Atividade específica das enzimas desidrogenase de glutamato, sintetase de glutamina e sintase de glutamato em eixos embrionários de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L. cv. Carioca SH 80) “in vitro” em presença de diferentes fontes de nitrogênio

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Oliveira, Enio Tiago de
Data de Publicação: 1995
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-20231122-100405/
Resumo: O desenvolvimento de eixos embrionários de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L. cv. Carioca SH 80), nutridos com diferentes fontes de nitrogênio, foi acompanhado bioquimicamente através de determinações da atividade das enzimas Desidrogenase de Glutamato (GDH), Sintetase de Glutamina (GS) e Sintase de Glutamato (GOGAT), e fisiológicamente medindo-se as massas de matéria fresca e seca. Para tanto, os eixos embrionários foram cultivados em meio MS modificado em relação à composição nitrogenada e submetidos aos tratamentos: 1) amônia mais nitrato, 2) nitrato mais glutamina, 3) amônia mais glutamina, 4) glutamina, 5) nitrato isoladamente, e como testemunha, foi utilizado o tratamento (6) sem adição de nitrogênio. Todas as modificações foram proporcionais à formulação original de MS. As determinações analíticas foram realizadas nos seguintes períodos: zero, cinco, dez e quinze dias de cultivo, e os melhores resultados em termos de desenvolvimento dos eixos embrionários foram proporcionados pelos tratamentos que receberam nitrogênio na forma de nitrato, seja isoladamente ou combinado com amônia ou glutamina. Esses tratamentos favoreceram também os mais altos níveis de atividade das enzimas GS e GOGAT. Eixos embrionários intactos (tempo zero) apresentaram altos teores de proteínas solúveis em relação aos eixos embrionários submetidos ao cultivo nos diferentes tratamentos. A atividade específica das enzimas GDH, GS e GOGAT também foram relativamente altas nesse órgão. Os mais altos níveis de atividade da GDH foram proporcionados pelos tratamentos com glutamina isoladamente, glutamina mais amônia e pelo tratamento sem nitrogênio. Esses resultados coincidiram com o não desenvolvimento dos eixos embrionários “in vitro” caracterizando uma possível deficiência de nitrogênio, e indicando uma provável atividade catabólica da GDH determinada pela exigência em nitrogênio para o desenvolvimento dos mesmos. Os teores de nitrogênio total no material cultivado sofreram acentuados decréscimos, principalmente nos períodos iniciais de cultivo, no tratamento com ausência de nitrogênio e naquele que recebeu exclusivamente nitrato. Nos demais tratamentos os teores de nitrogênio permaneceram praticamente constantes ao longo dos quinze dias de cultivo. A porcentagem de matéria seca decresceu acentuadamente em todos os tratamentos nos primeiros cinco dias de cultivo. Tais decréscimos foram justificados pelos processos de embebição e reidratação dos eixos embrionários. O aumento de massa de matéria seca ocorreu nos períodos finais de cultivo, sendo maiores nos tratamentos que receberam somente glutamina ou glutamina mais amônia. O incremento de massa de matéria fresca correlacionou-se positivamente com o padrão de crescimento da cultura, mostrando os maiores valores nos tratamentos que receberam nitrato mais amônia, nitrato mais glutamina e naquele que recebeu somente nitrato.
