Enfezamentos do milho: incidência do fitoplasma e espiroplasma, dinâmica populacional, expressão de sintomas e caracterização molecular do fitoplasma com base no gene SecY

• Autor(a) principal: Galvão, Sarah Rodrigues
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11135/tde-06032020-102732/
• topic: Corn stunt; Enfezamento pálido; Enfezamento vermelho; Identificação molecular; Infecção mista; Maize bushy stunt; Mixed infection; Molecular identification; Mollicutes

No Brasil, os enfezamentos vermelho e pálido são, presentemente, as principais doenças da cultura do milho, por causarem danos significativos na produção de grãos e sementes. A intensidade de ocorrência destas doenças se agravou a partir da década de 1980, com a implementação dos plantios da segunda safra do milho, também conhecida por \"safrinha\". Nos últimos anos, grandes surtos da doença têm sido relatados nas principais regiões produtoras do país, mostrando que o patossistema ainda exige muito empenho da pesquisa, além do conhecimento até agora gerado. Buscando contribuir para melhor entendimento das relações entre o hospedeiro e os patógenos envolvidos com ambas as formas de enfezamentos, foi conduzido o presente estudo, com os seguintes objetivos: i- verificar a incidência isolada e simultânea do fitoplasma e do espiroplasma em diversas localidades situadas em distintas regiões brasileiras; ii- analisar a dinâmica populacional de ambos os patógenos na colonização do hospedeiro e sua relação com a expressão de sintomas; iii- avaliar a diversidade do fitoplasma, utilizando o promissor gene marcador denominado SecY. Para análises da incidência dos patógenos, foram realizadas coletas de amostras de plantas sintomáticas em diferentes regiões geográficas brasileiras e as mesmas foram submetidas a reações de PCR multiplex. Resultados mostraram maior frequência de ocorrência do espiroplasma em relação ao fitoplasma, nas áreas geográficas mais quentes. Em condições de campo, foi evidenciado um relevante aumento na incidência de plantas doentes causada pela infecção simultânea de ambos os patógenos, em comparação com relatos feitos em anos anteriores. No ensaio realizado com inoculação simultânea do fitoplasma e espiroplasma por meio do inseto vetor D. maidis e posterior análise com PCR em tempo real, foi possível observar que o espiroplasma ocorreu em maior concentração nas plantas inoculadas simultaneamente por estes patógenos. Com base na expressão dos sintomas, foi observado que, embora tenha ocorrido predominância do espiroplasma, a maioria das plantas experimentalmente submetidas à infecção mista apresentaram avermelhamento foliar, um sintoma típico de infecção por fitoplasma. A caracterização molecular do fitoplasma do milho realizada a partir de clonagem, sequenciamento, análise virtual de RFLP e análise filogenética revelou ausência de diversidade genética do fitoplasma encontrado nas amostras coletadas, em relação à análise do gene 16S rRNA, sendo este fitoplasma classificado como afiliado ao subgrupo 16SrI-B. Análises conduzidas com o gene SecY, permitiram identificar maior variabilidade, sendo o fitoplasma classificado como pertencente ao subgrupo secY(I)-L. O presente trabalho traz sua colaboração no sentido de melhor entendimento sobre este patossistema, sendo que seus resultados atualizam aspectos relacionados à incidência isolada ou simultânea destes patógenos no campo, à colonização do hospedeiro e à identificação molecular baseada em um novo gene marcador.