Desenvolvimento e validação de métodos analíticos eletroforéticos e cromatográficos para determinação de fármacos para o tratamento do diabetes tipo 2

• Autor(a) principal: Agostinho, Octavio Valentin Lourenço
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9139/tde-09062022-114122/
• topic: Capillary electrophoresis; Cloridrato de metformina; Cromatografia líquida de alta eficiência; Diabetes; Diabetes; Eletroforese capilar; High performance liquid chromatography; Metformin hydrochloride; Nateglinida; Nateglinide

O diabetes é uma doença presente na população com altos índices de prevalência, onde o tipo 2 tem o maior percentual, e há tratamentos amplamente disponíveis na terapia medicamentosa, a qual existem muitos medicamentos. Para que os medicamentos indicados nesta terapia sejam eficazes, são necessários estudos para o desenvolvimento de métodos analíticos capazes de detectar e quantificar estes fármacos na presença de seus produtos de degradação e outros interferentes como os excipientes de sua formulação. Nesta pesquisa, foram desenvolvidos métodos analíticos utilizando as técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese capilar (CE) para detecção e quantificação simultânea dos fármacos, metformina (Mf) e a nateglinida (Ng), que são utilizados em associação para o diabetes tipo 2. As metodologias analíticas de cromatografia líquida em microemulsão (MELC) e HPLC-HILIC foram desenvolvidas e validadas seguindo os critérios exigidos. Para os métodos desenvolvidos por MELC e HPLC-HILIC foram utilizadas as fases estacionárias, respectivamente, C18 (ACE 150 mm x 4,6 mm 5 µm) e InfinityLab Poroshell 120 (HILIC 100 mm x 2,1 mm 2,7 µm) e para CE a coluna capilar de 60 cm x 75 µm de d.i. Os métodos propostos foram lineares com coeficientes de determinação (R2) acima de 0,99, a precisão (intra e inter-dia) DPR 2,0%, a exatidão em termos de porcentagem de recuperação esteve dentro da faixa de 98% a 102%, para ambos os métodos, obteve-se robustez próximo de 1,0 e recuperações 100% ± 2%, o limite de detecção (LD) e limite de quantificação (LQ) do método por HPLC foi, respectivamente, Mf (0,001 µg.mL-1 e 0,003 µg.mL-1) e Ng (0,002 µg.mL-1 e 0,006 µg.mL-1) e do método por CE foi Mf (0,010 µg.mL-1 e 0,033 µg.mL-1) e Ng (0,026 µg.mL-1 e 0,086 µg.mL-1). Os fármacos foram detectados e o tempo de corrida de todos os métodos foi aproximadamente 10 minutos. As metodologias desenvolvidas foram desafiadas para demonstrar a seletividade dos métodos com degradação forçada em meio ácido, básico e hidrólise, que obtiveram produtos de degradação nos meios ácido e básico para HPLC e CE. Assim de acordo com os critérios estabelecidos pela agência nacional de vigilância sanitária (ANVISA), todos os métodos foram validados conforme a RDC 166/17, e são seletivos, lineares, precisos, exatos e robustos. Os métodos HPLC e CE propostos podem ser aplicados nas análises de rotina na indústria farmacêutica.