Efeito da adição dos antioxidantes glutationa peroxidase e cisteína ao diluidor de congelação do sêmen equino

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: BARROS, Lawrence de Oliveira
Data de Publicação: 2011
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE
Texto Completo: http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/5727
Resumo: A criopreservação de sêmen equino representa uma importante biotécnica aplicada ao manejo reprodutivo desta espécie. Quando exposto a baixas temperaturas, os espermatozoides sofrem modificações estruturais, ocorrendo estresse oxidativo quando há desequilíbrio entre a produção de ROS e a quantidade de substâncias antioxidantes presentes no plasma seminal. Objetivando-se analisar o efeito da adição de diferentes concentrações de glutationa peroxidase (GPx) e cisteína ao diluidor de congelação do sêmen de eqüinos, foram utilizados cinco garanhões da raça Quarto-de-Milha, com fertilidade comprovada. Amostras de sêmen foram colhidas com vagina artificial e diluídas em Botu Crio, acrescido de antioxidantes: G1= Controle (Sem antioxidantes); G2= 0,5 mM de N-Acetil-Cisteina; G3= 1 mM de N-Acetil-Cisteina; G4 = 1 U de Glutationa Peroxidase (GPx) e G5= 5 U de Glutationa Peroxidase (GPx). A seguir, as amostras de sêmen foram envasadas em palheta (0,5 mL; na concentração de 150 x 106 espermatozóides/palheta), congeladas utilizando o método automatizado e armazenadas em botijão criogênico à – 196°C. As amostras foram descongeladas (37 °C por 30 segundos) e submetidas às análises espermáticas (cinética, integridade de membrana plasmática, integridade de acrossoma e potencial de membrana mitocondrial), imediatamente após a descongelação (T0) e após 60 minutos (T60). Amostras de sêmen suplementadas com GPx 5 U e cisteína 0,5 mM não apresentaram diferenças (P>0,05) na porcentagem de espermatozóides com alto potencial de membrana mitocondrial, assim como com acrossomas e membrana plasmática íntegras, entre os tempos T0 e T60. Amostras congeladas com cisteína 1 mM apresentaram maior (P<0,05) porcentual de gametas com acrossomas íntegros do que os de GPx 1 e 5 U e cisteína 0,5 mM. Espermatozoides com alto potencial de membrana mitocondrial foram encontrados no T60 em maior (P<0,05) porcentual no garanhão 5 em relação aos garanhões 1 e 2. A cinética espermática evidenciou maiores (P<0,05) valores de VCL e VAP nas amostras controle, no T0 do que no T60. De maneira geral, o cavalo 4 apresentou maiores (P<0,05) valores cinéticos que os demais animais. Conclui-se que a adição de cisteína 1mM preservou melhor a integridade de acrossoma espermático, e que a resposta individual de cada garanhão influencia significativamente os resultados dos parâmetros analisados.
