1 - Efeito do treinamento preventivo no transcriptoma cardíaco de ratos com hipertensão pulmonar 2 - Tradução para o português da ferramenta syrcle de risco de viés

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Mariano, Thaoan Bruno
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNOESTE
Texto Completo: http://bdtd.unoeste.br:8080/jspui/handle/jspui/1467
Resumo: Introdução 1: A indução da hipertensão pulmonar (HP) por monocrotalina é comum, o que leva a pós-carga ventricular direita elevada, remodelação vascular, hipertrofia e disfunção ventricular direita e, por fim, insuficiência cardíaca. O exercício físico tem sido reconhecido como um tratamento para esta condição. Embora diferentes mecanismos tenham sido propostos para explicar o desenvolvimento da HP, e a influência do treinamento físico preventivo, a análise do perfil transcriptômico cardíaco nesta condição não tem sido explorado. Objetivo: nesta tese desenvolvemos 2 artigos científicos, um experimental (ARTIGO 1) e uma tradução de questionário de risco de viés (ARTIGO 2). Objetivo 1: analisar o efeito do treinamento preventivo no perfil de expressão gênica global do ventrículo direito na HP de ratos. Foram utilizados vinte e quatro ratos Wistar machos (206-220 g) divididos em três grupos (n=8/grupo): S, controle sedentário; SPH, hipertensão pulmonar sedentária; e TPH, grupo treinado para hipertensão pulmonar. O protocolo de treinamento preventivo foi realizado em esteira rolante por 13 semanas. A hipertrofia cardíaca por HP foi induzida experimentalmente por uma única injeção intraperitoneal (60 mg/kg) de monocrotalina após o treinamento preventivo. Os ratos foram avaliados 28 dias após a administração de monocrotalina. Peso do ventrículo esquerdo, peso do ventrículo direito e peso do átrio normalizado pelo peso corporal foram usados como índices de hipertrofia cardíaca. O perfil de expressão gênica foi realizado usando a plataforma Rat Gene ST Array. Para entender melhor a relevância biológica dos genes expressos diferencialmente, realizamos uma análise de enriquecimento funcional no contexto da ontologia gênica (processo biológico, função molecular e componente celular) e redes (KEGG, Reactome, Wikipathways e BioPlanet). Resultados 1: Através da análise da área de cardiomiócitos, o grupo HP apresentou hipertrofia cardíaca, e o treinamento amenizou essa alteração p< 0,05. O perfil de expressão gênica global identificou 687 genes diferencialmente expressos (S vs. SPH), na hipertrofia ventricular direita durante a HP, e quando comparado ao treinamento preventivo, 91 genes estavam desregulados (SPH vs. TPH). A análise da ontologia gênica nos dados de perfil de expressão revelou alteração nos genes que regulam o processo inflamatório, crescimento muscular, processos metabólicos, morte celular e comparação da regulação iônica entre SPH vs. TPH Os genes que foram alterados na fase de hipertrofia do PH e modificados pela exercício foram lúmen de grânulo alfa de plaquetas (genes Fgg e Qsox1), ligação NAD + (gene Cryl1), regulação positiva da sinalização mediada por cAMP (gene Cxcl11), regulação positiva da diferenciação de macrófagos (gene Il34), clivagem de mRNA (gene Cstf3), regulação negativa da atividade do transportador (gene Wwp2), regulação do processo do sistema respiratório (gene Mtg2) p< 0,05. Conclusão 1: O treinamento preventivo influencia mudanças no perfil de expressão gênica cardíaca na fase de hipertrofia da HP. Novos genes foram identificados, e estes podem ser biomarcadores e potenciais alvos terapêuticos na fase inicial da HP. Introdução 2: A pesquisa experimental tem aumentado e a realização de meta-análise se tornou frequente no Brasil e no mundo. Para a realização desses estudos a qualidade metodológica é avaliada por importantes instrumentos como a ferramenta RoB-SYRCLE. Objetivo 2: traduzir o RoB-SYRCLE para sua utilização em estudos experimentais. Métodos 2: A tradução da ferramenta foi realizada seguindo um guia internacional. Após a tradução, retrotradução e aprovação da versão pelos idealizadores, a