Características da ação dos oxisteróis 7-ketocholesterol e colestane-3,5,6-triol nas proteínas transportadoras ABCs e LRP das células-tronco mesenquimais derivadas de medula óssea de pacientes com leucemia mieloide aguda

• Autor(a) principal: Reichert, Cadiele Oliana
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5167/tde-15062023-142020/
• topic: 7-cetocolesterol; 7-Ketocholesterol; ABC proteins; Bone marrow; Células-tronco mesenquimais; Fenótipos; Leucemia; Leukemia; Medula óssea; Mesenchymal stem cells; Oxisteróis; Oxysterols; Phenotypes; Proteínas ABCs

As proteínas ABCs e LRP (Lung resistance-related protein) fazem o transporte de lipídios e de xenobióticos, e estão associadas ao fenótipo de resistência a múltiplas drogas. As células-tronco mesenquimais (CTM) são células multipotentes presentes na medula óssea e fazem parte do nicho hematopoiético. Alterações fenotípicas em CTMs estão relacionadas a progressão da leucemia mieloide aguda (LMA). Os oxisteróis, 7-KC e Triol, são derivados do colesterol; e apresentam funções na sinalização, proliferação e morte celular. Sendo assim, este estudo avaliou a ação do 7-KC (30 M, 50 M e 70 M) e de Triol (20 M, 30 M e 40 M) nas proteínas ABC-A1, ABC-D4, ABC-G1, ABC-G2 e LRP e, em suas respectivas vias de modulação, LXR-/ e Sonic Hedgehog (SHh), das CTM derivadas de medula óssea de pacientes com LMA (CTM-D), sendo utilizado como controle CTM de indivíduos saudáveis (CTM-S). Primeiro, foi observado que a quantidade de LRP, ABC-A1 e do receptor LXR- diminuíram em CTM-D, enquanto houve aumento de glutationa oxidada e das proteínas relacionadas a resistência a apoptose, a proliferação e invasão celular: a survivina, o receptor SHh, a proteína SMO, Gli3 e do CD147 correceptor da proteína ABC-G2 respectivamente. Em seguida, após o tratamento com 7-KC por 24 horas, foi observado que em CTM-S ocorreu aumento de ABC-A1 na concentração de 30 M, e translocação da proteína SMO para o núcleo; com 70 M de 7-KC foi observado aumento de survivina, de glutationa oxidada e diminuição da proteína LRP. Esses efeitos não foram observados em CTM-D tratadas com 7-KC. Em ambas as linhagens, foi observado, que em nível molecular, o tratamento com 7-KC apresentou efeito no processo de fusão e fissão mitocondrial. O tratamento com Triol por 24 horas, diminuiu a quantidade de ABC-A1 e de seu modulador, o receptor LXR- em CTM-S. Esses resultados foram associados ao aumento da proteína SMO e, de sua translocação para o núcleo na contração de 20 M. Esse efeito não foi observado em CTM-D. Em ambas as linhagens tratadas com Triol ocorreu aumento de glutationa oxidada e diminuição de glutationa reduzida. Além disso, foi observado, em nível molecular, inversão no processo metabólico de fusão e fissão mitocondrial, enquanto em CTM-S houve aumento na expressão de genes relacionados fusão, em CTM-D houve aumento dos genes relacionados a fissão. Em CTM-D tratadas com Triol, foi observado aumento de ABC-D4 no citoplasma; e aumento de LRP apenas na concentração de 20 M de Triol, seguida de diminuição nas concentrações de 30 M e 40 M de Triol. Esses efeitos não foram observados em CTM-S. O tratamento com 40 M de Triol aumentou a quantidade de CD147 em CTM-D e diminuiu em CTM-S. Aqui, foi encontrado a proteína ABC-D4 presente no citoplasma e no núcleo das CTMs. Em suma, as linhagens CTM-S e CTM-D são diferentes fisiologicamente. E, nas mesmas concentrações utilizadas de 7-KC e de Triol em CTMs foi observado efeito diferente, e em partes, oposto sendo que essa diferença é decorrente da origem das células. Além disso, nossos resultados são característicos da ação metabólica citotóxica dos oxisteróis 7-KC e Triol nas CTMs