Proteômica e metabolômica do plasma seminal equino

• Autor(a) principal: Bueno, Verônica La Cruz
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRGS
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10183/263299
• topic: Proteínas; Metabolitos; Sêmen; Equinos; Biomarcadores; Infertilidade masculina; Proteins and metabolites; Infertility; Individual

Diferente de outras espécies domésticas de interesse zootécnico, os equinos são valorizados como indivíduo, animais de alto padrão genético atingem valores elevados de comércio e reprodução. Os reprodutores equinos, assim como os humanos, geralmente recebem tratamento médico para a infertilidade. Os métodos de avaliação convencional de sêmen na maioria das vezes fornecem apenas informações descritivas e têm limitações para prever fertilidade. No entanto, várias abordagens moleculares, como a proteômica e metabolômica, proporcionaram uma compreensão mais aprofundada dos mecanismos causadores da infertilidade masculina. O objetivo deste projeto foi avaliar a proteômica e metabolômica do plasma seminal equino. Foram utilizados 24 garanhões. A concentração espermática foi avaliada em câmara de Neubauer. As demais análises microscópicas foram realizadas através do Computer Assisted Sperm Analysis AndroVision. A análise da integridade física da membrana foi realizada utilizando-se sondas fluorescentes. A integridade funcional da membrana plasmática foi avaliada por meio do teste hiposmótico. Um ejaculado de cada garanhão foi coletado durante a estação reprodutiva e a fertilidade dos garanhões selecionados foi avaliada através do histórico reprodutivo. As taxas de prenhez variaram de 20,2% a 95,6% e os animais foram divididos em dois grupos: Grupo Alta taxa de prenhez (HP), com taxa de prenhez por ciclo acima de 51%, e Grupo Baixa prenhez (LP), com taxa de prenhez por ciclo igual ou abaixo de 50%. Após a análise espermática, o plasma seminal foi separado e preparado para a identificação de proteínas e metabólitos do plasma seminal. As proteínas foram identificadas através da técnica de eletroforese bidimensional; já para identificação dos metabólitos a técnica utilizada foi a cromatografia líquida. Foi realizada a média e desvio padrão de todas as variáveis analisadas e correlação entre as taxas de prenhez e parâmetros seminais, integridade da membrana plasmática, funcionalidade da membrana plasmática, defeitos maiores, defeitos menores, proteínas e metabólitos do plasma seminal. O Teste de Shapiro-Wilk foi realizado para avaliar distribuição dos dados. Para dados paramétricos, o teste utilizado foi a Anova e para dados não paramétricos o teste utilizado foi o kruskal Wallis. Para análise estatística, foi utilizada a correlação de Pearson. De um total de 713 spots detectados, 24 spots foram selecionados e 26 proteínas foram identificadas. Em relação aos metabólitos, 18 foram identificados. A identificação de marcadores positivos e negativos referentes à fertilidade é uma ferramenta para auxiliar a detecção de alterações que comprometam a vida reprodutiva do garanhão. A compreensão aprofundada dos componentes proteicos e metabólicos do plasma seminal é importante para desvendar a fisiologia da reprodução, auxiliando na compreensão da infertilidade na espécie equina, podendo levar ao desenvolvimento de um produto que aumente as características seminais relacionadas à fertilidade masculina.