Avaliação do perfil dos inflamassomas nas lesões cutâneas de dermatite atópica no adulto

• Autor(a) principal: Alves, Yasmim Álefe Leuzzi
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5133/tde-20082024-153205/
• topic: Atopic dermatitis; Dermatite atópica; Gasdermin-D; Gasdermina-D; Inflamassoma; Inflammasome; Interleucina-1beta; Interleukin-1; Keratinocytes; Macrófagos; Macrophages; Queratinócitos

INTRODUÇÃO: A dermatite atópica (DA) é uma enfermidade cutânea inflamatória de caráter crônico, recidivante, que cursa com prurido intenso e xerose. A etiopatogenia da DA é multifatorial, envolvendo fatores genéticos, ambientais e imunológicos, dentre outros, além da colonização cutânea crônica pelo Staphylococcus aureus (S. aureus) em 80-100% dos pacientes. Para compreender o status inflamatório na DA, é crucial a investigação do complexo de inflamassoma que são receptores de reconhecimentos de padrão (PRR) citosólicos, e sua ativação culmina na produção das citocinas interleucina (IL)-1 e IL-18 e ativação da caspase-1 e gasdermina-D (GSDMD). Alterações na expressão do gene NLRP1 e o comprometimento da expressão do NLRP3 foram associados à gravidade da DA, e podem explicar parcialmente como a pele colonizada pelo S. aureus pode contribuir para a inflamação crônica na DA. OBJETIVOS: Avaliar o perfil da expressão dos componentes do complexo inflamassoma nas lesões de pele de adultos com DA. MÉTODOS: Foram selecionados 30 pacientes adultos com DA (10 moderadas e 20 graves) um grupo controle (CTL) com 20 indivíduos adultos. A gravidade de DA foi determinada pelo escore EASI (Eczema Area and Severity Index). Os métodos utilizados foram conduzidos de maneira específica em fragmentos de pele, compreendendo: 1) Imuno-histoquímica (IHQ): a) análise da expressão dos componentes do inflamassoma NLRP1, NLRP3, AIM-2, IL-1, IL-18 e caspase-1, e de ASC e GSDMD; b) análise da expressão de CD68 (marcador de macrófagos); 2) Imunofluorescência (IF): avaliação da expressão dos inflamassomas NLRP1, NLRP3, caspase-1 e IL-1 e da expressão simultânea de células CD68 e IL-1 e/ou GSDMD; 3) PCR quantitativo em tempo real (qPCR): análise da expressão dos transcritos NLRP3, NLRP1, AIM2, IL18, IL1B e caspase-1. RESULTADOS: Para caracterização da expressão proteica por Imuno-histoquímica (IHQ) foi evidenciado 1) aumento na expressão de NLRP3 na derme de pacientes com DA comparado com CTL e correlação entre expressão dérmica de NLRP3 com EASI e níveis séricos de IgE; 2) aumento da expressão de NLRP1 e AIM-2 na derme de pacientes DA grave em relação ao CTL; 3) aumento da expressão de IL-18 e IL-1 tanto na epiderme do grupo DA grave, comparado ao CTL e ao grupo com DA moderada, quanto na derme do grupo DA e grave, comparados com CTL, bem como correlação entre expressão epidérmica de IL-1 e EASI; 4) aumento da expressão de ASC na epiderme e derme de pacientes com DA moderada e grave em relação ao CTL; 5) aumento da expressão de caspase-1 no grupo DA grave comparado com CTL tanto na epiderme e na derme, e correlação entre expressão de caspase-1 e EASI; 6) aumento da expressão da GSDMD na epiderme de pacientes DA grave comparada com DA moderada e na derme aumento da expressão no grupo DA grave comparado com DA moderada e CTL. Na avaliação por Imunofluorescência para identificar o subtipo de células que contribuem na produção de IL-1 foi observada presença de macrófagos CD68+ secretores de IL-1 no grupo DA moderada e grave. Em contraste, a avaliação de transcritos por qPCR: a expressão de RNAm dos componentes do inflamassoma mostrou-se diminuída em pacientes com DA moderada/grave comparados com grupo CTL. CONCLUSÕES: A análise dos componentes do complexo inflamassoma evidenciou um desequilíbrio em sua regulação, com aumento da expressão de todos os componentes estudados, principalmente na DA grave, destacando sua relevância como potenciais biomarcadores da doença e possíveis alvos para intervenções imunomoduladoras