Efeitos da terapia probiótica com Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 em ratas prenhes com periodontite experimental: estudo microbiológico, histomorfométrico, histopatológico, imunológico, microtomográfico e bioquímico

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Nobre, Átila Vinícius Vitor
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58132/tde-23102023-141328/
Resumo: A relação entre periodontite (PD) e disbiose polimicrobiana nos desfechos adversos da gravidez vem sendo investigada na literatura e cada vez mais se tem buscado alternativas ecológicas para o tratamento de doenças periodontais (DP), devido seu reconhecido efeito sistêmico. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da PD na gravidez e se a administração sistêmica do probiótico Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 (B. lactis HN019) promoveu efeitos benéficos na PD experimental em ratas prenhes. Foram utilizadas 48 ratas e divididas nos seguintes grupos: C (controle), PROB (probiótico), DP (periodontite induzida por ligadura + gavagem de Porphyromonas gingivalis diariamente por 15 dias) e DPxPROB (periodontite + probiótico). A suplementação com B. lactis iniciou-se 3 semanas antes do protocolo experimental. O dia 0 foi estabelecido pela confirmação da prenhez. A PD foi induzida no 4° dia gestacional e ao 19° dia, a pressão arterial (PA) invasiva foi aferida e os animais, eutanasiados. Foram coletados fetos, placentas, ligaduras, biofilme oral, urina, soro, hemi-mandíbulas, intestino e rins, para avaliação dos seguintes parâmetros: 1) pesos materno, dos fetos e das placentas; 2) microbiota oral (checkerboard DNA-DNA hybridization); 3) proteinúria e creatinina na urina (análise bioquímica); 4) concentração de nitrato/nitrito plasmático (análise bioquímica); 5) expressão de metaloproteinases-2 e -9 da matriz na placenta e no soro (zimografia); 6) microarquitetura e volume ósseo (microtomografia computadorizada por transmissão de raios X); 7) níveis de inserção conjuntiva (NIC) em tecidos periodontais, altura de vilosidades (AV) e profundidade de criptas (PC) em tecidos intestinais (duodeno e jejuno), espaço da cápsula de Bowman (CP), circunferência da CP, circunferência glomerular (CG) e diâmetro glomerular (DG) em tecidos renais (análise histomorfométrica). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (p<0,05). Foi observado que a PD causou malefícios na prenhez pela expressão aumentada de proteinúria, creatinina e razão proteína/creatinina na urina, aumento de porosidade óssea, separação entre trabéculas, porcentagem de área sem osso em área de bifurcação (AB), NIC interproximal, espaço da CB, circunferência da CP, EG e DG, bem como menor volume ósseo em AB e espessura e número de trabéculas ósseas, comparados ao grupo C (p<0,05). A administração sistêmica de B. lactis HN019 mostrou valores intermediários no volume ósseo em AB, porosidade óssea, espessura de trabéculas, NIC e todos os parâmetros renais analisados em comparação ao grupo C (p<0,05). Dentro das limitações deste estudo, podemos concluir que a disbiose da microbiota oral e intestinal promovida pela PD gera efeitos negativos locais e sistêmicos na gravidez e que o uso sistêmico de B. lactis parece promover um efeito protetor na perda óssea alveolar e integridade dos tecidos renais.
