Autoradiografia quantitativa a nível de microscopia eletrônica em células de fumo (Nicotiana tabacum L.) infectadas com vírus do anel do pimentão

• Autor(a) principal: Lage, Gilberto
• Data de Publicação: 1980
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11133/tde-20220207-215143/
• topic: AUTORRADIOGRAFIA; CÉLULAS VEGETAIS; FUMO; MICROSCOPIA ELETRÔNICA; VÍRUS DO ANEL DO PIMENTÃO

Na presente Dissertação foram abordados diversos problemas correlacionados com a replicação do RNA do vírus do anel do pimentão (VAP), sua translocação e sua associação com os mitocôndrios. Antes dessa abordagem foram examinados alguns aspectos fundamentais para se atingir os objetivos propostos. Dentre eles destacam-se: a) o efeito da actinomicina D (AMD) sobre as áreas do nucléolo, núcleo e citoplasma das células de fumo sadias e infectadas pelo vírus do anel do pimentão. Nesse estudo notou-se marcante a AMD, que reduziu as áreas do nucléolo e do núcleo das células sadias. Os testes estatísticos indicaram que na presença do VAP apenas o nucléolo sofria semelhante redução. O AMD provocou também uma inibição indireta da síntese do RNA viral; b) O resultado prévio do estudo comparativo entre a determinação das áreas celulares pelo método dos círculos e planimetria permitiu a opção pelo primeiro método, que torna simples e rápida a obtenção das densidades de grãos de prata; c) A proporção das densidades de grãos de prata do nucléolo e núcleo contra a densidade dos mesmos no citoplasma das células tratadas com AMD guardaram a seguinte relação 14,5:3,5:1, respectivamente. Estas proporções corroboram a idéia de que a biossíntese do RNA das duas partículas da população do VAP (55 e 220nm) deve se dar no nucléolo; d) Obtenção do valor do HD (Ralf-distance) para as nossas condições, com um valor aproximado de 2000 Angstrons. Com respeito à translocação e associação do VAP com os mitocôndrios das células hospedeiras, a aplicação do modelo matemático proposto por NADLER permitiu obter duas informações básicas: a primeira mostrou que no sistema VAP-mitocôndrio associados, os grãos de prata cobrindo os dois componentes eram predominantemente formados pelo RNA radioativo do VAP (78%) e a segunda diz respeito ao tempo necessário para síntese do RNA, maturação e translocação do vírus até os mitocôndrios. Esse tempo que coincidiu com o do tratamento U - 5 - 3H e indicou que, embora o processo de síntese e translocação possa ser menor, essas várias etapas podem se completar dentro de 5 horas. Os resultados obtidos com o método usado além de mostrar a viabilidade do mesmo para o sistema VAP - mitocôndrio parece bastante promissor na solução de problemas semelhantes com outros vírus ou até mesmo, solução para alguns aspectos biossintéticos e de translocação de compostos com hormônios e enzimas em células normais.