Comportamento estrutural de PstS e PhoX de Xanthomonas citri subsp. citri na captação de fosfato e sua relação com proteínas quimiotáticas.

• Autor(a) principal: Pucuhuaranga, Cindy Lee Cajachagua
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-17052022-100736/
• topic: Afinidade por fosfato; Captação de fosfato; Dinâmica molecular; Molecular dynamics; Periplasmic-binding protein; Phosphate affinity; Phosphate uptake; Proteínas ligadoras periplasmáticas; Pst system; Sistema Pst

Xanthomonas citri subsp. citri é uma Gammaproteobactéria causadora do cancro cítrico em plantas cítricas, afetando a qualidade dos frutos e causando prejuízos econômicos. Para o controle da doença, esforços têm sido feitos no sentido de compreender sua fisiologia e mecanismos patogênicos. O fosfato é essencial para as bactérias em geral, como para o gênero Xanthomonas uma vez que desempenha papéis importantes no metabolismo celular. Durante as condições de privação de fosfato, um dos sistemas mais importantes responsáveis pela captação deste ânion é o sistema Pst (PstSCAB-PhoU), no qual PstS é a proteína ligadora de fosfato com alta afinidade (phosphate-binding protein, PBP), localizada no periplasma. No caso de X. citri, duas PBPs foram anotadas no seu genoma, PstS e seu parálogo denominado PhoX. Na presente pesquisa, essas duas proteínas, foram estudadas em um nível estrutural por métodos biofísicos. Técnicas como Dicroísmo Circular (CD), Espalhamento de raios-X a baixo ângulo (SAXS), fluorescência dos triptofanos (TSF) e dinâmica molecular (MD) mostraram que PstS e PhoX, apesar de conservadas estrutural e funcionalmente, apresentam diferenças relevantes no seu comportamento em solução, estabilidade e flexibilidade. A afinidade de PhoX para o fosfato foi determinada pela primeira vez e apresenta um Kd de 6.1 &#956M. Adicionalmente, análises de bioinformática mostraram que PhoX e PstS conservam resíduos carregados positivamente com proteínas ligadoras de ânions que podem ter papel importante no processo de transporte do ânion. A relação entre essas duas PBPs e a quimiotaxia em X. citri não foi estabelecida, mas a partir da obtenção de cepas mutantes com deleção única dos genes pstS e phoX poderá ser estudada futuramente na presença e ausência de fosfato.