Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marcondes, Natália Aydos
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/179814
Resumo: Base teórica: doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B (DLPC-B) são neoplasias clonais que afetam linfócitos B maduros. A tirosina quinase de Bruton (do inglês Bruton’s tyrosine kinase, BTK) é uma proteína essencial para o desenvolvimento, diferenciação e sinalização nos linfócitos B. Ki-67 é uma proteína nuclear associada à proliferação celular. A avaliação de proteínas envolvidas nas vias de sinalização oncogênicas pode levar ao aprimoramento do diagnóstico, tratamento e definição de prognóstico das DLPC-B. Objetivo: avaliar a expressão de BTK e Ki-67 em linfócitos de portadores de DLPC-B. Métodos: para avaliação de BTK foi realizado um estudo transversal; foi avaliada a expressão de BTK em amostras de pacientes saudáveis e de pacientes com diagnóstico de DLPC-B. Para avaliação de Ki-67 foi realizado um estudo transversal. As amostras foram marcadas com CD45 FITC e CD19 APC para identificação dos linfócitos B. Após a lise das hemácias, foi realizada marcação citoplasmática de BTK PE e/ou Ki-67 PerCP-Cy5.5. O percentual de expressão e a intensidade de fluorescência média (IFM) dos marcadores avaliados foram determinados nos linfócitos B. A análise estatística foi realizada com testes de correlação de Pearson e Spearman entre BTK ou Ki-67 e as demais variáveis clínicas e laboratoriais, e ANOVA seguido por teste post hoc de Bonferroni para comparações entre grupos. Foi considerado resultado significante quando P < 0,05. Resultados: não foram observadas diferenças na expressão de BTK e não houve associação entre a expressão de BTK e as variáveis clínicas avaliadas. A expressão de Ki-67 foi maior nos grupos linfoma do manto, linfoma de Burkitt e linfoma difuso de grandes células B em relação aos demais; após análise multivariada, a IFM de Ki-67 foi associada à IFM de CD38. Conclusão: no presente trabalho, a expressão de BTK em DLPC-B foi similar a de linfócitos B normais e a expressão de Ki-67 foi maior nas DLPC-B com curso clínico mais agressivo.
id URGS_3c32092b82d8587d6ee737eb888dfc44
oai_identifier_str oai:www.lume.ufrgs.br:10183/179814
network_acronym_str URGS
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
repository_id_str 1853
spelling Marcondes, Natália AydosFaulhaber, Gustavo Adolpho Moreira2018-06-27T02:35:09Z2017http://hdl.handle.net/10183/179814001054786Base teórica: doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B (DLPC-B) são neoplasias clonais que afetam linfócitos B maduros. A tirosina quinase de Bruton (do inglês Bruton’s tyrosine kinase, BTK) é uma proteína essencial para o desenvolvimento, diferenciação e sinalização nos linfócitos B. Ki-67 é uma proteína nuclear associada à proliferação celular. A avaliação de proteínas envolvidas nas vias de sinalização oncogênicas pode levar ao aprimoramento do diagnóstico, tratamento e definição de prognóstico das DLPC-B. Objetivo: avaliar a expressão de BTK e Ki-67 em linfócitos de portadores de DLPC-B. Métodos: para avaliação de BTK foi realizado um estudo transversal; foi avaliada a expressão de BTK em amostras de pacientes saudáveis e de pacientes com diagnóstico de DLPC-B. Para avaliação de Ki-67 foi realizado um estudo transversal. As amostras foram marcadas com CD45 FITC e CD19 APC para identificação dos linfócitos B. Após a lise das hemácias, foi realizada marcação citoplasmática de BTK PE e/ou Ki-67 PerCP-Cy5.5. O percentual de expressão e a intensidade de fluorescência média (IFM) dos marcadores avaliados foram determinados nos linfócitos B. A análise estatística foi realizada com testes de correlação de Pearson e Spearman entre BTK ou Ki-67 e as demais variáveis clínicas e laboratoriais, e ANOVA seguido por teste post hoc de Bonferroni para comparações entre grupos. Foi considerado resultado significante quando P < 0,05. Resultados: não foram observadas diferenças na expressão de BTK e não houve associação entre a expressão de BTK e as variáveis clínicas avaliadas. A expressão de Ki-67 foi