Efeito da ingestão de suco de uva sobre a expressão de microRNA no plasma e em células mononucleares em mulheres com sobrepeso

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Quintanilha, Bruna Jardim
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6138/tde-22112022-135632/
Resumo: Introdução: O padrão da dieta ocidental, caracterizado pela ingestão elevada de açúcares e lipídios, está relacionado à gênese da inflamação metabólica, a qual é caracterizada por um quadro de inflamação crônica, sistêmica e de baixa intensidade. A inflamação metabólica contribui para o desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT), as quais representam a principal causa de morte no mundo. Por outro lado, a ingestão de uma dieta saudável, rica em frutas e hortaliças, é relevante para a redução do risco das DCNT. Nesse contexto, destaca-se o suco de uva, bebida rica em compostos bioativos, que possui potencial efeito anti-inflamatório. Estudos recentes sugerem que nutrientes e compostos bioativos dos alimentos possam atenuar a inflamação por meio da modulação da expressão de microRNA, os quais representam novos biomarcadores inflamatórios, contribuindo para a identificação do risco de desenvolvimento de doenças cardiometabólicas. Objetivo: Investigar o efeito da ingestão de suco de uva integral sobre a expressão de microRNA no plasma e em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e sua relação com a resposta inflamatória. Métodos: Estudo intervencional, no qual, durante quatro semanas, as voluntárias ingeriram 500 mL diários de suco de uva integral, com coletas de sangue no momento basal, 2 e 4 semanas após o início da ingestão da bebida. A população do estudo foi composta por mulheres saudáveis (n = 20), com idade entre 18 e 40 anos e índice de massa corpórea classificado como sobrepeso (25,0 - 29,9 kg/m2). Foram avaliados o perfil lipídico, o hemograma e as concentrações plasmáticas de glicose, insulina, leptina, adiponectina, lipopolissacarídeos e seus ligantes plasmáticos LBP e sCD14 e biomarcadores inflamatórios (IL-10, IL-6, TNF-α, proteína C reativa, MCP-1, VCAM-1 e ICAM-1), bem como a concentração dos principais compostos bioativos presentes no suco de uva. Dois painéis de microRNA, sendo um plasmático e outro de PBMC, de 8 indivíduos foram avaliados, em todos os tempos, pelo ensaio de PCR em tempo real. Posteriormente, foram selecionados os microRNA relacionados à resposta inflamatória e à endotoxemia metabólica, os quais foram avaliados no restante das voluntárias. As proteínas-alvo dos microRNA em PBMC foram analisadas por Western Blotting. O consumo alimentar foi avaliado pela análise de três recordatórios de 24 horas coletados em todos os tempos experimentais. Resultados: A ingestão de suco de uva, após 4 semanas de intervenção, em PBMC, promoveu redução da expressão gênica do TNF-α, IL-6 e das subunidades p50 e p65, as quais compõem o fator de transcrição NF-kB. Em relação ao conteúdo de proteínas nestas células, houve apenas diminuição da fosforilação da TAK-1 em relação ao seu conteúdo total. Dentre os miRNA analisados, o miR-144-5p e o miR-144-3p tiveram a sua expressão aumentada no plasma e em PBMC, respectivamente. A concentração plasmática de sICAM-1 reduziu significativamente na semana 4 em relação a semana 2, enquanto, a concentração plasmática de gama glutamil transferase aumentou significativamente na última semana. As voluntárias apresentaram menor pressão arterial diastólica no final do estudo em relação ao momento basal. Conclusão: A ingestão do suco de uva, após 4 semanas de intervenção, influenciou a concentração de biomarcadores relacionados ao processo inflamatório mediado pela via do fator de transcrição NF-kB em mulheres com sobrepeso.
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spelling Efeito da ingestão de suco de uva sobre a expressão de microRNA no plasma e em células mononucleares em mulheres com sobrepesoEffect of grape juice ingestion on microRNA expression in plasma and mononuclear cells in overweight womenBioactive CompoundsCompostos BioativosEndotoxemiaEndotoxemiaGrape JuiceInflamaçãoInflammationMicroRNAMicroRNASuco de UvaIntrodução: O padrão da dieta ocidental, caracterizado pela ingestão elevada de açúcares e lipídios, está relacionado à gênese da inflamação metabólica, a qual é caracterizada por um quadro de inflamação crônica, sistêmica e de baixa intensidade. A inflamação metabólica contribui para o desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis (DCNT), as quais representam a principal causa de morte no mundo. Por outro lado, a ingestão de uma dieta saudável, rica em frutas e hortaliças, é relevante para a redução do risco das DCNT. Nesse contexto, destaca-se o suco de uva, bebida rica em compostos bioativos, que possui potencial efeito anti-inflamatório. Estudos recentes sugerem que nutrientes e compostos bioativos dos alimentos possam atenuar a inflamação por meio da modulação da expressão de microRNA, os quais representam novos biomarcadores inflamatórios, contribuindo para a identificação do risco de desenvolvimento de doenças cardiometabólicas. Objetivo: Investigar o efeito da ingestão de suco de uva integral sobre a expressão de microRNA no plasma e em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) e sua relação com a resposta inflamatória. Métodos: Estudo intervencional, no qual, durante quatro semanas, as voluntárias ingeriram 500 mL diários de suco de uva integral, com coletas de sangue no momento basal, 2 e 4 semanas após o início da ingestão da bebida. A população do estudo foi composta por mulheres saudáveis (n = 20), com idade entre 