ferramenta que é composta por 10 itens, em português, foi avaliada por 15 pesquisadores com experiência em estudos animais. Os itens 1 e 2 se referem ao viés de seleção (geração de sequência, características basais e ocultação da alocação), os Itens 3 e 4 ao viés de performance; item 5 ao viés de execução (alojamento aleatório e cegamento), Item 6 e 7 ao viés de detecção (avaliação aleatória dos desfechos e cegamento), Item 8 ao viés de atrito (desfechos incompletos), item 9 ao viés de relato (relato de desfecho seletivo) e item 10 a outras fontes de viés. Os avaliadores deveriam responder em relação ao grau de compreensão (Compreendi totalmente, compreendi parcialmente, não compreendi). Análise estatística: estatística descritiva com valores percentuais. Resultados 2: Dos pesquisadores que avaliaram a ferramenta, 100 a 86,6% compreenderam totalmente os itens de 1 a 7, 9 e 10. Em relação ao item 8, esse foi compreendido totalmente por 80% dos pesquisadores. Conclusão 2: A ferramenta RoB, essa foi traduzida e utilizada com sucesso por todos os pesquisadores, mas ainda, são necessários ajustes e análise de especialistas na questão 8 devido a porcentagem de não compreensão ser de 20%.
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spelling 1 - Efeito do treinamento preventivo no transcriptoma cardíaco de ratos com hipertensão pulmonar 2 - Tradução para o português da ferramenta syrcle de risco de viés1 - Effect of preventive training on heart transcriptoma of rats with pulmonary hypertension 2 - Portuguese translation of the bias risk syrcle tooldisfunção cardíaca; hipertrofia cardíaca; hipertensão arterial pulmonary.cardiac dysfunction; cardiac hypertrophy; pulmonary arterial hypertension.CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIAIntrodução 1: A indução da hipertensão pulmonar (HP) por monocrotalina é comum, o que leva a pós-carga ventricular direita elevada, remodelação vascular, hipertrofia e disfunção ventricular direita e, por fim, insuficiência cardíaca. O exercício físico tem sido reconhecido como um tratamento para esta condição. Embora diferentes mecanismos tenham sido propostos para explicar o desenvolvimento da HP, e a influência do treinamento físico preventivo, a análise do perfil transcriptômico cardíaco nesta condição não tem sido explorado. Objetivo: nesta tese desenvolvemos 2 artigos científicos, um experimental (ARTIGO 1) e uma tradução de questionário de risco de viés (ARTIGO 2). Objetivo 1: analisar o efeito do treinamento preventivo no perfil de expressão gênica global do ventrículo direito na HP de ratos. Foram utilizados vinte e quatro ratos Wistar machos (206-220 g) divididos em três grupos (n=8/grupo): S, controle sedentário; SPH, hipertensão pulmonar sedentária; e TPH, grupo treinado para hipertensão pulmonar. O protocolo de treinamento preventivo foi realizado em esteira rolante por 13 semanas. A hipertrofia cardíaca por HP foi induzida experimentalmente por uma única injeção intraperitoneal (60 mg/kg) de monocrotalina após o treinamento preventivo. Os ratos foram avaliados 28 dias após a administração de monocrotalina. Peso do ventrículo esquerdo, peso do ventrículo direito e peso do átrio normalizado pelo peso corporal foram usados como índices de hipertrofia cardíaca. O perfil de expressão gênica foi realizado usando a plataforma Rat Gene ST Array. Para entender melhor a relevância biológica dos genes expressos diferencialmente, realizamos uma análise de enriquecimento funcional no contexto da ontologia gênica (processo biológico, função molecular e componente celular) e redes (KEGG, Reactome, Wikipathways e BioPlanet). Resultados 1: Através da análise da área de cardiomiócitos, o grupo HP apresentou hipertrofia cardíaca, e o treinamento amenizou essa alteração p< 0,05. O perfil de expressão gênica global identificou 687 genes diferencialmente expressos (S vs. SPH), na hipertrofia ventricular direita durante a HP, e quando comparado ao treinamento preventivo, 91 genes estavam desregulados (SPH vs. TPH). A análise da ontologia gênica nos dados de perfil