Estudo do papel de genes envolvidos no reparo de dano ao DNA na sensibilização à morte celular em células que expressam oncogenes de HPV

• Autor(a) principal: Lino, Vanesca de Souza
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-19092023-173826/
• topic: Apoptose; Apoptosis; Cells transformed by HPV; Células transformadas por HPV; DNA repair; HPV; HPV; Reparo de DNA; shRNA; shRNA

Alguns tipos de HPV, conhecidos coletivamente como HPV de alto risco, estão etiologicamente associadas com quase a totalidade dos cânceres da cérvice uterina, com mais de 50% de outros cânceres anogenitais e uma porcentagem relevante de tumores de cabeça e pescoço. A infecção por estes tipos de vírus está associada ao acúmulo de alterações genéticas incluindo mutações pontuais, inserções, deleções e alterações cromossômicas, uma característica comum à maioria dos cânceres humanos. Os HPV de alto risco expressam duas oncoproteínas, E6 e E7, que agem sobre fatores celulares específicos promovendo proliferação celular. Estas proteínas são capazes de induzir alterações cromossômicas numéricas e estruturais. Além disso, podem modular a resposta da célula à presença de dano no DNA. A letalidade sintética descreve uma condição celular que duas (ou mais) mutações não alélicas e não essências, que não são letais individualmente, tornam-se mortais quando presentes na mesma célula. Células transformadas por HPV de alto risco constituem modelos de particular interesse para o estudo de letalidade sintética, uma vez que as oncoproteínas E6 e E7 agem em várias vias de transdução de sinal, como por exemplo, as reguladas por p53 e pRb. Ao longo dos últimos anos, nosso laboratório vem investigando o papel de proteínas envolvidas no reparo de dano ao DNA na biologia das células derivadas de câncer cervical. No presente estudo, analizamos o silenciamento dos genes RAD52. BRCA1, PCNA e HUS1 nas linhagens derivadas de tumores da cérvice uterina HeLa (transformada por HPV18) e SiHa (transformada por HPV16). Através de ensaios de proliferação e viabilidade observamos que o silenciamento desses genes foi capaz de mudar o perfil proliferativo dessas linhagens, além de conseguir induzir parada de ciclo celular e entrada em apoptose em algumas das populações celulares analisadas.