Reconstrução de redes regulatórias gênicas em células de Sertoli humanas expostas ao 2,3,7,8-Tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD)

• Autor(a) principal: Ribeiro, Mariana Antunes [UNESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/151523
• topic: Células de Sertoli; TCDD; miRNAs; RNAseq; Infertilidade; Sertoli cells; Infertility

A fertilidade masculina e a espermatogênese estão diretamente ligadas à capacidade das células de Sertoli em produzir fatores associados ao desenvolvimento das células germinativas. As células de Sertoli expressam receptores para FSH e testosterona e são os principais reguladores da espermatogênese. Aproximadamente 60-70% dos casos de infertilidade masculina são considerados idiopáticos, devido aos mecanismos moleculares envolvidos na espermatogênese ainda serem desconhecidos. Estudos recentes relatam que os microRNAs (miRNAs), são capazes de modular a função testicular durante a espermatogênese e sua expressão alterada pode estar envolvida na infertilidade masculina. miRNAs podem desempenhar papel importante na resposta aos xenobióticos que têm todas as consequências adversas para a saúde. Um grupo importante de compostos orgânicos com potencial tóxico são as dioxinas, como o 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD). Modelos experimentais de exposição ao TCDD, em camundongos, demonstraram que sua exposição provoca baixa contagem de espermatozóides e atraso na puberdade. Neste estudo, analisamos o efeito do TCDD nas células de Sertoli humanas in vitro após 72h a uma dose de 10nM. Nossos resultados mostraram que as enzimas antioxidantes catalase, superóxido dismutase e glutationa peroxidase diminuíram sua atividade e confirmaram o estresse oxidativo causado pelo TCDD nesse tipo celular. 78 miRNAs apresentaram expressão alterada, com regulação positiva de 73 e regulação negativa de 5 miRNAs quando comparados ao grupo controle. Com relação ao perfil de expressão gênica, 51 genes se apresentaram desregulados, dos quais 46 com regulação positiva e 5 genes com regulação negativa. Três tRNAsr egularam sua expressão negativamente devido a exposição ao TCDD. Além disso, 30 piRNAs se mostraram desregulados, 17 com regulação positiva e 13 com regulação negativa ao comparar os grupos. 7 diferentes famílias matriz de sítios de ligação de fatores de trancrição apresentaram expressão diferencial estatisticamente significante nas células de Sertoli após exposição ao TCDD. Várias vias se mostraram alteradas por ação do agente tóxico. Além disso, nosso estudo mostrou um baixo número de genes similares entre os mais expressos entre humanos, ratos e camundongoso que reflete a fisiologia de cada espécie e alerta sobre o cuidado ao utilizar modelos animais como substitutos para a exposição humana.