Purificação simplificada do vírus do enrolamento da folha da batata com triton X-100

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Beriam, Luís Otávio Saggion
Data de Publicação: 1986
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11135/tde-20220207-234844/
Resumo: Várias metodologias foram empregadas para purificação do vírus do enrolamento da folha da batata (Potato Leaf-roll Virus PLRV). Purificações com o emprego de clorofórmio/butanol, polietilenoglicol e Triton X-100 foram efetuadas. A técnica de Triton X-100 se mostrou mais eficiente para purificação do VEFB. Tal técnica consistiu no tratamento de plantas infectadas com uma solução de Triton X-100 a 2.5% em tampão fosfato (KH2PO4) 0,5M pH 7, seguido de um ciclo de centrifugações diferenciais e gradiente de densidade em sacarose. Os precipitados resultantes foram observados ao microscópio eletrônico, revelando a presença de partículas do VEFB. O uso de Triton X-100 abre uma nova perspectiva para a purificação de fitovírus. É importante ressaltar que se trata de purificação do VEFB com o uso exclusivo de Triton X-100, sem o emprego de solventes orgânicos ou quaisquer outras substâncias comumente empregadas no processo de purificação de vírus. Antissoro para o VEFB foi obtido através da técnica de imunização via linfonódulo, apresentando um título de 1:2.
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