Construção de uma linhagem de Klebsiella pneumoniae geneticamente modificada para o aumento da produção de etanol pelo cultivo em glicerol residual

• Autor(a) principal: Silva, Vanessa Zimmer da
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/213193
• topic: Etanol; Glicerol; Resíduos industriais; Klebsiella pneumoniae; Enzimas; Álcool desidrogenase; Expressão gênica; Genetica microbiana

A utilização de resíduos industriais para obtenção de produtos de alto valor agregado por processos biotecnológicos é muito importante para evitar seus acúmulos e problemas ambientais. Alguns microrganismos já são utilizados para a conversão de glicerol residual em etanol, e a Klebsiella pneumoniae Blh1 é um desses. Este trabalho teve como objetivo alterar geneticamente esta linhagem, criando a nova linhagem Klebsiella pneumoniae Kp17, para aumentar a expressão do gene AdhE, que codifica as enzimas responsáveis pela conversão de glicerol a etanol. Com isso também pretendeu-se avaliar comparativamente a fisiologia da Blh-1 e desta nova linhagem criada. Foi inserido um vetor auto-replicativo, com o gene AdhE, na linhagem selvagem por competência de células por CaCl2. As linhagens, transformada e selvagem, foram crescidas em biorreatores em meios previamente estabelecidos (contendo 30 e 65 g.L-1 de glicerol residual). Utilizando 30 g.L-1 de glicerol foi possível produzir até 4,49 g.L-1 de etanol e aumentar o rendimento da produção de 8,5 para 14,9 % de etanol a partir do glicerol consumido. Também foi reduzida a produção de 1,3 PD, um dos maiores produtos e competidor por cofatores na produção de etanol. Resultados provaram a eficiente transformação de Klebsiella pneumoniae Kp17 e que a otimização dos meios é muito importante para a fisiologia dos microrganismos.