Caracterização fenotípica e funcional de IFN-DCs derivadas de indivíduos infectados pelo HIV-1.
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2015 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
Texto Completo: | http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42133/tde-09122015-130521/ |
Resumo: | A imunoterapia baseada em MoDC constitui uma estratégia para tratamento de indivíduos HIV+. Protocolos para obtenção de MoDC em geral utilizam IL-4 e GM-CSF (IL4-DC). Alguns estudos utilizam as IFN-DC (IFN-α + GM-CSF), que exibem um fenótipo combinado de DC mielóide, DC plasmocitóide (pDC) e célula NK. Esse perfil misto pode aperfeiçoar a imunoterapia para pacientes HIV+. Para tanto, monócitos de pacientes HIV+ foram cultivados com GM-CSF e IL-4 ou IFN-α por 5 dias e estimuladas por 48 horas com pulso de HIV inativado por AT-2 e/ou coquetel de citocinas pró-inflamatórias. Avaliamos a expressão de moléculas de superfície de IFN-DC e ativação de linfócitos T por citometria de fluxo; produção de citocinas IL-12 e IL-10 por ELISA. IFN-DC apresentaram morfologia e fenótipo basais ativados e características de pDC e célula NK, diferente das IL4-DC. As IFN-DC foram capazes de produzir IL-12, estimular a proliferação e produção de IFN-γ de linfócitos TCD4 e CD8, porém similares às IL4-DCs. IFN-DC são capazes de estimular resposta de linfócitos T tanto quanto IL4-DC. |
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Caracterização fenotípica e funcional de IFN-DCs derivadas de indivíduos infectados pelo HIV-1.Immunophenotypic and functional characterization of IFN-DC derived HIV-1 infected patients.Células dendríticasDendritic cellsHIVHIVInterferon tipo ITherapeutic vaccineType I InterferonVacina terapêuticaA imunoterapia baseada em MoDC constitui uma estratégia para tratamento de indivíduos HIV+. Protocolos para obtenção de MoDC em geral utilizam IL-4 e GM-CSF (IL4-DC). Alguns estudos utilizam as IFN-DC (IFN-α + GM-CSF), que exibem um fenótipo combinado de DC mielóide, DC plasmocitóide (pDC) e célula NK. Esse perfil misto pode aperfeiçoar a imunoterapia para pacientes HIV+. Para tanto, monócitos de pacientes HIV+ foram cultivados com GM-CSF e IL-4 ou IFN-α por 5 dias e estimuladas por 48 horas com pulso de HIV inativado por AT-2 e/ou coquetel de citocinas pró-inflamatórias. Avaliamos a expressão de moléculas de superfície de IFN-DC e ativação de linfócitos T por citometria de fluxo; produção de citocinas IL-12 e IL-10 por ELISA. IFN-DC apresentaram morfologia e fenótipo basais ativados e características de pDC e célula NK, diferente das IL4-DC. As IFN-DC foram capazes de produzir IL-12, estimular a proliferação e produção de IFN-γ de linfócitos TCD4 e CD8, porém similares às IL4-DCs. IFN-DC são capazes de estimular resposta de linfócitos T tanto quanto IL4-DC.Immunotherapy based on MDDCs is a strategy for treating HIV-infected patients. Alternatively to the conventional protocol for DC differentiation based on IL-4 and GM-CSF (IL4-DC) some studies suggest the use of IFN-DC (IFN-α + GM-CSF). These cells exhibit a combined phenotype of myeloid DC, plasmacytoid DC (pDC) and NK. Considering the mixed profile of IFN-DCs alternative protocols can bring novel elements for immunotherapy. Monocytes isolated from HIV-infected patients were cultured in the presence of GM-CSF and IL-4 or IFN-α. On day 5 DCs were pulsed with AT-2-inactivated HIV and stimulated for 48 hours with a cocktail of proinflammatory cytokines. We assessed IFN-DC surface markers expression and T cell activation by flow cytometry; IL-10 and IL-12 production by ELISA. IFN-DC showed activated morphological and phenotypic features during basal state of maturity and exhibited features of pDC and NK different from IL4-DC. The IFN-DC like IL4-DC were able to produce IL-12 and stimulated T cells. So, the IFN-DC were able to stimulate the T cells as well as IL4-DCs.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSumida, Telma Miyuki OshiroSantillo, Bruna Tereso2015-08-20info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42133/tde-09122015-130521/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2016-07-28T16:11:58Zoai:teses.usp.br:tde-09122015-130521Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212016-07-28T16:11:58Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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