Influência do segundo mensageiro GMPc e suas vias de sinalização no conteúdo lipídico de complexos cumulus-oócitos bovinos maturados in vitro

• Autor(a) principal: Schefer, Letícia
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/74/74135/tde-13042021-135617/
• topic: PLIN2; PLIN2; Criopreservação.; Cryopreservation; Lipídios; Lipids; Lipólise; Lipolysis; Natriuretic peptides; Peptídeos natriuréticos; Protoporfirina IX; Protoporphyrin IX

A produção in vitro de embriões (PIV) é uma biotecnologia amplamente utilizada no Brasil e no mundo. No entanto, ainda existem limitações quanto à sua eficiência em comparação com embriões produzidos in vivo. Em bovinos, uma das dificuldades encontradas é o acúmulo lipídico em blastocistos de PIV que diminui a qualidade embrionária e sua resistência à criopreservação. Buscando alternativas para resolver este problema, é necessário compreender do metabolismo lipídico de complexos cumulus-oócitos bovinos (CCOs). A via AMPc/PKA é a via clássica da lipólise celular, porém, foi demonstrada também a atuação da via do GMPc/PKG no metabolismo lipídico. Assim, como CCOs bovinos expressam componentes dessa via, o objetivo do presente estudo foi investigar o envolvimento do GMPc no metabolismo lipídico de CCOs bovinos através da manipulação farmacológica da mesma. No primeiro estudo, divido em três experimentos, foi avaliado o conteúdo lipídico de oócitos e células do cumulus (CC) sob influência de estimuladores de síntese do GMPc (NPPB e Protoporfirina IX) e sob a influência da inibição da PKG (KT5823). Observamos que apenas o NPPB foi capaz de reduzir o conteúdo lipídico dos oócitos e nas células do cumulus. Além disso, avaliamos a expressão de genes relacionados ao metabolismo lipídico (PLIN2), dos receptores de peptídeos natriuréticos (NPRs) e foi realizada a quantificação dos níveis intracelulares de GMPc nos mesmos tratamentos anteriormente utilizados, porém não houve diferença significativa em nenhum dos parâmetros avaliados. Durante todos os experimentos realizados, foram avaliadas as taxas de maturação nuclear dos oócitos e nenhum dos tratamentos utilizados afetou a maturação oocitária. No segundo estudo, dividido em dois experimentos, foram utilizados os mesmos estimuladores de síntese de GMPc (NPPB e Protoporfirina IX) na MIV, sendo avaliados os perfis lipídicos de oócitos e embriões produzidos in vitro. Os perfis de oócitos e embriões bovinos não foram alterados pela manipulação da via GMPc. As taxas de clivagem e blastocisto com NPPB não foram afetadas, porém, no grupo tratado com Protoporfirina IX, as taxas foram zeradas. Em conclusão, sugerimos o envolvimento da via GMPc no metabolismo lipídico de CCOs bovinos e que a manipulação dessa via pode reduzir o conteúdo lipídico dos oócitos sem afetar o perfil lipídico dos oócitos e embriões resultantes.