Hibridação somática entre laranja caipira e limão cravo através de fusão de protoplastos

• Autor(a) principal: Mendes-da-Gloria, Fernanda Januzzi
• Data de Publicação: 1998
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11136/tde-20220207-222637/
• topic: FUSÃO DE PROTOPLASTOS; HIBRIDAÇÃO SOMÁTICA; LARANJA CAIPIRA; LIMÃO CRAVO

Este trabalho teve como objetivo produzir híbrido somático de citros via fusão de protoplastos, a ser utilizado como porta-enxerto de citros. Experimentos preliminares envolveram a indução de calos embriogênicos de sete cultivares de citros a serem utilizados em experimentos de isolamento e fusão de protoplastos de citros. Os cultivares introduzidos foram: tangerinas Cravo e Ponkan (Citrus reticulata Blanco), tangor Murcote (Citrus reticulata Blanco x Citrus sinensis L. Osbeck) e laranjas Serra dágua, Natal, Valência e Pera (Citrus sinensis L. Osbeck). Foram introduzidos 50 nucelos de cada cultivar em três meios de cultura diferentes (EME, 1/2EME e EBA). Calos embriogênicos foram obtidos em todas os cultivares, exceto em laranja Pera, que produziu somente calos duros. Paralelamente ao experimento acima, foi desenvolvido um outro experimento para avaliar o efeito de diferentes fontes de carbono na indução da embriogênese somática de calos obtidos de fusão de protoplastos de laranja Caipira (Citrus sinensis L. Osbeck) + tangerina Cleópatra (Citrus reshni Hort. ex Tanaka), laranja Caipira (C. sinensis) + limão Rugoso da Flórida (Citrus jambhiri Lushington), laranja Pera (Citrus sinensis L. Osbeck) + tangerina Cleópatra (C. reshni) e limão Cravo(Citrus limonia L. Osbeck) + laranja Azeda (Citrus aurantium L.). O meio de cultura básico utilizado foi MT + extrato de malte (500 mg 1-1 adicionado de sacarose (0,145M), lactose (0,145M), maltose (0,145M) ou galactose + sorbitol (0,1M + 0,1M). O açúcar que melhor estimulou a embriogênese somática foi a maltose, seguido pela lactose, galactose + sorbitol e sacarose respectivamente, exceto na combinação laranja Caipira + tangerina Cleópatra, onde a combinação galactose + sorbitol foi o segundo melhor açúcar em vez de lactose. Finalmente, foram realizados experimentos de fusão de protoplastos de laranja Caipira (C. sinensis) + limão Cravo (C. limonia) por via química, utilizando-se solução de polietilenoglicol (PEG). O cultivo dos protoplastos foi feito em meio líquido. Microcalos foram transferidos para EME semi-sólido e a embriogênese somática foi observada após 60 dias de cultivo. A regeneração de plantas se deu em meio de cultura EME + GA3. A confirmação da hibridação somática de 4 das 39 plantas regeneradas foi feita por meio de análise da morfologia foliar, contagem do número de cromossomos e de análise molecular (RAPD).