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Para tanto, os eixos embrionários foram cultivados em meio MS modificado em relação à composição nitrogenada e submetidos aos tratamentos: 1) amônia mais nitrato, 2) nitrato mais glutamina, 3) amônia mais glutamina, 4) glutamina, 5) nitrato isoladamente, e como testemunha, foi utilizado o tratamento (6) sem adição de nitrogênio. Todas as modificações foram proporcionais à formulação original de MS. As determinações analíticas foram realizadas nos seguintes períodos: zero, cinco, dez e quinze dias de cultivo, e os melhores resultados em termos de desenvolvimento dos eixos embrionários foram proporcionados pelos tratamentos que receberam nitrogênio na forma de nitrato, seja isoladamente ou combinado com amônia ou glutamina. Esses tratamentos favoreceram também os mais altos níveis de atividade das enzimas GS e GOGAT. Eixos embrionários intactos (tempo zero) apresentaram altos teores de proteínas solúveis em relação aos eixos embrionários submetidos ao cultivo nos diferentes tratamentos. A atividade específica das enzimas GDH, GS e GOGAT também foram relativamente altas nesse órgão. Os mais altos níveis de atividade da GDH foram proporcionados pelos tratamentos com glutamina isoladamente, glutamina mais amônia e pelo tratamento sem nitrogênio. Esses resultados coincidiram com o não desenvolvimento dos eixos embrionários “in vitro” caracterizando uma possível deficiência de nitrogênio, e indicando uma provável atividade catabólica da GDH determinada pela exigência em nitrogênio para o desenvolvimento dos mesmos. Os teores de nitrogênio total no material cultivado sofreram acentuados decréscimos, principalmente nos períodos iniciais de cultivo, no tratamento com ausência de nitrogênio e naquele que recebeu exclusivamente nitrato. Nos demais tratamentos os teores de nitrogênio permaneceram praticamente constantes ao longo dos quinze dias de cultivo. A porcentagem de matéria seca decresceu acentuadamente em todos os tratamentos nos primeiros cinco dias de cultivo. Tais decréscimos foram justificados pelos processos de embebição e reidratação dos eixos embrionários. O aumento de massa de matéria seca ocorreu nos períodos finais de cultivo, sendo maiores nos tratamentos que receberam somente glutamina ou glutamina mais amônia. O incremento de massa de matéria fresca correlacionou-se positivamente com o padrão de crescimento da cultura, mostrando os maiores valores nos tratamentos que receberam nitrato mais amônia, nitrato mais glutamina e naquele que recebeu somente nitrato.The “in vitro” development of bean (Phaseolus vulgaris L. cv. Carioca SH 80) embryo axis, in the presence of different nitrogen sources, has been monitored biochemically through the activities of the enzymes Glutamate Dehydrogenase (GDH), Glutamine Synthetase (GS) and Glutamate Synthase (GOGAT), soluble protein and total nitrogen, and physiologically measuring the dry and fresh matter. The embryo axis were maintened in a modified MS medium under the following treatments: 1) ammonia + nitrate; 2) nitrate + glutamine; 3) ammonia + glutamine; 4) glutamine; 5) nitrate; 6) without nitrogen. The time course assays were conducted at O, 5, 1 O and 15 days after the start of experiments. The best results pertained to the development of the embryo axis were obtained in presence of nitrate alone or in conbination with ammonia or glutamine. ln these treatments highest leveis of GS and GOGAT were detected. The intact axis (O time) showed higher levels of soluble proteins than those ones submmitted to the different treatments. High specific activities of GDH, GS and GOGAT were also detected in these embryos. The high levels of GDH were observed in the presence of either glutamine alone, glutamine + ammonia or in the absence of nitrogen. These results could be related to the poor development of the embryo axis in cultura, possibly due to a nitrogen defficiency in the medium, pointing towards a probably catabolic activity of GDH determined by nitrogen requirement for the development of the embryos. The total nitrogen content of the cultivated material decreased mainly in the initial periods of the cultura, either in the absence of nitrogen or in the presence of nitrate. On the other hand, in the other treatments the nitrogen content remained practically the same during the growth period of the embryo axis. The dry matter decreased in all treatments during the initial 5-day period of growth, due to both embibition and rehydration of the embryo axis. However, in the ending of period in cultura, the dry matter content increased mainly in the presence of glutamine alone or glutamine plus ammonia. The highest values of the fresh weight were observed in the treatment receiving nitrate plus ammonia or plus glutamine, and when only nitrate was present.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPCrocomo, Otto J.Oliveira, Enio Tiago de1995-03-30info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-20231122-100405/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2023-11-24T19:23:04Zoai:teses.usp.br:tde-20231122-100405Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212023-11-24T19:23:04Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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