Validação de métodos de colheita e avaliação espermática em raias do gênero Potamotrygon

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Padilha, Fabiana Lucia André
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-28082020-081514/
Resumo: As raias da família Potamotrygonidae vivem exclusivamente na água doce, estão distribuídas em diversas bacias hidrográficas da América do Sul. A agressão sofrida pelo meio ambiente nos últimos anos, em especial os ambientes aquáticos, vem afetando diretamente as populações de espécies nativas de peixes. Devido a ação antrópica, algumas espécies do gênero Potamotrygon encontram-se ameaçadas de extinção, razão esta que nos motiva a realizar estudos que envolvam o conhecimento da reprodução em cativeiro. Utilizamos 6 exemplares machos, adultos de Potamotrygon falkneri, mantidos sob os cuidados do Aquário de São Paulo, Brasil. Os animais foram divididos em dois grupos (A e B) que se alternaram, com intervalo de 50 dias, para a realização de dois protocolos de colheita de sêmen distintos: através de contenção física (rede de contenção) e química (3mg/kg de propofol diretamente nas brânquias). Após o posicionamento do animal em espuma umedecida, com a parte ventral para cima, foi realizada uma massagem manual na região das ampolas dos ductos deferentes. Um tubo coletor foi posicionado na abertura da cloaca para a colheita do sêmen. A avaliação espermática foi realizada em tempo 0 e após 5 horas no Computer Assisted Sperm Analysis (CASA), além dos testes de integridade de membrana e atividade citoquímica mitocondrial. Os parâmetros avaliados para contenção física e química foram volume (4.76 mL ± 0.95 vs. 3.41 mL ± 0.95), concentração (929.50 spz x 106/mL ± 70.97 vs. 1,071.67 spz x 106/mL ± 108.82), vigor (0-5 escala; 2.34 ± 0.17 vs. 2.83 ± 0.16), motilidade total no tempo 0, logo após a coleta (57.50% ± 6.55 vs. 62.50% ± 5.28). Após 5 horas de colheita o resultado foi para motilidade total 51.83% ± 7.12 vs. 53.67% ± 6.12; motilidade progressiva 13.67% ± 1.71 vs. 10.67% ± 1.12, células rápidas 25.17% ± 2.68 vs. 25.17% ± 2.68 e células estáticas 28.17% ± 4.41 vs. 24.84% ± 5.58. Não houve diferença estatística entre as formas de contenção para qualquer parâmetro avaliado. Os testes de viabilidade de membrana se mostraram eficiente, pois houve uma progressão linear com valor de P < 0,0001. Estes resultados nos permitem concluir que a massagem manual é um método efetivo de colheita de sêmen em raias e devida a similaridade de informações encontradas na avaliação espermática entre os dois protocolos testados, a contenção física pode ser um método de eleição, visto que é de manejo mais rápido e isenta o animal do risco da anestesia. Sendo assim, estas informações são de extrema relevância para futuras biotécnicas reprodutivas que possam ser desenvolvidas com Potamotrygon.
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Os animais foram divididos em dois grupos (A e B) que se alternaram, com intervalo de 50 dias, para a realização de dois protocolos de colheita de sêmen distintos: através de contenção física (rede de contenção) e química (3mg/kg de propofol diretamente nas brânquias). Após o posicionamento do animal em espuma umedecida, com a parte ventral para cima, foi realizada uma massagem manual na região das ampolas dos ductos deferentes. Um tubo coletor foi posicionado na abertura da cloaca para a colheita do sêmen. A avaliação espermática foi realizada em tempo 0 e após 5 horas no Computer Assisted Sperm Analysis (CASA), além dos testes de integridade de membrana e atividade citoquímica mitocondrial. Os parâmetros avaliados para contenção física e química foram volume (4.76 mL ± 0.95 vs. 3.41 mL ± 0.95), concentração (929.50 spz x 106/mL ± 70.97 vs. 1,071.67 spz x 106/mL ± 108.82), vigor (0-5 escala; 2.34 ± 0.17 vs. 2.83 ± 0.16), motilidade total no tempo 0, logo após a coleta (57.50% ± 6.55 vs. 62.50% ± 5.28). Após 5 horas de colheita o resultado foi para motilidade total 51.83% ± 7.12 vs. 53.67% ± 6.12; motilidade progressiva 13.67% ± 1.71 vs. 10.67% ± 1.12, células rápidas 25.17% ± 2.68 vs. 25.17% ± 2.68 e células estáticas 28.17% ± 4.41 vs. 24.84% ± 5.58. Não houve diferença estatística entre as formas de contenção para qualquer parâmetro avaliado. Os testes de viabilidade de membrana se mostraram eficiente, pois houve uma progressão linear com valor de P < 0,0001. Estes resultados nos permitem concluir que a massagem manual é um método efetivo de colheita de sêmen em raias e devida a similaridade de informações encontradas na avaliação espermática entre os dois protocolos testados, a contenção física pode ser um método de eleição, visto que é de manejo mais rápido e isenta o animal do risco da anestesia. Sendo assim, estas informações são de extrema relevância para futuras biotécnicas reprodutivas que possam ser desenvolvidas com Potamotrygon.The Potamotrygon of the Potamotrygonidae family is a freshwater stingray, native to, and distributed throughout the South American watersheds. The aggression suffered by the environment in recent years, in special aquatic environments, directly affects native fish species. Due to anthropic actions, some species of the genus Potamotrygon are threatened with extinction, encouraging a study on captive breeding procedures. For this purpose, six Potamotrygon falkneri adult males, kept under the care of the São Paulo Aquarium, Brazil, were divided into groups to compare two distinct semen collection protocols: (A) physical restraint (net), and (B) chemical restraint (3mg / kg propofol, directly into the gills). The protocols were alternated between the two groups in a 30-day interval. After positioning the animal on a moistened foam in dorsal recumbency, semen collection was performed by placing a collecting tube at the cloaca opening, while performing a gentle massage of the vas deferens. Sperm evaluation was performed at the moment of the collection (time 0) and 5 hours post-collection using computer-assisted sperm analysis (CASA), in addition to the tests of membrane integrity and mitochondrial cytochemical activity. Parameters evaluated (presented in mean ± standard error of the mean) were: volume (in mL; A: 4.76 ± 0.95; B: 3.41 ± 0.95); concentration (in 106/mL; A: 929.50 ± 70.97; B: 1.071.67 ± 108.82); vigor (scale 0 to 5; A: 2.34 ± 0.17; B: 2.83 ± 0.16); total motility at time 0 (in %; A: 57.50 ± 6.55; B: 62.50% ± 5.28); total motility (51.83% ± 7.12 vs. 53.67% ± 6.12) and progressive motility (in %; A: 13.67 ± 1.71; B: 10.67 ± 1.12) after five hours. There was no statistical difference between the forms of restraints examined for any parameter evaluated. For the membrane viability tests, they proved to be efficient because there was a linear progression with a value of P<0.0001 for both. The results suggest that physical restraint and manual massage is an effective method of harvesting semen in stingrays and should be considered the first choice of management, as it not only demonstrated to be a faster procedure but more importantly, eliminated anesthetic-associated risks for the animal. Thus, this information is considered extremely relevant for the development of future reproductive biotechniques with Potamotrygon.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPPizzutto, Cristiane SchilbachPadilha, Fabiana Lucia André2020-02-14info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10131/tde-28082020-081514/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2022-10-08T12:58:06Zoai:teses.usp.br:tde-28082020-081514Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212022-10-08T12:58:06Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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