maior nos grupos linfoma do manto, linfoma de Burkitt e linfoma difuso de grandes células B em relação aos demais; após análise multivariada, a IFM de Ki-67 foi associada à IFM de CD38. Conclusão: no presente trabalho, a expressão de BTK em DLPC-B foi similar a de linfócitos B normais e a expressão de Ki-67 foi maior nas DLPC-B com curso clínico mais agressivo.Background: mature B-cell neoplasms (MBCN) are clonal neoplasms that affect mature Bcell lymphocytes. Bruton’s tyrosine kinase (BTK) is an essential protein for the development, differentiation and signaling in B-cell lymphocytes. Ki-67 is a nuclear protein associated to cellular proliferation. Evaluation of proteins involved in oncogenic signaling pathways can lead to improvement in the diagnosis, treatment and prognosis definition in MBCN. Objective: to evaluate the expression of BTK and Ki-67 in lymphocytes of MBCN patients using flow cytometry. Methods: a cross-sectional study was conducted for BTK assessment; BTK expression was assessed on healthy patients samples and MBCN samples. For evaluation of Ki-67 a crosssectional study was conducted. Samples were stained with CD45 FITC and CD19 APC for identification of B-cell lymphocytes. After lysis of red blood cells, cytoplasmic staining of BTK PE and/or Ki-67 PerCP-Cy5.5 was performed. Percentage of expression and mean fluorescence intensity (MFI) of the markers were determined in B-cell lymphocytes. Statistical analysis was performed with Pearson and Spearman correlation tests between BTK and Ki-67 and the other clinical and laboratory variables, and ANOVA followed by post-hoc Bonferroni test for comparisons between groups. Results were considered significant when P < 0.05. Results: no differences in BTK expression were identified and there was no association between BTK expression and clinical variables evaluated. Ki-67 expression was higher in mantle cell lymphoma, Burkitt lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma cases; after multivariate analysis, MFI of Ki-67 was associated with MFI of CD38. Conclusions: in this study, BTK expression in B-cell neoplasms was similar to that of normal B-cell lymphocytes and Ki-67 expression was higher in MBCN with more aggressive clinical courses.application/pdfporNeoplasiasProteínas tirosina quinasesCitometria de fluxoLinfócitos BImunofenotipagemBTKBruton’s tyrosine kinaseKi-67Flow cytometryMature B-cell neoplasmB-cell chronic lymphoproliferative diseaseAvaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxoinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisUniversidade Federal do Rio Grande do SulFaculdade de MedicinaPrograma de Pós-Graduação em Medicina: Ciências MédicasPorto Alegre, BR-RS2017doutoradoinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGSinstname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)instacron:UFRGSTEXT001054786.pdf.txt001054786.pdf.txtExtracted Texttext/plain171717http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/179814/2/001054786.pdf.txt401a1e92bc65d4b97d196fbd565396d3MD52ORIGINAL001054786.pdf001054786.pdfTexto completoapplication/pdf4403104http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/179814/1/001054786.pdf956915ed8495e6601c241d77bc717a6cMD5110183/1798142020-07-29 03:41:28.554509oai:www.lume.ufrgs.br:10183/179814Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://lume.ufrgs.br/handle/10183/2PUBhttps://lume.ufrgs.br/oai/requestlume@ufrgs.br||lume@ufrgs.bropendoar:18532020-07-29T06:41:28Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)false
dc.title.pt_BR.fl_str_mv Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
title Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
spellingShingle Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
Marcondes, Natália Aydos
Neoplasias
Proteínas tirosina quinases
Citometria de fluxo
Linfócitos B
Imunofenotipagem
BTK
Bruton’s tyrosine kinase
Ki-67
Flow cytometry
Mature B-cell neoplasm
B-cell chronic lymphoproliferative disease
title_short Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
title_full Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