de expressão revelou alteração nos genes que regulam o processo inflamatório, crescimento muscular, processos metabólicos, morte celular e comparação da regulação iônica entre SPH vs. TPH Os genes que foram alterados na fase de hipertrofia do PH e modificados pela exercício foram lúmen de grânulo alfa de plaquetas (genes Fgg e Qsox1), ligação NAD + (gene Cryl1), regulação positiva da sinalização mediada por cAMP (gene Cxcl11), regulação positiva da diferenciação de macrófagos (gene Il34), clivagem de mRNA (gene Cstf3), regulação negativa da atividade do transportador (gene Wwp2), regulação do processo do sistema respiratório (gene Mtg2) p< 0,05. Conclusão 1: O treinamento preventivo influencia mudanças no perfil de expressão gênica cardíaca na fase de hipertrofia da HP. Novos genes foram identificados, e estes podem ser biomarcadores e potenciais alvos terapêuticos na fase inicial da HP. Introdução 2: A pesquisa experimental tem aumentado e a realização de meta-análise se tornou frequente no Brasil e no mundo. Para a realização desses estudos a qualidade metodológica é avaliada por importantes instrumentos como a ferramenta RoB-SYRCLE. Objetivo 2: traduzir o RoB-SYRCLE para sua utilização em estudos experimentais. Métodos 2: A tradução da ferramenta foi realizada seguindo um guia internacional. Após a tradução, retrotradução e aprovação da versão pelos idealizadores, a ferramenta que é composta por 10 itens, em português, foi avaliada por 15 pesquisadores com experiência em estudos animais. Os itens 1 e 2 se referem ao viés de seleção (geração de sequência, características basais e ocultação da alocação), os Itens 3 e 4 ao viés de performance; item 5 ao viés de execução (alojamento aleatório e cegamento), Item 6 e 7 ao viés de detecção (avaliação aleatória dos desfechos e cegamento), Item 8 ao viés de atrito (desfechos incompletos), item 9 ao viés de relato (relato de desfecho seletivo) e item 10 a outras fontes de viés. Os avaliadores deveriam responder em relação ao grau de compreensão (Compreendi totalmente, compreendi parcialmente, não compreendi). Análise estatística: estatística descritiva com valores percentuais. Resultados 2: Dos pesquisadores que avaliaram a ferramenta, 100 a 86,6% compreenderam totalmente os itens de 1 a 7, 9 e 10. Em relação ao item 8, esse foi compreendido totalmente por 80% dos pesquisadores. Conclusão 2: A ferramenta RoB, essa foi traduzida e utilizada com sucesso por todos os pesquisadores, mas ainda, são necessários ajustes e análise de especialistas na questão 8 devido a porcentagem de não compreensão ser de 20%.Introduction 1: Induction of pulmonary hypertension (PH) by monocrotaline is common, which leads to increased right ventricular afterload, vascular remodeling, right ventricular hypertrophy and dysfunction, and ultimately heart failure. Physical exercise has long been recognized as a treatment for this condition. Although different mechanisms have been proposed to explain the development of PH, and the influence of preventive physical training, the analysis of the cardiac transcriptomic profile in this condition has not been explored. Objective: in this thesis we developed 2 scientific articles, one experimental (ARTICLE 1) and a translation of a risk of bias questionnaire (ARTICLE 2). Objective 1: to analyze the effect of preventive training on the global gene expression profile of the right ventricle in PH in rats. Twenty-four male Wistar rats (206-220 g) were divided into three groups (n=8/group): S, sedentary control; HPS, sedentary pulmonary hypertension; and TPH, group trained for pulmonary hypertension. The preventive training protocol was performed on a treadmill for 13 weeks. Cardiac hypertrophy by HP was experimentally induced by a single intraperitoneal injection (60 mg/kg) of monocrotaline after preventive training. Rats were evaluated 28 days after administration of monocrotaline. Left ventricular weight, right ventricular weight, and atrial weight normalized by body weight were used as indices of cardiac hypertrophy. Gene expression profiling