Efeitos do desmame precoce sobre marcadores relacionados ao crescimento e à inflamação da mucosa gástrica em ratos.

• Autor(a) principal: Silva, Kethleen Mesquita da
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-16072020-114456/
• topic: Células-tronco; Desmame precoce; Early weaning; Gastric mucosa; Inflamação; Inflammation; Metaplasia; Metaplasia; Mucosa gástrica; Stem cells

O desenvolvimento pós-natal da mucosa gástrica do rato caracteriza-se pelo crescimento durante as três primeiras semanas e entre 15 e 21 dias, período que representa o desmame regular, ocorre a diferenciação e maturação das células epiteliais. O desmame é caracterizado por uma fase de transição na qual os filhotes substituem gradualmente a ingestão de leite materno por alimento sólido até por volta do 28º dia. Já o desmame precoce acontece abruptamente no 15º dia, quando os animais são separados fisicamente das mães e a amamentação é substituída por ingestão de ração. Sabe-se que o DP aumenta a proliferação gástrica e acelera a diferenciação celular, porém, se desconhece qualquer efeito inflamatório. Nosso objetivo foi avaliar como o desmame precoce regula diferentes marcadores relacionados ao crescimento e à resposta inflamatória da mucosa gástrica, e observar se há respostas que se mantêm até a vida adulta. No 15º dia, filhotes de ratos Wistar foram divididos em dois grupos: amamentado controle (A) e desmame precoce (DP). Os animais A permaneceram com suas mães e foram amamentados até o 21º dia (desmame no biotério). Já os animais DP foram separados de suas mães e mantidos em outra gaiola, onde a dieta passou a ser uma pasta de ração hidratada. Amostras da mucosa gástrica foram coletadas aos 18, 30 e 60 dias para as análises de expressão gênica, níveis e distribuição proteicos por meio das técnicas de PCRq, Western-Blot e Imuno-histoquímica. Os resultados foram divididos em 5 grupos de acordo com a função do marcador. 1) Fatores de crescimento (TGF&#946, FGF10 e seus receptores): em relação à expressão gênica, o DP diminuiu Tgf &#946 2, Tgf &#946 3 e Fgfr2 aos 18 dias; diminuiu Tgfbr2 e Fgf10 aos 18 e 30 dias; e não alterou Tgf &#946 1 e Tgf &#946 r1 em nenhuma das idades. O DP diminuiu o nível proteico de T&#946RII aos 18 dias; e não modificou a distribuição de células na mucosa gástrica marcadas para FGF10 e FGFR2 aos 60 dias (não obtivemos resultados aos 18 dias) e para SMAD2/3 e SMAD 2P em nenhuma idade. 2) Ciclo celular (CDK2, ciclinaE, p27 e p21): o DP não alterou a expressão de nenhum gene, porém, diminuiu os níveis proteicos de p27 aos 18 dias. 3) Células-tronco (SOX2, TROY e LGR5): em relação à expressão gênica, o DP diminuiu Lgr5 aos 18 dias; aumentou Tnfrsf aos 60 dias; e não alterou Sox2. 4) Inflamação (NFB1, IL1B, IL1A, ILF18, MMP3, MMP9, TNF): em relação à expressão gênica, o DP aumentou Nfkb1 aos 30 e 60 dias; e não alterou Il1b e Mmp9 aos 18 dias; Il1a, Ilf18, Mmp3, Tnf não foram expressos. 5) Células metaplásicas SPEM (MAL2, WFDC2, TACC2 e MCM3): em relação à expressão gênica, o DP diminuiu Wfdc2 aos 18 dias; aumentou Mal2 aos 60 dias; e não alterou Mcm3 e Tacc2. Concluímos que DP controla imediatamente o crescimento gástrico via sinalização por fatores de crescimento e componentes do ciclo celular, sem induzir inflamação, e a regulação de alguns genes na vida adulta poderia predispor a mucosa a lesões.