title_fullStr Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
title_full_unstemmed Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
title_sort Avaliação da expressão de BTK e Ki-67 em doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B por citometria de fluxo
author Marcondes, Natália Aydos
author_facet Marcondes, Natália Aydos
author_role author
dc.contributor.author.fl_str_mv Marcondes, Natália Aydos
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv Faulhaber, Gustavo Adolpho Moreira
contributor_str_mv Faulhaber, Gustavo Adolpho Moreira
dc.subject.por.fl_str_mv Neoplasias
Proteínas tirosina quinases
Citometria de fluxo
Linfócitos B
Imunofenotipagem
topic Neoplasias
Proteínas tirosina quinases
Citometria de fluxo
Linfócitos B
Imunofenotipagem
BTK
Bruton’s tyrosine kinase
Ki-67
Flow cytometry
Mature B-cell neoplasm
B-cell chronic lymphoproliferative disease
dc.subject.eng.fl_str_mv BTK
Bruton’s tyrosine kinase
Ki-67
Flow cytometry
Mature B-cell neoplasm
B-cell chronic lymphoproliferative disease
description Base teórica: doenças linfoproliferativas crônicas de linhagem B (DLPC-B) são neoplasias clonais que afetam linfócitos B maduros. A tirosina quinase de Bruton (do inglês Bruton’s tyrosine kinase, BTK) é uma proteína essencial para o desenvolvimento, diferenciação e sinalização nos linfócitos B. Ki-67 é uma proteína nuclear associada à proliferação celular. A avaliação de proteínas envolvidas nas vias de sinalização oncogênicas pode levar ao aprimoramento do diagnóstico, tratamento e definição de prognóstico das DLPC-B. Objetivo: avaliar a expressão de BTK e Ki-67 em linfócitos de portadores de DLPC-B. Métodos: para avaliação de BTK foi realizado um estudo transversal; foi avaliada a expressão de BTK em amostras de pacientes saudáveis e de pacientes com diagnóstico de DLPC-B. Para avaliação de Ki-67 foi realizado um estudo transversal. As amostras foram marcadas com CD45 FITC e CD19 APC para identificação dos linfócitos B. Após a lise das hemácias, foi realizada marcação citoplasmática de BTK PE e/ou Ki-67 PerCP-Cy5.5. O percentual de expressão e a intensidade de fluorescência média (IFM) dos marcadores avaliados foram determinados nos linfócitos B. A análise estatística foi realizada com testes de correlação de Pearson e Spearman entre BTK ou Ki-67 e as demais variáveis clínicas e laboratoriais, e ANOVA seguido por teste post hoc de Bonferroni para comparações entre grupos. Foi considerado resultado significante quando P < 0,05. Resultados: não foram observadas diferenças na expressão de BTK e não houve associação entre a expressão de BTK e as variáveis clínicas avaliadas. A expressão de Ki-67 foi maior nos grupos linfoma do manto, linfoma de Burkitt e linfoma difuso de grandes células B em relação aos demais; após análise multivariada, a IFM de Ki-67 foi associada à IFM de CD38. Conclusão: no presente trabalho, a expressão de BTK em DLPC-B foi similar a de linfócitos B normais e a expressão de Ki-67 foi maior nas DLPC-B com curso clínico mais agressivo.
publishDate 2017
dc.date.issued.fl_str_mv 2017
dc.date.accessioned.fl_str_mv 2018-06-27T02:35:09Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10183/179814
dc.identifier.nrb.pt_BR.fl_str_mv 001054786
url http://hdl.handle.net/10183/179814
identifier_str_mv 001054786
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
instname:Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
instacron:UFRGS
instname_str Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
instacron_str UFRGS
institution UFRGS
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
bitstream.url.fl_str_mv http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/179814/2/001054786.pdf.txt
http://www.lume.ufrgs.br/bitstream/10183/179814/1/001054786.pdf
bitstream.checksum.fl_str_mv 401a1e92bc65d4b97d196fbd565396d3
956915ed8495e6601c241d77bc717a6c
bitstream.checksumAlgorithm.fl_str_mv MD5
MD5
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS - Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS)
repository.mail.fl_str_mv lume@ufrgs.br||lume@ufrgs.br
_version_ 1810085446189842432