18 e 40 anos e índice de massa corpórea classificado como sobrepeso (25,0 - 29,9 kg/m2). Foram avaliados o perfil lipídico, o hemograma e as concentrações plasmáticas de glicose, insulina, leptina, adiponectina, lipopolissacarídeos e seus ligantes plasmáticos LBP e sCD14 e biomarcadores inflamatórios (IL-10, IL-6, TNF-α, proteína C reativa, MCP-1, VCAM-1 e ICAM-1), bem como a concentração dos principais compostos bioativos presentes no suco de uva. Dois painéis de microRNA, sendo um plasmático e outro de PBMC, de 8 indivíduos foram avaliados, em todos os tempos, pelo ensaio de PCR em tempo real. Posteriormente, foram selecionados os microRNA relacionados à resposta inflamatória e à endotoxemia metabólica, os quais foram avaliados no restante das voluntárias. As proteínas-alvo dos microRNA em PBMC foram analisadas por Western Blotting. O consumo alimentar foi avaliado pela análise de três recordatórios de 24 horas coletados em todos os tempos experimentais. Resultados: A ingestão de suco de uva, após 4 semanas de intervenção, em PBMC, promoveu redução da expressão gênica do TNF-α, IL-6 e das subunidades p50 e p65, as quais compõem o fator de transcrição NF-kB. Em relação ao conteúdo de proteínas nestas células, houve apenas diminuição da fosforilação da TAK-1 em relação ao seu conteúdo total. Dentre os miRNA analisados, o miR-144-5p e o miR-144-3p tiveram a sua expressão aumentada no plasma e em PBMC, respectivamente. A concentração plasmática de sICAM-1 reduziu significativamente na semana 4 em relação a semana 2, enquanto, a concentração plasmática de gama glutamil transferase aumentou significativamente na última semana. As voluntárias apresentaram menor pressão arterial diastólica no final do estudo em relação ao momento basal. Conclusão: A ingestão do suco de uva, após 4 semanas de intervenção, influenciou a concentração de biomarcadores relacionados ao processo inflamatório mediado pela via do fator de transcrição NF-kB em mulheres com sobrepeso.Introduction: The Western diet pattern, characterized by excessive ingestion of sugars and lipids, is related to the genesis of metabolic inflammation, which is characterized by a condition of a chronic, systemic, and low-grade inflammation. Metabolic inflammation contributes to the development of chronic non-communicable diseases (NCDs), the leading cause of death in the world. On the other hand, the adoption of a healthy diet rich in fruits and vegetables is relevant to reduce the risk of NCDs. Grape juice is a beverage rich in bioactive compounds which have a potential anti-inflammatory effect. Recent studies suggest that nutrients can modulate inflammation through microRNAs action, which have been highlighted because they are new inflammatory biomarkers, contributing to the identification of the risk of cardiometabolics diseases. Objective: Investigate the effect of the grape juice ingestion on microRNA expression in plasma and peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and its relationship with the development of the inflammatory process. Methods: Interventional study, in which, for four weeks, the volunteers ingested 500 mL of whole grape juice daily, with blood drawn at baseline, 2 and 4 weeks after the intake. The study population consisted of healthy women (n = 20), aged between 18 and 40 years and body mass index classified as overweight (25.0 - 29.9 kg/m2). The lipid profile, blood count and plasma concentrations of glucose, insulin, leptin, adiponectin, lipopolysaccharides, and their plasma ligands LBP and sCD14 and inflammatory biomarkers (IL-10, IL-6, TNF-α, C-reactive protein, MCP-1, VCAM-1 and ICAM-1) were evaluated, as well as the concentration of the main bioactive compounds present in grape juice. Two microRNA panels, one plasma and the other PBMC, from 8 individuals were evaluated, at all times, by real-time PCR. Subsequently, microRNAs related to the inflammatory response and metabolic endotoxemia were selected, which were evaluated in the rest of the volunteers. MicroRNA target proteins in PBMC were analyzed by Western Blotting. Food consumption was assessed by analyzing three 24-hour recalls collected at all experimental times. Results: The intake of grape juice, after 4 weeks of intervention, in PBMC, promoted a reduction in gene expression of TNF-α, IL-6 and p50 and p65 subunits, which composes the NF-kB transcription factor. Regarding the protein content in these cells, there was only a decrease in TAK-1 phosphorylation in relation to its total content. Among the analyzed miRNAs, miR-144-5p and miR-144-3p had their expression increased in plasma and in PBMC, respectively. The plasma concentration of sICAM-1 significantly reduced in week 4 compared to week 2, while the plasma concentration of gamma glutamyl transferase increased significantly in the last week. The volunteers had lower diastolic blood pressure at the end of the study compared to baseline. Conclusion: The intake of grape juice after 4 weeks of intervention influenced the concentration of biomarkers related to the inflammatory process mediated by the transcription factor NF-kB pathway in overweight women.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPRogero, Marcelo MacedoQuintanilha, Bruna Jardim2022-02-07info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/6/6138/tde-22112022-135632/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2022-11-22T16:02:06Zoai:teses.usp.br:tde-22112022-135632Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212022-11-22T16:02:06Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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