Dinâmica da polarização de macrófagos e o impacto de sua modulação no processo de reparo ósseo alveolar

• Autor(a) principal: Tabanêz, André Petenuci
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/25/25149/tde-10112023-160748/
• topic: bone repair; M1 macrophages; macrófagos M1; polarização; polarization; reparo ósseo

Este estudo avaliou a dinâmica da polarização de macrófagos e o impacto de sua modulação, por drogas e pelo processo de envelhecimento, no resultado do processo de reparo ósseo alveolar em camundongos. Os animais C57Bl-6 foram submetidos à extração do incisivo superior e tratados com Paclitaxel (nas doses de 1 mg/kg/semana, 10 mg/kg/semana e 10 mg/kg/48h), previamente descrito como um composto indutor do perfil M1. No geral, os grupos tratados com PTX apresentaram maior densidade de fibroblastos e fibras, com menor densidade de tecido ósseo no período de 7 dias (p<0,05). Os grupos PTX também apresentaram maior densidade de vasos. O tratamento com PTX na dose de 1 e 10 mg/kg/semana mostrou principalmente uma diminuição na densidade de células inflamatórias, enquanto a PTX na dose de 10 mg/kg/48h mostrou uma maior contagem de células inflamatórias. Apesar dessas alterações, o reparo ósseo alveolar ocorreu de forma adequada, em todos os grupos tratados com PTX. Por outro lado, quando testado em um contexto inflamatório distinto (ou seja, lesões periapicais experimentais inflamatórias crônicas), a administração de PTX foi associada a um aumento na progressão/gravidade da lesão, associada a menor número de células M2(CD206+), menor expressão de ARG1 (p<0,05) e maior contagem de células M1(CD80+), associada à maior expressão de vários mediadores pró-inflamatórios (p<0,05), sugerindo que a capacidade da PTX em promover o perfil pró-inflamatório M1 pode depender da natureza do microambiente inflamatório. O próximo passo foi a avaliação dos efeitos do Ibuprofeno (IBU, 40 mg/kg e 200 mg/kg) na dinâmica da polarização dos macrófagos e no resultado do reparo ósseo alveolar. Nossos resultados mostraram que os grupos IBU apresentaram diminuição na contagem de células inflamatórias, que foi mais pronunciada na dose de 200 mg/kg (p<0,05). Além disso, o grupo IBU, na dose de 40 mg/kg, apresentou menor contagem de células CD206+ e menor contagem de células GR1+ no período de 3 dias (p<0,05). Apesar de tais alterações, a terapia com ibuprofeno não demonstrou prejudicar o processo de cicatrização óssea, como comumente referido na literatura. Por fim, avaliamos a possível influência das alterações associadas ao envelhecimento precoce na resposta imune inflamatória e seu impacto no reparo ósseo. Nossos resultados demonstraram que o grupo AGING apresentou aumento da expressão de mRNA de interleucinas pró-inflamatórias e diminuição da expressão de mRNA de interleucinas regulatórias. Níveis mais baixos de fatores de crescimento como níveis de FGF1, Tfgb1 e Vegfa mRNA também estavam presentes no grupo AGING. Marcadores relacionados a macrófagos, como iNOS, ARG e FIZZ, apresentaram regulação negativa no grupo AGING. Marcadores de células-tronco também se mostraram diminuídos no grupo AGING em vários períodos experimentais, em comparação com o grupo controle (p<0,05). O grupo AGING também apresentou aumento da densidade de fibras e fibroblastos de acordo com o aumento de Col1A2, Col1A1 e MMP8 (p<0,05) e diminuição geral nas BMPs 2, 4 e 7 e em vários marcadores ósseos (p<0,05). Consequentemente, a densidade óssea no grupo AGING foi menor com menor contagem de osteoblastos (p<0,05). Nossos resultados apontam para um possível perfil pró-inflamatório de baixo grau e diferenciação retardada de células progenitoras ósseas. No entanto, tais alterações não parecem prejudicar o processo de reparo ósseo, uma vez que o alvéolo foi preenchido com novo osso ao final do período experimental.