Efeito da ativação enzimática de um gel clareador sobre a cinética de degradação do peróxido de hidrogênio, eficácia clareadora, difusão e citotoxicidade trans-amelodentinária

• Autor(a) principal: Ortecho Zuta, Uxua [UNESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/151486
• topic: Clareamento dental; Peróxido de hidrogênio – Toxicidade; Odontoblastos; Tooth bleaching; Hydrogen peroxide – Toxicity; Odontoblasts

No presente estudo, a enzima horseradish peroxidase (HRP) foi empregada como agente catalizador de um gel contendo 35% de peróxido de hidrogênio (H2O2), objetivando a aceleração da sua taxa de decomposição em radicais livres, aumento sobre a eficácia clareadora e minimização da citotoxicidade indireta sobre células pulpares. Três grupos experimentais foram estabelecidos: CN: sem tratamento; PH35%: 35% de H2O2 e PH35%+HRP: 35% de H2O2 com adição de HRP (10 mg/mL). A cinética de degradação do H2O2 e liberação de radicais livres foram avaliados nos períodos de 0, 5, 10 e 15 min, por meio de sondas fluorescentes específicas. A eficácia clareadora foi avaliada em espectrofotômetro UV-vis (E) durante 6 sessões (3x15 min), em discos de esmalte e dentina simulando incisivos inferiores (2,3 mm de espessura). Para análise biológica, o clareamento foi realizado sobre discos adaptados em câmaras pulpares artificiais, sendo o meio de cultura em contato com a dentina (extrato) coletado e aplicado por 1 h sobre células MDPC-23 previamente semeadas (80% confluência). A viabilidade celular (teste de MTT), morfologia (MEV), lesão à membrana citoplasmática (ensaio de live/dead) e estresse oxidativo (carboxy-H2DCFDA) foram avaliados. Discos não submetidos ao clareamento foram empregados como controle negativo. Observou-se que na presença de HRP houve aceleração da degradação do H2O2 com concomitante aumento na formação de radicais livres em comparação ao gel sem adição da enzima. Estes resultados foram correlacionados com o aumento significante nos valores de E em todas as sessões para o gel com HRP em relação ao grupo PH35%, sendo detectada intensa aceleração do efeito clareador. A citotoxicidade trans-amelodentinária foi significativamente minimizada na presença de HRP, para todos os parâmetros testados. Este efeito foi associado a redução significativa na difusão de H2O2 residual e radicais livres pela estrutura dental no grupo contendo HRP em relação ao grupo PH35%. Concluiu-se que a adição da HRP em géis clareadores a base de H2O2 acelera e otimiza o efeito clareador, bem como minimiza a difusão de subprodutos pela estrutura dental, reduzindo o efeito tóxico do produto sobre células odontoblastóides in vitro. Este efeito foi associado a intensa aceleração da decomposição do H2O2 no gel clareador, mediado pela HRP.