Cotton gauze bandage: a support for protease immobilization for use in biomedical applications
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Data de Publicação: | 2007 |
Outros Autores: | |
Tipo de documento: | Artigo |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | RBCF. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas (Online) |
Texto Completo: | https://www.revistas.usp.br/rbcf/article/view/44237 |
Resumo: | Neste trabalho foi efetuada a imobilização de tripsina numa gaze esterilizada de algodão. Foram determinadas as condições ótimas de imobilização: foi estudada a influência do pH, concentração e volume da solução de tripsina usada na imobilização na hidrólise da N-benzoil-DL-arginina p-nitroanilida. As propriedades catalíticas, os parâmetros cinéticos e as condições de estabilidade das enzimas livre e imobilizada foram comparadas. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura ótimos para a tripsina imobilizada foram 9.5 e 55 ºC, respectivamente, maiores que os correspondentes da forma livre (7,5 e 45 ºC). A 37 ºC e a pH 7,0 (aproximadamente as condições fisiológicas) Km (constante de Michaelis) foi 3,98 µmol/mL e Vmax (velocidade máxima de reacção) foi 0,719 µmol/(min mg) para a tripsina imobilizada; para a tripsina livre os valores correspondentes foram 2,46 µmol/mL e 2,89 µmol/(min mg). A quantidade de enzima imobilizada foi de 6 mg/g (base seca). Após 30 dias não se verificou libertação de tripsina do suporte. O bom desempenho da tripsina imobilizada na gaze esterilizada de algodão comprova a sua potencial utilização como agente anti-inflamatório no tratamento de lesões cutâneas. |
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Cotton gauze bandage: a support for protease immobilization for use in biomedical applicationsGaze esterilizada de algodão: suporte para a imobilização de tripsina para uso em aplicações biomédicasGaze esterilizada de algodãoTripsina^i2^simobilizaLesões cutâneas^i2^stratameCotton gauze bandageTrypsin^i1^sImmobilizatCutaneous wound^i1^streatmNeste trabalho foi efetuada a imobilização de tripsina numa gaze esterilizada de algodão. Foram determinadas as condições ótimas de imobilização: foi estudada a influência do pH, concentração e volume da solução de tripsina usada na imobilização na hidrólise da N-benzoil-DL-arginina p-nitroanilida. As propriedades catalíticas, os parâmetros cinéticos e as condições de estabilidade das enzimas livre e imobilizada foram comparadas. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura ótimos para a tripsina imobilizada foram 9.5 e 55 ºC, respectivamente, maiores que os correspondentes da forma livre (7,5 e 45 ºC). A 37 ºC e a pH 7,0 (aproximadamente as condições fisiológicas) Km (constante de Michaelis) foi 3,98 µmol/mL e Vmax (velocidade máxima de reacção) foi 0,719 µmol/(min mg) para a tripsina imobilizada; para a tripsina livre os valores correspondentes foram 2,46 µmol/mL e 2,89 µmol/(min mg). A quantidade de enzima imobilizada foi de 6 mg/g (base seca). Após 30 dias não se verificou libertação de tripsina do suporte. O bom desempenho da tripsina imobilizada na gaze esterilizada de algodão comprova a sua potencial utilização como agente anti-inflamatório no tratamento de lesões cutâneas.The covalent immobilization of trypsin on sterilized cotton gauze bandage was carried out for future use as an anti-inflammatory agent on wound dressing. The optimal immobilization conditions were determined: the influence of pH, concentration, and volume of the trypsin solution used in the immobilization procedure was studied. The catalytic properties and kinetic parameters, as well as the storage stability of the immobilized and free enzyme were compared. Results showed that the optimal pH and temperature for the immobilized trypsin in the hydrolysis of N-benzoyl-DL-arginine p-nitroanilide were 9.5 and 55 ºC, which were higher than those of the free form (7.5 and 45 ºC). It was found, at 37 ºC and pH 7.0 (approximately, the physiological conditions), that the Km (Michaelis constant) was 3.98 µmol/mL and that Vmax (maximal reaction rate) was 0.719 µmol/(min mg) for the immobilized trypsin, compared to a Km of 2.46 mmol/mL and a Vmax of 2.89 µmol/(min mg) for the free trypsin. The amount of immobilized trypsin was 6 mg/g dried support. After 30 days, no trypsin had liberated from the support. The superior performance of the immobilized trypsin demonstrates its potential application in practice.Universidade de São Paulo. Faculdade de Ciências Farmacêuticas2007-12-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionArtigo avaliado pelos Paresapplication/pdfhttps://www.revistas.usp.br/rbcf/article/view/4423710.1590/S1516-93322007000400006Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas; v. 43 n. 4 (2007); 535-542Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas; Vol. 43 Núm. 4 (2007); 535-542Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas; Vol. 43 No. 4 (2007); 535-5421809-45621516-9332reponame:RBCF. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas (Online)instname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPenghttps://www.revistas.usp.br/rbcf/article/view/44237/47858Seabra, Inês JoséGil, Maria Helenainfo:eu-repo/semantics/openAccess2012-09-20T19:06:32Zoai:revistas.usp.br:article/44237Revistahttps://www.scielo.br/j/rbcf/PUBhttps://old.scielo.br/oai/scielo-oai.php||bjps@usp.br1809-45621516-9332opendoar:2012-09-20T19:06:32RBCF. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas (Online) - Universidade de São Paulo (USP)false |
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Neste trabalho foi efetuada a imobilização de tripsina numa gaze esterilizada de algodão. Foram determinadas as condições ótimas de imobilização: foi estudada a influência do pH, concentração e volume da solução de tripsina usada na imobilização na hidrólise da N-benzoil-DL-arginina p-nitroanilida. As propriedades catalíticas, os parâmetros cinéticos e as condições de estabilidade das enzimas livre e imobilizada foram comparadas. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura ótimos para a tripsina imobilizada foram 9.5 e 55 ºC, respectivamente, maiores que os correspondentes da forma livre (7,5 e 45 ºC). A 37 ºC e a pH 7,0 (aproximadamente as condições fisiológicas) Km (constante de Michaelis) foi 3,98 µmol/mL e Vmax (velocidade máxima de reacção) foi 0,719 µmol/(min mg) para a tripsina imobilizada; para a tripsina livre os valores correspondentes foram 2,46 µmol/mL e 2,89 µmol/(min mg). A quantidade de enzima imobilizada foi de 6 mg/g (base seca). Após 30 dias não se verificou libertação de tripsina do suporte. O bom desempenho da tripsina imobilizada na gaze esterilizada de algodão comprova a sua potencial utilização como agente anti-inflamatório no tratamento de lesões cutâneas. |
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