Estudo da influência de vesículas extracelulares na resposta imune contra a esporotricose experimental

• Autor(a) principal: Campos, Renato Massis Souza
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9142/tde-29072022-211646/
• topic: Agrobacterium tumefaciens; Agrobacterium tumefaciens; Esporotricose; Extracellular vesicles; HOG; HOG; Sporothrix brasiliensis; Sporothrix brasiliensis; Sporotrichosis; Vesículas extracelulares

O gênero Sporothrix compreende diversas espécies de fungos termodimóficos que infectam humanos e felinos no Brasil, levando à esporotricose, uma micose subcutânea crônica que atualmente é endêmica em estados Brasileiros. O número de casos tem aumentado rapidamente em São Paulo e municípios, apontando para um problema de saúde pública. Durante a infecção, a resposta ao estresse nestes micro-organismos é governada, principalmente, pela proteína quinase HOG1, um importante componente da via da HOG e crucial na manutenção da homeostase celular frente a alterações de potencial osmótico, estresse oxidativo, temperatura, entre outros. Neste trabalho, S. schenckii, S. brasiliensis 5110 e S. brasiliensis M1168 demonstraram diferentes perfis de resistência no ensaio de estresse celular, principalmente em meios contendo NaCl, SDS, Congo Red, Calcofluor-White e H2O2, evidenciando as diferenças fisiológicas entre as cepas e a possível atuação da HOG1 nos diferentes cenários. Utilizando o protocolo de transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens, conseguimos, pela primeira vez, estabelecer uma metodologia confiável para transformar S. brasiliensis (SbATMT). Obtivemos 214 isolados transformantes com a estabilidade mitótica após 5 passagens em meio seletivo de 18% e dois isolados com possível redução da expressão de HOG1 (p38) após análise preliminar. O isolado ΔHOG1-AS2 demonstrou aumento da resistência a calcofluor white (CFW) ao passo que o isolado ΔHOG1-AS4 apresentou crescimento reduzido em meio com cloreto de sódio (NaCl).