Métodos moleculares aplicados na pesquisa de Escherichia coli O157 em amostras fecais de bovinos
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2004 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
Texto Completo: | https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6135/tde-30012023-185504/ |
Resumo: | O grupo das Escherichia coli enterohemorrágicas (EHEC) foi assim classificado após a identificação do sorotipo O157:H7 como patógeno nos EUA, em 1982. Este sorotipo foi isolado em dois grandes surtos de colite hemorrágica (CH) associados à ingestão de hambúrgueres. É considerado causa emergente de doença de transmissão alimentar, ocasionando quadros de diarréia branda à severa (sanguinolenta), podendo evoluir para um quadro de insuficiência renal ocasionalmente fatal, denominado síndrome hemolítica urêmica (SHU). O gado bovino saudável tem sido apontado como o principal reservatório de EHEC e o conteúdo fecal destes animais pode contaminar a carne durante o abate, bem como os equipamentos utilizados neste processo. A infecção também pode ocorrer pela ingestão de leite cru e derivados não pasteurizados, embutidos, vegetais e água contaminada. O contágio pessoa a pessoa também é um importante modo de transmissão. Objetivo. Aplicação de métodos moleculares, visando caracterizar Escherichia coli sorogrupo O157, em isolados obtidos de amostras fecais de bovinos. Métodos. Amostras fecais de 44 bovinos sadios foram colhidas em matadouro com serviço de inspeção oficial e em propriedades de exploração leiteira. As amostras foram enriquecidas em caldo EC e semeadas em meio de cultura específico (Fluorocult®, Merck). As colônias sorbitol-negativo, MUG-negativo e oxidase-negativa foram testadas com anti-soro específico (soro anti E. coli O157®, Probac). Os isolados obtidos foram submetidos a técnicas moleculares (PCR e RSS-PCR) utilizando iniciadores específicos para o microrganismo em estudo. Resultados. Os resultados não confirmaram a presença do sorogrupo O157 nas amostras pesquisadas mas evidenciaram que as técnicas moleculares empregadas foram capazes de evidenciar e caracterizar a cepa padrão E. coli O157H:7, podendo assim, serem utilizadas como ferramentas para a identificação de amostras do sorogrupo O157, possibilitando um diagnóstico específico, de fácil execução e pouco dispendioso. |
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Métodos moleculares aplicados na pesquisa de Escherichia coli O157 em amostras fecais de bovinosMolecular methods applied to the study of Escherichia coli O157 in bovine fecesEscherichia coliEscherichia coliMicrobiologiaMicrobiologyPCRPCRPublic HealthSaúde PúblicaO grupo das Escherichia coli enterohemorrágicas (EHEC) foi assim classificado após a identificação do sorotipo O157:H7 como patógeno nos EUA, em 1982. Este sorotipo foi isolado em dois grandes surtos de colite hemorrágica (CH) associados à ingestão de hambúrgueres. É considerado causa emergente de doença de transmissão alimentar, ocasionando quadros de diarréia branda à severa (sanguinolenta), podendo evoluir para um quadro de insuficiência renal ocasionalmente fatal, denominado síndrome hemolítica urêmica (SHU). O gado bovino saudável tem sido apontado como o principal reservatório de EHEC e o conteúdo fecal destes animais pode contaminar a carne durante o abate, bem como os equipamentos utilizados neste processo. A infecção também pode ocorrer pela ingestão de leite cru e derivados não pasteurizados, embutidos, vegetais e água contaminada. O contágio pessoa a pessoa também é um importante modo de transmissão. Objetivo. Aplicação de métodos moleculares, visando caracterizar Escherichia coli sorogrupo O157, em isolados obtidos de amostras fecais de bovinos. Métodos. Amostras fecais de 44 bovinos sadios foram colhidas em matadouro com serviço de inspeção oficial e em propriedades de exploração leiteira. As amostras foram enriquecidas em caldo EC e semeadas em meio de cultura específico (Fluorocult®, Merck). As colônias sorbitol-negativo, MUG-negativo e oxidase-negativa foram testadas com anti-soro específico (soro anti E. coli O157®, Probac). Os isolados obtidos foram submetidos a técnicas moleculares (PCR e RSS-PCR) utilizando iniciadores específicos para o microrganismo em estudo. Resultados. Os resultados não confirmaram a presença do sorogrupo O157 nas amostras pesquisadas mas evidenciaram que as técnicas moleculares empregadas foram capazes de evidenciar e caracterizar a cepa padrão E. coli O157H:7, podendo assim, serem utilizadas como ferramentas para a identificação de amostras do sorogrupo O157, possibilitando um diagnóstico específico, de fácil execução e pouco dispendioso.Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) is a group of bacteria classified after the identification of serotype O157: H7 as a pathogen in the USA, in 1982. This serotype was isolated in two large outbreaks of hemorrhagic colitis (HC) associated with hamburgers. lt is considered an emerging foodborne disease, leading to cases of mild to severa (bloody) diarrhea that may evolue into occasionally fatal cases of renal insufficiency, called hemolytic uremic syndrome (HUS). Healthy cattle are believed to be the main reservoirs of EHEC and fecal contents of these animals may contaminate meat and equipment during slaughter. lnfection may also occur by means of the ingestion of raw milk and unpasteurized milk by-products, contaminated sausages, vegetables and water. Person-to-person contagion is also an important route of transmission. Objective. The objective of the present trial was the use of molecular methods in order to characterize Escherichia coli serogroup O157 in isolates obtained from bovina feces. Methods. Fecal samples from 44 healthy bovines were collected in a slaughterhouse submitted to official inspection and in dairy farms. Samples were enriched in EC broth and cultured in specific cultura medium (Fluorocult®, Merck). Colonies that were sorbitol-negative, MUG-negative and oxidase-negative were tested against specific anti-serum (serum anti E.coli O157®, Probac). lsolates obtained were submitted to molecular techniques (PCR and RSS-PCR) using primers specific for the microorganism. Results. The presence of serogroup O157 was not confirmed in the samples analyzed. Molecular techniques evidenced and characterized the standard strain E. coli O157:H7 used as positive control, and may, therefore, be used as tools in the identification of serogroup O157, enabling specific, easy and cheap diagnostic procedure.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPMatté, Maria HelenaFigueiredo, Vera Cecilia Ferreira de2004-06-15info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6135/tde-30012023-185504/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2023-01-30T21:10:18Zoai:teses.usp.br:tde-30012023-185504Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212023-01-30T21:10:18Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
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