Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Tolardo, Aline Lavado
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13042020-135944/
Resumo: Os Alphavirus e Orthobunyavirus são arbovírus importantes que causam grande impacto econômico e social no Brasil. Não existem antivirais disponíveis para o tratamento desses vírus. Portanto, é fundamental ter medicamentos terapêuticos que combatam os sintomas e sinais manifestados pela doença em casos leves e moderados. Neste trabalho, desenvolvemos um ensaio de luminescência baseada em células para a triagem de potenciais pequenas moléculas para os vírus Mayaro e Oropouche que mede o efeito citopático (CPE) induzido pelo vírus em células Vero usando o sistema CellTiter Glo baseado em luminescência. O ensaio foi validado no formato de placa de 384 poços e mostrou valores de Z maiores que 0,7, background maior que 30 e sinal-ruído maior que 10, demonstrando alta capacidade. Quatro bibliotecas de compostos foram testadas na concentração de 10 uM para ambos os testes. Identificamos cinco compostos que inibiram o efeito citopático induzido pelos vírus em > 50%, com valores de EC50/CC50 comparáveis aos determinados por outros ensaios baseados em células, validando assim a precisão e a capacidade do ensaio de servir como uma ferramenta para a descoberta de novos antivirais para os vírus Mayaro e Oropouche.
id USP_5888216be1cf54a68b2bf5207cbd7985
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-13042020-135944
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str 2721
spelling Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e OropoucheResearch on compounds with potential antiviral action for Mayaro and Oropouche virusesAntiviraisAntiviralsArbovirusArbovírusMayaroMayaroOropoucheOropoucheOs Alphavirus e Orthobunyavirus são arbovírus importantes que causam grande impacto econômico e social no Brasil. Não existem antivirais disponíveis para o tratamento desses vírus. Portanto, é fundamental ter medicamentos terapêuticos que combatam os sintomas e sinais manifestados pela doença em casos leves e moderados. Neste trabalho, desenvolvemos um ensaio de luminescência baseada em células para a triagem de potenciais pequenas moléculas para os vírus Mayaro e Oropouche que mede o efeito citopático (CPE) induzido pelo vírus em células Vero usando o sistema CellTiter Glo baseado em luminescência. O ensaio foi validado no formato de placa de 384 poços e mostrou valores de Z maiores que 0,7, background maior que 30 e sinal-ruído maior que 10, demonstrando alta capacidade. Quatro bibliotecas de compostos foram testadas na concentração de 10 uM para ambos os testes. Identificamos cinco compostos que inibiram o efeito citopático induzido pelos vírus em > 50%, com valores de EC50/CC50 comparáveis aos determinados por outros ensaios baseados em células, validando assim a precisão e a capacidade do ensaio de servir como uma ferramenta para a descoberta de novos antivirais para os vírus Mayaro e Oropouche.Alphavirus and Orthobunyavirus are important arboviruses that have a major economic and social impact in Brazil. There are no antivirals available to treat these viruses. Therefore, it is essential to have therapeutic drugs that combat the symptoms and signs manifested by the disease in mild and moderate cases. In this thesis, we developed a cell-based luminescence assay for the screening of potential small molecules for Mayaro and Oropouche viruses that measures the virus-induced cytopathic effect (CPE) in Vero cells (ATCC CCL81) using the luminescence-based CellTiter Glo system. The assay was validated in a 384-well plate format and showed Z values greater than 0.7, background greater than 30 and signal-to-noise greater than 10, demonstrating high capacity. Four compound libraries were tested at a concentration of 10 µM for both tests. We identified five compounds that inhibited virus-induced cytopathic effect by> 50%, with EC50/CC50 values comparable to those determined by other cell-based assays, thus validating the assay\'s accuracy and ability to serve as a tool for discovery of new antivirals for Mayaro and Oropouche viruses.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPFigueiredo, Luiz Tadeu MoraesTolardo, Aline Lavado2020-01-13info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13042020-135944/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2020-05-05T17:43:01Zoai:teses.usp.br:tde-13042020-135944Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212020-05-05T17:43:01Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
Research on compounds with potential antiviral action for Mayaro and Oropouche viruses
title Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
spellingShingle Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
Tolardo, Aline Lavado
Antivirais
Antivirals
Arbovirus
Arbovírus
Mayaro
Mayaro
Oropouche
Oropouche
title_short Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
title_full Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
title_fullStr Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
title_full_unstemmed Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
title_sort Pesquisa de compostos com potencial ação antiviral para os vírus Mayaro e Oropouche
author Tolardo, Aline Lavado
author_facet Tolardo, Aline Lavado
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Figueiredo, Luiz Tadeu Moraes
dc.contributor.author.fl_str_mv Tolardo, Aline Lavado
dc.subject.por.fl_str_mv Antivirais
Antivirals
Arbovirus
Arbovírus
Mayaro
Mayaro
Oropouche
Oropouche
topic Antivirais
Antivirals
Arbovirus
Arbovírus
Mayaro
Mayaro
Oropouche
Oropouche
description Os Alphavirus e Orthobunyavirus são arbovírus importantes que causam grande impacto econômico e social no Brasil. Não existem antivirais disponíveis para o tratamento desses vírus. Portanto, é fundamental ter medicamentos terapêuticos que combatam os sintomas e sinais manifestados pela doença em casos leves e moderados. Neste trabalho, desenvolvemos um ensaio de luminescência baseada em células para a triagem de potenciais pequenas moléculas para os vírus Mayaro e Oropouche que mede o efeito citopático (CPE) induzido pelo vírus em células Vero usando o sistema CellTiter Glo baseado em luminescência. O ensaio foi validado no formato de placa de 384 poços e mostrou valores de Z maiores que 0,7, background maior que 30 e sinal-ruído maior que 10, demonstrando alta capacidade. Quatro bibliotecas de compostos foram testadas na concentração de 10 uM para ambos os testes. Identificamos cinco compostos que inibiram o efeito citopático induzido pelos vírus em > 50%, com valores de EC50/CC50 comparáveis aos determinados por outros ensaios baseados em células, validando assim a precisão e a capacidade do ensaio de servir como uma ferramenta para a descoberta de novos antivirais para os vírus Mayaro e Oropouche.
publishDate 2020
dc.date.none.fl_str_mv 2020-01-13
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13042020-135944/
url http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-13042020-135944/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1815257007689564160