Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2021 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
Texto Completo: | https://doi.org/10.11606/T.23.2021.tde-27102021-181959 |
Resumo: | Reabsorções internas das paredes dentinárias levantam dúvidas sobre a origem de células clásticas na polpa dentária em casos idiopáticos. Estudos recentes sugeriram que as células MDPC-23 (odontoblast-like) podem se diferenciar em células clásticas, contrariando estudos anteriores. O presente estudo teve como objetivo observar a influência do calcitriol (1,25-dihidroxivitamina D3) e do lipopolissacarídeo (LPS) na indução da diferenciação de células MDPC-23 (semelhantes a odontoblastos) em células semelhantes a clastos. Como as células MDPC-23 têm origem ectomesenquimal e células clásticas possuem origem hematopoiética, o estudo foi proposto para comparar, in vitro, o potencial clastogênico de dois modelos de origem embrionárias distintas frente a diferentes estímulos. Dois grupos, MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos, foram cultivados e tratados com LPS ou 1,25-dihidroxivitamina D3 (calcitriol). No sexto dia, o ensaio de metiltiazolil-tetrazólio (MTT) foi realizado para observar a viabilidade celular diante dos tratamentos. Em seguida, o ensaio citoquímico foi executado para identificar células positivas para TRAP. Adicionalmente foi feito estudo da expressão gênica dos marcadores da clastogênese, OPG, RANK, RANKL, Csf1r, M-Csf1 e catepsina K, através da PCRq. No ensaio de MTT, a viabilidade celular não foi alterada com os tratamentos em comparação com os subgrupos controle. Células TRAP positivas estavam presentes apenas nos subgrupos medula óssea, induzidos com LPS ou calcitriol. O grupo medula óssea apresentou amplificação para todos os genes alvos mencionados. Já para os subgrupos do grupo MDPC-23 apresentaram expressão gênica significativa, diante dos tratamentos, apenas para os genes Csf1r e catepsina K. Concluiu-se, portanto, que embora apresente expressão relativa para os genes Csf1r e catepsina K, sob tratamento, as células MDPC-23 não foram capazes de se diferenciar em células clásticas. |
id |
USP_b00739146ff387532adea339c9e2afd3 |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:teses.usp.br:tde-27102021-181959 |
network_acronym_str |
USP |
network_name_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
repository_id_str |
2721 |
spelling |
info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesis Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos Effects of lipopolysaccharide and calcitriol on mdpc-23 differentiation into osteoclasts 2021-06-01Victor Elias Arana ChavezInmaculada Casado GómezJose Luiz da Silva Lage MarquesKarina Fittipaldi Bombonato PradoTais Carvalho de OliveiraUniversidade de São PauloOdontologia (Dentística)USPBR Bone Marrow Calcitriol Calcitriol Clastogênese Clastogenesis LPS LPS MDPC-23 MDPC-23 Medula óssea Reabsorções internas das paredes dentinárias levantam dúvidas sobre a origem de células clásticas na polpa dentária em casos idiopáticos. Estudos recentes sugeriram que as células MDPC-23 (odontoblast-like) podem se diferenciar em células clásticas, contrariando estudos anteriores. O presente estudo teve como objetivo observar a influência do calcitriol (1,25-dihidroxivitamina D3) e do lipopolissacarídeo (LPS) na indução da diferenciação de células MDPC-23 (semelhantes a odontoblastos) em células semelhantes a clastos. Como as células MDPC-23 têm origem ectomesenquimal e células clásticas possuem origem hematopoiética, o estudo foi proposto para comparar, in vitro, o potencial clastogênico de dois modelos de origem embrionárias distintas frente a diferentes estímulos. Dois grupos, MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos, foram cultivados e tratados com LPS ou 1,25-dihidroxivitamina D3 (calcitriol). No sexto dia, o ensaio de metiltiazolil-tetrazólio (MTT) foi realizado para observar a viabilidade celular diante dos tratamentos. Em seguida, o ensaio citoquímico foi executado para identificar células positivas para TRAP. Adicionalmente foi feito estudo da expressão gênica dos marcadores da clastogênese, OPG, RANK, RANKL, Csf1r, M-Csf1 e catepsina K, através da PCRq. No ensaio de MTT, a viabilidade celular não foi alterada com os tratamentos em comparação com os subgrupos controle. Células TRAP positivas estavam presentes apenas nos subgrupos medula óssea, induzidos com LPS ou calcitriol. O grupo medula óssea apresentou amplificação para todos os genes alvos mencionados. Já para os subgrupos do grupo MDPC-23 apresentaram expressão gênica significativa, diante dos tratamentos, apenas para os genes Csf1r e catepsina K. Concluiu-se, portanto, que embora apresente expressão relativa para os genes Csf1r e catepsina K, sob tratamento, as células MDPC-23 não foram capazes de se diferenciar em células clásticas. Resorption of internal dental walls raises doubts about the origin of clastic cells in idiopathic cases. Recent studies have suggested that MDPC-23 cells (odontoblast-like) can differentiate into clast-type cells, contrasting to previous finding. The present study aimed to observe the influence of calcitriol and lipopolysaccharide (LPS) to induce the differentiation of MDPC-23 (odontoblast-like) cells into clast-like cells. As MDPC-23 cells have ectomesenchymal origin and clastic cells hematopoietic origin, the study was proposed to compare, in vitro, the clastogenic potential of two different models of embryonic origin against different stimuli. Two groups, MDPC-23 and mouse bone marrow cells were cultured in LPS and 1.25-dihydroxyvitamin D3 (calcitriol). On the sixth day, after treatments, methyl tetrazolium (MTT) assay was performed to observe cell viability. Then, a cytochemical assay was performed to identify TRAP positive cells. In addition, gene expression