Seleção de microrganismos de origem marinha para obtenção de consórcio degradador de petróleo

• Autor(a) principal: Santos, Gabriel Person dos
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: https://hdl.handle.net/11449/256293
• topic: Biodegradação de hidrocarbonetos; Biorremediação; Biossurfactantes; Lipases; Biodegradation of hydrocarbons; Bioremediation; Biosurfactants

O petróleo bruto é uma mistura complexa de hidrocarbonetos e devido à sua recalcitrância e frequentes derrames acidentais em ambientes marinhos e costeiros é reconhecido mundialmente como uma ameaça para os ecossistemas e a saúde humana. Uma alternativa eficiente, ecologicamente correta e de baixo custo para mitigar este tipo de contaminação é a biorremediação. A biodegradação de classes específicas de hidrocarbonetos do petróleo varia de acordo com o metabolismo microbiano. Os microrganismos de origem marinha são de particular interesse, devido às adaptações fisiológicas às condições ambientais adversas, bem como pela diversidade metabólica e enzimática que possuem. Enzimas como monooxigenases, dioxigenases e citocromo P450 são responsáveis pela biodegradação das moléculas de hidrocarboneto, enquanto as lipases atuam na hidrólise de triglicerídeos e ligações éster carboxílico, de modo geral, aumentando a biodisponibilidade do poluente aos microrganismos. Em adição, produtos do metabolismo secundário, como os biossurfactantes também possuem papel de destaque devido ao envolvimento no processo de emulsificação entre o petróleo e a água. Assim, o presente estudo teve como objetivos avaliar a capacidade de fungos e bactérias de origem marinha em degradar petróleo bruto, bem como analisar a produção de biossurfactantes e lipases por estes microrganismos. O presente projeto de TCC é parte do projeto “Biorremediação de petróleo em sedimentos e água do mar: estrutura e função de comunidades microbianas (MicroBioMaR). Diferentes meios de cultivo foram testados para determinar o meio mais adequado para a análise da biodegradação do petróleo. A análise qualitativa da degradação do petróleo bruto foi feita no meio de cultura selecionado contendo 2% de petróleo bruto. O petróleo foi extraído com hexano e analisado em GC-MS. A emulsificação foi avaliada em tubos de ensaio contendo 1 mL do sobrenadante da cultura livre de células e 1 mL de óleo diesel. A atividade emulsificante foi mensurada pela altura da mistura em comparação com a altura da emulsão formada na interface. A atividade das lipases foi determinada utilizando como substrato sintético o 4-nitrofenil palmitato (p-NPP) em espectrofotômetro a 405 nm. Os melhores resultados de degradação foram observados nos tratamentos com os microrganismos Sphingobium xenophagum (41.), Paramarasmius palmivorus (CRM 593), Acinetobacter beijerinckii (28.) e Aspergillus sclerotiorum (CRM 348), embora todos os fungos e bactérias tenham sido capazes de degradar alguns compostos alifáticos e HPAs. Ademais, o fungo Aspergillus sclerotiorum (CRM 348) apresentou o melhor índice de emulsificação do óleo diesel (6,1%), seguido da bactéria Alcanivorax sp. (85C) (2,3%). Os isolados Shewanella haliotis (C10) e Alcanivorax sp. (85C) apresentaram a maior atividade de lipase (14,2 U L-1 e 4,4 U L-1, respectivamente). A proposta de estruturação do consórcio degradador de petróleo foi elaborada respaldando-se nos três testes realizados: degradação do petróleo bruto, índice de emulsificação do óleo diesel e atividade das lipases.