Estratégias para pré-concentração e separação por cromatografia por injeção sequencial

• Autor(a) principal: Acevedo, Maria Soledad Moura Soares Fernández
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/64/64135/tde-19092022-110747/
• topic: Bioanalítica; Bioanalysis; Cromatografia bidimensional; Cromatografia por injeção sequencial; Low-pressure chromatography; Multidimensional chromatography; On column preconcentration; