Cistogênese : desenvolvimento de modelo de estudo in vitro

• Autor(a) principal: Nascimento, Diego
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/257019
• topic: Esferoides celulares; Colágeno; Cistos odontogênicos; Spheroids, Cellular; Collagen; Odontogenic cysts

Os cistos inflamatórios são comuns na clínica odontológica. Sua patogenia está associada a infecção dos canais radiculares gerando resposta inflamatória frente ao desafio de inibir a proliferação microbiológica. O tratamento preconizado é a desinfecção do sistema de canais radiculares através da terapia endodôntica. Contudo, a lesão pode persistir mesmo após estabelecido o tratamento. Os mecanismos envolvidos na origem e manutenção do cisto inflamatório não estão completamente esclarecidos. Em busca de novas evidências, o objetivo do presente estudo é aprimorar um modelo in vitro de cistogênese, desenvolvido previamente pelo nosso grupo de pesquisa.. Um total de 1x105 células HaCaT foram utilizadas para formar esferoides em placas tratadas com agarose de baixa fusão. Após 24 horas, os esferoides foram coletados, embebidos em colágeno não polimerizado (grupo HaCat), ou associados a 1x105 fibroblastos (grupo HaCat + hFIB), ou ainda associados a 1x105 fibroblastos e 1x105 leucócitos coletados do sangue humano periférico (grupo HaCat + hFIB + LEUK) e transferidos individualmente para placas de 24 poços. Os grupos experimentais de esferoides foram mantidos assim por um período de até 7 dias. Diferentes concentrações de fibroblastos (4x104, 1x105, 2x105) foram utilizadas para identificar qualitativamente a melhor concentração a ser adotada. Foram capturadas imagens dos 3 grupos nos dias 1, 3, 5 e 7. O software ImageJ foi utilizado para análise da integridade e área de cada esferoide. Para comparação dos dados, o software GraphPad Prism 5 (GraphPad Software, Inc., CA, USA) foi utilizado e o teste One Way Anova aplicado (p<0.05). Os grupos HaCat + hFIB e HaCat + hFIB + LEUK, além de não apresentarem dispersão significativa das células, mostraram manutenção estrutural dos esferoides em todos os dias observados, enquanto o grupo HaCat mostrou dispersão após 7 dias (p<0.05). Portanto, o modelo de cistogênese proposto no presente estudo a partir do grupo HaCat + hFIB + LEUK aproxima as características observadas in vitro e in vivo. Novas pesquisas abordando a origem dos cistos inflamatórios utilizando nosso modelo podem ser realizadas visando ampliar o conhecimento do tema