Identificação e validação das interações miRNA-mRNA durante a fase de desenvolvimento pré-imaginal de Apis mellifera

• Autor(a) principal: Depintor, Thiago da Silva
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-29102018-160042/
• topic: Apis mellifera ; Desenvolvimento ; Expressão genica ; Metamorfose ; miRNA; Apis mellifera ; Development ; Gene expression ; Metamorphosis ; miRNA

O desenvolvimento em insetos é coordenado majoritariamente pela ação de dois grandes hormônios: HJ e 20E. Esses hormônios desencadeiam cascatas gênicas resultando em mudanças fenotípicas, fisiológicas e comportamentais. Além dos hormônios, os miRNAs também atuam sobre a expressão desses genes componentes das cascatas de resposta aos hormônios durante o desenvolvimento nos insetos. Neste estudo objetivamos analisar a relação entre hormônios e genes, hormônios e miRNAs e genes e miRNAs, em estágios finais do desenvolvimento de Apis mellifera. O perfil de expressão dos fatores de transcrição Usp, ftz-f1, EcR, chd64, inr2, Kr-h1, gce e os regulares putativos miR-34, miR-281 e miR-252b foram avaliados a partir do 5 estagio larval até adultos recém emergidos, por meio de RT-qPCR. Também avaliamos o efeito de doses exógenas de HJ III e 20E sobre o desenvolvimento pupal (Pw e Pb). A maioria dos genes testados mostraram responder as variações hormonais nos estágios pupais tal qual respondem em estágios larvais. Contudo, gce e chd64 mostraram responder diferente as variações hormonais em estágios pupais, sugerindo assim, que estes podem desempenhar papel diferente nos estágios finais do desenvolvimento. O gce que é um receptor nuclear de HJ em insetos, mostrou rápida resposta ao tratamento com 20E e não respondeu ao tratamento com HJ, semelhantemente o chd64 também não respondeu aos tratamentos com HJ. Nossos dados ainda apontam Usp como um gene de resposta imediata (early gene). O miR-34 e o miR-281 são fortes candidatos a reguladores chave na metamorfose, uma vez que estes apresentam interações (in silico) com a maioria dos genes aqui estudados, além de responderem ao tratamento hormonal para ambos os hormônios. Este estudo caracteriza componentes da rede regulatória do desenvolvimento pupal em abelhas melíferas.