Isolamento, expansão e caracterização de células progenitoras renais derivadas de mesonefro e metanefro de gato doméstico (Felis catus)

• Autor(a) principal: Mario, Lara Carolina
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/10/10132/tde-30082019-134818/
• topic: Cell therapy; Chronic renal disease; Doença crônica renal; Embriologia; Embryology; Kidney; Morfologia; Morphology; Rim; Terapia celular

A doença renal crônica (DRC) é amplamente encontrada em felinos. É caracterizada pela deficiência estrutural e funcional dos rins e pela perda gradual e definitiva do número de néfrons funcionais, com posterior redução da taxa de filtração glomerular. A DRC é uma enfermidade de difícil tratamento devido às limitações terapêuticas existentes, as quais apenas minimizam os danos causados aos pacientes. A inexistência de qualquer tratamento específico para a DRC fortalece a necessidade de investimento em pesquisas e em terapias inovadoras aplicadas, incluindo a terapia celular. Em gatos, muitos modelos já foram preconizando com o uso de diversos tipos de celulares, tais como, derivados da medula óssea, âmnio, e tecido adiposo. Porém até o presente momento, nenhum desses estudos obtiveram sucesso significativo no tratamento dessa enfermidade. Observando portanto, a carência de uma terapia celular especifica para a DRC, e sabendo que muito estudos estão sendo realizados com o uso células progenitoras, ou seja, células as quais já estão destinadas a serem um tecido ou órgão específico, este trabalho buscou mediante estudo das células derivadas de mesonefro e metanefro de gatos domésticos em diferentes estágios gestacionais, uma nova fonte para terapia celular, afim de testar qual destes diferentes tipos celulares seria o melhor para tratamento das doenças renais. Desta forma, embriões e fetos de gato foram coletados da campanha de castração eletiva realizada na cidade de Embu das Artes, São Paulo. Os mesonefros e metanefros foram dissecados e postos em cultivo celular. Na sequência foram realizados testes de viabilidade e metabolismo celular, análise de proteínas específicas mediante a técnica de citometria de fluxo, potencial tumorigênico, e diferenciação celular para células adipogênicas, condrogênicas e osteogênicas. Foi observado que estas células possuíam plasticidade e clonicidade celular, apresentavam expressões positivas para marcadores renais e expressão negativa para proteínas do complexo principal de histocompatibilidade, também não apresentaram formação tumorigênicas e possuíam a capacidade de se diferenciar em diversos tecidos, tais como adipócitos, osteócitos e condrócitos. Portanto podemos concluir que estas novas linhagens celulares apresentam todas as caraterísticas necessárias para tornarem-se um novo modelo em terapia celular para gatos com DRC. Dentre estas quatro linhagens, elegemos a as células provenientes de metanefro de final do período gestacional com as melhores características dentre as demais, pois apresentam maiores expressões de proteínas específicas renais, além apresentarem uma estrutura renal mais concisa e mais bem estabelecida.