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O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da PD na gravidez e se a administração sistêmica do probiótico Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 (B. lactis HN019) promoveu efeitos benéficos na PD experimental em ratas prenhes. Foram utilizadas 48 ratas e divididas nos seguintes grupos: C (controle), PROB (probiótico), DP (periodontite induzida por ligadura + gavagem de Porphyromonas gingivalis diariamente por 15 dias) e DPxPROB (periodontite + probiótico). A suplementação com B. lactis iniciou-se 3 semanas antes do protocolo experimental. O dia 0 foi estabelecido pela confirmação da prenhez. A PD foi induzida no 4° dia gestacional e ao 19° dia, a pressão arterial (PA) invasiva foi aferida e os animais, eutanasiados. Foram coletados fetos, placentas, ligaduras, biofilme oral, urina, soro, hemi-mandíbulas, intestino e rins, para avaliação dos seguintes parâmetros: 1) pesos materno, dos fetos e das placentas; 2) microbiota oral (checkerboard DNA-DNA hybridization); 3) proteinúria e creatinina na urina (análise bioquímica); 4) concentração de nitrato/nitrito plasmático (análise bioquímica); 5) expressão de metaloproteinases-2 e -9 da matriz na placenta e no soro (zimografia); 6) microarquitetura e volume ósseo (microtomografia computadorizada por transmissão de raios X); 7) níveis de inserção conjuntiva (NIC) em tecidos periodontais, altura de vilosidades (AV) e profundidade de criptas (PC) em tecidos intestinais (duodeno e jejuno), espaço da cápsula de Bowman (CP), circunferência da CP, circunferência glomerular (CG) e diâmetro glomerular (DG) em tecidos renais (análise histomorfométrica). Os dados obtidos foram submetidos à análise estatística (p<0,05). Foi observado que a PD causou malefícios na prenhez pela expressão aumentada de proteinúria, creatinina e razão proteína/creatinina na urina, aumento de porosidade óssea, separação entre trabéculas, porcentagem de área sem osso em área de bifurcação (AB), NIC interproximal, espaço da CB, circunferência da CP, EG e DG, bem como menor volume ósseo em AB e espessura e número de trabéculas ósseas, comparados ao grupo C (p<0,05). A administração sistêmica de B. lactis HN019 mostrou valores intermediários no volume ósseo em AB, porosidade óssea, espessura de trabéculas, NIC e todos os parâmetros renais analisados em comparação ao grupo C (p<0,05). Dentro das limitações deste estudo, podemos concluir que a disbiose da microbiota oral e intestinal promovida pela PD gera efeitos negativos locais e sistêmicos na gravidez e que o uso sistêmico de B. lactis parece promover um efeito protetor na perda óssea alveolar e integridade dos tecidos renais.The relationship between periodontitis (PD) and polymicrobial dysbiosis in adverse pregnancy outcomes has been investigated in the literature and ecological alternatives have been increasingly sought for the treatment of periodontal diseases, due to their recognized systemic effect. The aims of this study were to evaluate the effects of PD in pregnancy and whether systemic administration of the probiotic Bifidobacterium animalis subsp. lactis HN019 (B. lactis HN019) promoted beneficial effects on experimental PD in pregnant rats. 48 rats were used and divided into the following groups: C (control), PROB (probiotic), PD (periodontitis induced by silk ligature + oral gavage of Porphyromonas gingivalis daily for 15 days) and PDPROB (PD + PROB). Supplementation with B. lactis started 3 weeks before the experimental protocol. Day 0 was established by confirmation of pregnancy. PD was induced on the 4th day of gestation and on the 19th day, invasive blood pressure (BP) was measured, and the animals euthanized. Pups, placentas, ligatures, oral biofilm, urine, serum, hemi-mandibles, intestine and kidneys were collected for evaluation of the following parameters: 1) maternal, fetal and placental weights; 2) oral microbiota (checkerboard DNA-DNA hybridization); 3) proteinuria and creatinine in the urine (biochemical analysis); 4) plasma nitrate/nitrite concentration (biochemical analysis); 5) expression of matrix metalloproteinases-2 and -9 in placenta and serum (zymography); 6) microarchitecture and bone volume (computed microtomography by X-ray transmission); 7) clinical attachment level (CAL) in periodontal tissues, villus height (VH) and crypt depth (CD) in intestinal tissues (duodenum and jejunum), Bowman\'s capsule space (BC), BC circumference, glomerular circumference (GC) and glomerular diameter (GD) in renal tissues (histomorphometric analysis). The data obtained were submitted to statistical analysis (p<0.05). It was observed that PD caused harm in pregnancy by the increased expression of proteinuria, creatinine and protein/creatinine ratio in the urine, increased bone porosity, separation between trabeculae, percentage of boneless area in the bifurcation area (BA), interproximal CAL, BC space, BC circumference, GC and GD, as well as lower bone volume in BA and thickness and number of bone trabeculae, compared to group C (p<0.05). Systemic administration of B. lactis HN019 showed intermediate values in bone volume in BA, bone porosity, trabecular thickness, CAL, and all analyzed renal parameters compared to group C (p<0.05). Within the limitations of this study, we can conclude that the dysbiosis of the oral and intestinal microbiota promoted by PD generates local and systemic negative effects in pregnancy and that the systemic use of B. lactisseems to promote a protective effect on alveolar bone loss and integrity of renal tissues.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPSalvatore, Sergio Luiz de SouzaNobre, Átila Vinícius Vitor2023-05-19info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/58/58132/tde-23102023-141328/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2023-11-27T12:41:02Zoai:teses.usp.br:tde-23102023-141328Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212023-11-27T12:41:02Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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