizando tampão citratado em alta temperatura é simples, produtivo, ágil e de menor custoUniversidade Estadual Paulista (Unesp)Santos, Izolete Aparecida Thomazini [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]2015-08-20T17:09:49Z2015-08-20T17:09:49Z2015-02-25info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis60 f.application/pdfROSSETTO, Cristina Ferreira Ramos. Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado. 2015. 60 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Faculdade de Medicina de Botucatu, 2015.http://hdl.handle.net/11449/126450000839743http://www.athena.biblioteca.unesp.br/exlibris/bd/cathedra/27-07-2015/000839743.pdf33004064079P5Alephreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESPporinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-09-04T12:49:11Zoai:repositorio.unesp.br:11449/126450Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestrepositoriounesp@unesp.bropendoar:29462024-09-04T12:49:11Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
dc.title.none.fl_str_mv Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
Evaluation of chromosome banding by enzymatic digestion and treatment with buffer citrated
title Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
spellingShingle Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]
Citogenetica
Bandeamento cromossômico
Cariotipos
Cromossomos - Aberrações
Enzimas - Analise
Chromosome banding
title_short Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
title_full Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
title_fullStr Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
title_full_unstemmed Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
title_sort Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado
author Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]
author_facet Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Santos, Izolete Aparecida Thomazini [UNESP]
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.author.fl_str_mv Rossetto, Cristina Ferreira Ramos [UNESP]
dc.subject.por.fl_str_mv Citogenetica
Bandeamento cromossômico
Cariotipos
Cromossomos - Aberrações
Enzimas - Analise
Chromosome banding
topic Citogenetica
Bandeamento cromossômico
Cariotipos
Cromossomos - Aberrações
Enzimas - Analise
Chromosome banding
description Human Cytogenetics is the study of chromosomes, their structure and their inheritance, applied to the practice of medical genetics. For nearly fifty years the chromosomal abnormalities, microscopically visible changes in the number and / or structure of chromosomes, may be responsible for a number of clinical conditions known as chromosomal aberrations, which are a category of constitutional or acquired genetic diseases. Several amendments were described in genetic diseases and neoplastic diseases of hematologic origin, aiding in the diagnosis, prognosis, classification and monitoring of the disease. The aim of this study was to standardize the classical technique in cytogenetics by evaluating the banding G by enzymatic digestion with trypsin and by denaturation with citrate buffer at high temperature, assisting in the karyotype view. In this study we used peripheral blood samples of normal individuals. Cell culture was performed by culturing in situ method, following the method of Moorhead et al. modified (1960). In all cases appropriate metaphases were obtained for analysis and the mitotic index was satisfactory. The results obtained by using different chromosome banding techniques revealed that the G banding by the enzymatic action of the trypsin although considered the gold standard it is more sensitive, cumbersome and it occurs with a larger number of retries due to a variability of the time for degradation of the proteins, requiring rework, this way becoming inefficient in samples with low mitotic index and consequently increasing the cost of the exam. While the banding technique using citrate buffer in high temperature is simple, productive, agile and less expensive
publishDate 2015
dc.date.none.fl_str_mv 2015-08-20T17:09:49Z
2015-08-20T17:09:49Z
2015-02-25
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv ROSSETTO, Cristina Ferreira Ramos. Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado. 2015. 60 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Faculdade de Medicina de Botucatu, 2015.
http://hdl.handle.net/11449/126450
000839743
http://www.athena.biblioteca.unesp.br/exlibris/bd/cathedra/27-07-2015/000839743.pdf
33004064079P5
identifier_str_mv ROSSETTO, Cristina Ferreira Ramos. Avaliação do bandeamento cromossômico por digestão enzimática e tratamento com solução tampão citratado. 2015. 60 f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Faculdade de Medicina de Botucatu, 2015.
000839743
33004064079P5
url http://hdl.handle.net/11449/126450
http://www.athena.biblioteca.unesp.br/exlibris/bd/cathedra/27-07-2015/000839743.pdf
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv 60 f.
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.source.none.fl_str_mv Aleph
reponame:Repositório Institucional da UNESP
instname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
instname_str Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron_str UNESP
institution UNESP
reponame_str Repositório Institucional da UNESP
collection Repositório Institucional da UNESP
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)
repository.mail.fl_str_mv repositoriounesp@unesp.br
_version_ 1810021357438631936