was performed using the Rat Gene ST Array platform. To better understand the biological relevance of differentially expressed genes, we performed a functional enrichment analysis in the context of gene ontology (biological process, molecular function and cellular component) and networks (KEGG, Reactome, Wikipathways and BioPlanet). Results 1: Through the analysis of the cardiomyocytes area, the HP group presented cardiac hypertrophy, and the training softened this alteration p< 0.05. The global gene expression profile identified 687 differentially expressed genes (S vs. SPH) in right ventricular hypertrophy during PH, and when compared to preventive training, 91 genes were dysregulated (SPH vs. TPH). Analysis of the gene ontology in the expression profile data revealed changes in the genes that regulate the inflammatory process, muscle growth, metabolic processes, cell death and comparison of ionic regulation between HPS vs. TPH The genes that were altered in the PH hypertrophy phase and modified by exercise were platelet alpha granule lumen (Fgg and Qsox1 genes), NAD + binding (Cryl1 gene), cAMP-mediated signaling upregulation (Cxcl11 gene), upregulation of macrophage differentiation (IL34 gene), mRNA cleavage (Cstf3 gene), downregulation of transporter activity (Wwp2 gene), regulation of respiratory system process (Mtg2 gene) p< 0.05. Conclusion 1: Preventive training influences changes in cardiac gene expression profile in the hypertrophy phase of PH. New genes were identified, and these may be biomarkers and potential therapeutic targets in the initial phase of PH. Introduction 2: Experimental research has increased and meta-analysis has become frequent in Brazil and worldwide. In order to carry out these studies, the methodological quality is evaluated by important instruments such as the RoB-SYRCLE tool. Objective 2: translate RoB-SYRCLE for use in experimental studies. Methods 2: The translation of the tool was carried out following an international guide. After translation, back-translation and approval of the version by the creators, the tool, which is composed of 10 items, in Portuguese, was evaluated by 15 researchers with experience in animal studies. Items 1 and 2 refer to selection bias (sequence generation, baseline characteristics and allocation concealment), Items 3 and 4 to performance bias; item 5 for execution bias (random placement and blinding), Item 6 and 7 for detection bias (random assessment of outcomes and blinding), Item 8 for attrition bias (incomplete outcomes), item 9 for reporting bias (report of selective outcome) and item 10 to other sources of bias. The evaluators should respond in relation to the degree of understanding (I fully understood, I partially understood, I did not understand). Statistical analysis: descriptive statistics with percentage values. Results 2: Of the researchers who evaluated the tool, 100 to 86.6% fully understood items 1 to 7, 9 and 10. Regarding item 8, this was fully understood by 80% of the researchers. The RoB tool was successfully translated and used by all researchers, but still, adjustments and expert analysis are needed in question 8 due to the percentage of non-understanding being 20%.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo - FAPESPUniversidade do Oeste PaulistaDoutorado em Fisiopatologia e Saúde AnimalBrasilUNOESTEDoutorado em Fisiopatologia e Saúde AnimalPacagnelli, Francis Lopeshttp://lattes.cnpq.br/2275399100240086Gomes, Mariana Janinihttp://lattes.cnpq.br/0796170343990389Castoldi, Robson Chaconhttp://lattes.cnpq.br/3219816625135266Giometti, Ines Cristinahttp://lattes.cnpq.br/5461216137094368Mareco, Edson Assunçãohttp://lattes.cnpq.br/0300631138130078Mariano, Thaoan Bruno2023-03-03T14:47:13Z2022-06-20info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfMariano, Thaoan Bruno. 1 - Efeito do treinamento preventivo no transcriptoma cardíaco de ratos com hipertensão pulmonar 2 - Tradução para o português da ferramenta syrcle de risco de viés. 2022. 106f. 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