Terpinen-4-ol: estudo do efeito sinérgico/aditivo, adesão em co-cultura e alteração dos fatores de virulência sobre Candida spp

• Autor(a) principal: Tonon, Caroline Coradi [UNESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/138864
• topic: Candida albicans; Candida tropicalis; Biofilmes; Biofilm

O gênero Candida pode ser encontrado em até 50% dos indivíduos saudáveis não causando danos aparentes, porém, sob condições predisponentes como doenças sistêmicas ou condições fisiológicas, pode tornar-se patogênico causando inflamação e destruição tecidual. Candida spp. na forma de biofilmes são importantes no desenvolvimento de infecções, pois estão associados a altos níveis de resistência a agentes antimicrobianos. Terapias alternativas com extratos naturais abrem novas perspectivas para prevenção e controle das doenças bucais na busca de efeitos terapêuticos favoráveis. O Terpinen-4-ol é um monoterpeno que atua na indução da perda da membrana e apresenta amplo espectro de atividade antimicrobiana e atividade anti-inflamatória. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antifúngico, sinérgico/aditivo, inibição da adesão em células orais e alteração dos fatores de virulência do Terpinen-4-ol sobre Candida albicans e Candida tropicalis. Assim, foi realizada a identificação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM) do Terpinen-4-ol sobre cepas padrão de C. albicans (ATCC 90028) e C. tropicalis (ATCC4563), empregando-se o método de microdiluição em caldo. Biofilmes mono e dual-espécies foram preparados usando o modelo de placa de microtitulação estática e quantificados por unidades formadoras de colônias (UFC/mL). O efeito do Terpinen-4-ol na adesão de C.albicans e C. tropicalis foi realizado em co-cultura com células orais NOK Si como também os fatores de virulência (proteases, fosfolipases e hemolisina) foram avaliados in vitro. A CIM para Terpinen-4-ol foi 2,31 mg/ml para ambas espécies e a CFM 0,002 mg/ml e 0,004 mg/ml respectivamente para Candida albicans e Candida tropicalis. Quando testados em combinação houve efeito aditivo e sinergismo (T-4-ol 1,06 mg/ml e Nis 0,00012 mg/ml) para Candida albicans. Em biofilme, os resultados apresentaram aditismo para ambas as espécies. O Terpinen-4-ol demonstrou uma redução na adesão de Candida tropicalis em células NOK Si, já a Nistatina teve maior efeito tanto para Candida albicans quanto para Candida tropicalis. Quanto à atividade enzimática, Terpinen-4-ol e Nistatina não demonstraram ação na produção de proteinase, fosfolipase e hemolisina quando comparados ao grupo controle (sem tratamento). A combinação de Terpinen-4-ol e Nistatina apresentou efeito antifúngico potencializado sobre as duas espécies de Candida avaliadas, mostrando efeito sinérgico/modulador em culturas planctônicas e biofilmes. Terpinen-4-ol reduz a adesão de C. tropicalis e a Nistatina reduz a adesão de ambas as espécies em células orais imortalizadas (NOK Si). As concentrações sub-inibitorias (CIM50) de Terpinen-4-ol e Nistatina utilizadas não apresentaram atividade na produção de proteinase, fosfolipase e hemolisina.