of clastogenesis markers, OPG, RANK, RANKL, Csf1r, M-Csf1 and cathepsin K, was performed using the PCRq. Cell viability wasnt disturbed at cited concentrations treatments compared to the control subgroups with the MTT assay. There were no TRAP positive cells in all MDPC-23 subgroups or in the control subgroup of bone marrow. TRAP positive cells were present only in bone marrow induced subgroups LPS and calcitriol. Bone marrow subgroups had gene expression amplification for all targets mentioned. Otherwise, MDPC-23 group had significant gene expression only for Csfr and cathepsin K. The others specific targets had no amplification in MDPC-23 subgroups. It was concluded that although the treatments were not toxic and MDPC-23 cells had significant gene expression for Csf1r and cathepsin K, these cells did not present TRAP positive cells, and therefore were not able to differentiate into clastic cells. https://doi.org/10.11606/T.23.2021.tde-27102021-181959info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USP2023-12-21T20:18:40Zoai:teses.usp.br:tde-27102021-181959Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212023-12-22T13:24:42.684365Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false |
dc.title.pt.fl_str_mv |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
dc.title.alternative.en.fl_str_mv |
Effects of lipopolysaccharide and calcitriol on mdpc-23 differentiation into osteoclasts |
title |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
spellingShingle |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos Tais Carvalho de Oliveira |
title_short |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
title_full |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
title_fullStr |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
title_full_unstemmed |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
title_sort |
Estudo comparativo da clastogênese entre células MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos |
author |
Tais Carvalho de Oliveira |
author_facet |
Tais Carvalho de Oliveira |
author_role |
author |
dc.contributor.advisor1.fl_str_mv |
Victor Elias Arana Chavez |
dc.contributor.referee1.fl_str_mv |
Inmaculada Casado Gómez |
dc.contributor.referee2.fl_str_mv |
Jose Luiz da Silva Lage Marques |
dc.contributor.referee3.fl_str_mv |
Karina Fittipaldi Bombonato Prado |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Tais Carvalho de Oliveira |
contributor_str_mv |
Victor Elias Arana Chavez Inmaculada Casado Gómez Jose Luiz da Silva Lage Marques Karina Fittipaldi Bombonato Prado |
description |
Reabsorções internas das paredes dentinárias levantam dúvidas sobre a origem de células clásticas na polpa dentária em casos idiopáticos. Estudos recentes sugeriram que as células MDPC-23 (odontoblast-like) podem se diferenciar em células clásticas, contrariando estudos anteriores. O presente estudo teve como objetivo observar a influência do calcitriol (1,25-dihidroxivitamina D3) e do lipopolissacarídeo (LPS) na indução da diferenciação de células MDPC-23 (semelhantes a odontoblastos) em células semelhantes a clastos. Como as células MDPC-23 têm origem ectomesenquimal e células clásticas possuem origem hematopoiética, o estudo foi proposto para comparar, in vitro, o potencial clastogênico de dois modelos de origem embrionárias distintas frente a diferentes estímulos. Dois grupos, MDPC-23 e células da medula óssea de camundongos, foram cultivados e tratados com LPS ou 1,25-dihidroxivitamina D3 (calcitriol). No sexto dia, o ensaio de metiltiazolil-tetrazólio (MTT) foi realizado para observar a viabilidade celular diante dos tratamentos. Em seguida, o ensaio citoquímico foi executado para identificar células positivas para TRAP. Adicionalmente foi feito estudo da expressão gênica dos marcadores da clastogênese, OPG, RANK, RANKL, Csf1r, M-Csf1 e catepsina K, através da PCRq. No ensaio de MTT, a viabilidade celular não foi alterada com os tratamentos em comparação com os subgrupos controle. Células TRAP positivas estavam presentes apenas nos subgrupos medula óssea, induzidos com LPS ou calcitriol. O grupo medula óssea apresentou amplificação para todos os genes alvos mencionados. Já para os subgrupos do grupo MDPC-23 apresentaram expressão gênica significativa, diante dos tratamentos, apenas para os genes Csf1r e catepsina K. Concluiu-se, portanto, que embora apresente expressão relativa para os genes Csf1r e catepsina K, sob tratamento, as células MDPC-23 não foram capazes de se diferenciar em células clásticas. |
publishDate |
2021 |
dc.date.issued.fl_str_mv |
2021-06-01 |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
format |
doctoralThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
https://doi.org/10.11606/T.23.2021.tde-27102021-181959 |
url |
https://doi.org/10.11606/T.23.2021.tde-27102021-181959 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
por |
language |
por |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/openAccess |
eu_rights_str_mv |
openAccess |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade de São Paulo |
dc.publisher.program.fl_str_mv |
Odontologia (Dentística) |
dc.publisher.initials.fl_str_mv |
USP |
dc.publisher.country.fl_str_mv |
BR |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade de São Paulo |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP instname:Universidade de São Paulo (USP) instacron:USP |
instname_str |
Universidade de São Paulo (USP) |
instacron_str |
USP |
institution |
USP |
reponame_str |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
collection |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP |
repository.name.fl_str_mv |
Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP) |
repository.mail.fl_str_mv |
virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br |
_version_ |
1794503099522482176 |