Influência do Citocromo P450 3A4 e da composição lipídica da membrana para atividade da Doxorrubicina

• Autor(a) principal: Santos, Kevin Figueiredo dos
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-06092023-112554/
• topic: Anticancer drug resistance; Citocromo P450 3A4; Cytochrome P450 3A4; Doxorrubicina; Doxorubicin; Langmuir monolayers; Membrane models; Modelos de membrana; Monocamadas de Langmuir; Resistência a quimioterápicos

A resistência a quimioterápicos é a principal causa para o insucesso da quimioterapia. Essa resistência surge de vários mecanismos, incluindo alterações na atividade dos Citocromos P450, responsáveis pelo metabolismo de diversos medicamentos. Essas enzimas estão predominantemente localizadas nas membranas do retículo endoplasmático (ER). Por isso, uma estratégia para estudar os efeitos desses citocromos é usar modelos de membrana. Neste trabalho, investigamos a influência do sistema do citocromo P450 3A4 (CYP3A4) e da composição lipídica de monocamadas de Langmuir na interação do quimioterápico Doxorrubicina (DOX). Empregou-se um modelo de membrana do ER com a mistura de colesterol (Chol), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC), 1,2-dipalmitoil-sn-glicero- 3-fosfoetanolamina (DPPE) e L-α-fosfatidilinositol (PI). Para mimetizar membranas de células cancerosas, variamos o conteúdo de colesterol e fosfatidilinositol. A incorporação do CYP3A4 causou maiores alterações na monocamada mais condensada e com maior quantidade de Chol. Foram observadas menores variações no modelo de membrana mais expandido contendo maior fração de PI. A adsorção da DOX provocou expansão e aumento da fluidez nas monocamadas. Assim como para o CYP3A4, as interações da DOX foram mais pronunciadas na monocamada contendo maior concentração de Chol, e menos intensas para o modelo com maior conteúdo de PI. Essas diferenças entre as monocamadas destacam a importância da composição lipídica para as atividades do CYP3A4 e da DOX. As alterações provocadas pela DOX foram consideravelmente reduzidas quando o CYP3A4 foi incorporado nas monocamadas. Essa atenuação pode estar associada à formação de complexos CYP3A4-DOX (enzima-substrato) como sugerem os espectros de espectroscopia no infravermelho. O resultado é consistente com a hipótese de que o CYP3A4 pode estar envolvido na resistência à DOX. A atuação do CYP3A4 e a importância da composição lipídica da membrana, observadas nesta tese, podem ser exploradas no desenvolvimento de estratégias para melhorar a eficácia da quimioterapia.