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Amostras de sêmen foram colhidas com vagina artificial e diluídas em Botu Crio, acrescido de antioxidantes: G1= Controle (Sem antioxidantes); G2= 0,5 mM de N-Acetil-Cisteina; G3= 1 mM de N-Acetil-Cisteina; G4 = 1 U de Glutationa Peroxidase (GPx) e G5= 5 U de Glutationa Peroxidase (GPx). A seguir, as amostras de sêmen foram envasadas em palheta (0,5 mL; na concentração de 150 x 106 espermatozóides/palheta), congeladas utilizando o método automatizado e armazenadas em botijão criogênico à – 196°C. As amostras foram descongeladas (37 °C por 30 segundos) e submetidas às análises espermáticas (cinética, integridade de membrana plasmática, integridade de acrossoma e potencial de membrana mitocondrial), imediatamente após a descongelação (T0) e após 60 minutos (T60). Amostras de sêmen suplementadas com GPx 5 U e cisteína 0,5 mM não apresentaram diferenças (P>0,05) na porcentagem de espermatozóides com alto potencial de membrana mitocondrial, assim como com acrossomas e membrana plasmática íntegras, entre os tempos T0 e T60. Amostras congeladas com cisteína 1 mM apresentaram maior (P<0,05) porcentual de gametas com acrossomas íntegros do que os de GPx 1 e 5 U e cisteína 0,5 mM. Espermatozoides com alto potencial de membrana mitocondrial foram encontrados no T60 em maior (P<0,05) porcentual no garanhão 5 em relação aos garanhões 1 e 2. A cinética espermática evidenciou maiores (P<0,05) valores de VCL e VAP nas amostras controle, no T0 do que no T60. De maneira geral, o cavalo 4 apresentou maiores (P<0,05) valores cinéticos que os demais animais. Conclui-se que a adição de cisteína 1mM preservou melhor a integridade de acrossoma espermático, e que a resposta individual de cada garanhão influencia significativamente os resultados dos parâmetros analisados.The cryopreservation of equine semen represents an important applied reproductive biotechnology of this species. When exposed to low temperatures, spermatozoa suffer structural modifications, occurring oxidative stress when there is imbalance between the production of reactive oxygen species (- ROS) and the amount of antioxidants present in seminal plasma. The objective of this study was to analyze the effect of the addition of different concentrations of the antioxidants glutathione peroxidase (GPx) and cysteine in equine frozen semen medium. Five Quarter Horse stallions, with proven fertility were used. Semen samples were collected with artificial vagina and diluted in Botu Crio added with antixodants: G1= Control (without antioxidants); G2= 0.5 mM of N-Acetil-Cysteine; G3= 1 mM of N-Acetil-Cysteine; G4 = 1 U of Glutathione Peroxidase (GPx) and G5= U of Glutathione Peroxidase (GPx). Semen samples were packed straws (0.5 mL; 150 x 106 concentration of spermatozoa/straw), frozen in automated method and stored in liquid Nitrogen (– 196 °C). Semen samples were thawed (37 °C per 30 seconds) and submitted to sperm analyses (kinematic, plasma membrane and acrosome integrity, and potential of mitocondrial membrane), immediately after thawing (T0) and after 60 minutes (T60). Semen samples supplemented with GPx 5 U and cysteine 0.5 mM did not show difference (P>0.05) on the percentage of sperms with high percentage of potential of mitocondrial membrane, as well as with intact acrosome and plasma membrane between T0 and T60 times. Frozen samples with cisteine 1 mM showed high (P<0.05) of gametes with intact acrosome than those of GPx 1 and 5 U and cisteine 0.5mM. Spermatozoa with higher percentage of potential of mitocondrial membrane was founded in T60 (P<0.05) in stallion 5 than stallions 1 and 2. The sperm kinematic evidenced a high values of VCL and VAP (P<0.05) in control samples, in T0 than T60. In general, the stallion 4 presented high values (P<0.05) of kinematic parameters than other stallions. It can be concluded that addition of cysteine (1mM) in equine frozen semen medium preserved better the acrosome integrity and that the individual response of each stallion influence significantly the results of the sperm analysis.Universidade Federal Rural de PernambucoDepartamento de Medicina VeterináriaBrasilUFRPEPrograma de Pós-Graduação em Ciência VeterináriaGUERRA, Maria Madalena PessoaCARNEIRO, Gustavo FérrerSILVA, Karen Mascaro Gonçalves daSOARES, Pierre de CastroBARROS, Lawrence de Oliveira2016-10-14T15:47:28Z2011-02-28info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfBARROS, Lawrence de Oliveira. Efeito da adição dos antioxidantes glutationa peroxidase e cisteína ao diluidor de congelação do sêmen equino. 2011. 55 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Ciência Veterinária) - Universidade Federal Rural de Pernambuco, Recife.http://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede2/handle/tede2/5727porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPEinstname:Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)instacron:UFRPE2016-10-14T15:47:28Zoai:tede2:tede2/5727Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/tede/PUBhttp://www.tede2.ufrpe.br:8080/oai/requestbdtd@ufrpe.br ||bdtd@ufrpe.bropendoar:2016-10-14T15:47:28Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFRPE - Universidade Federal Rural de Pernambuco (UFRPE)false
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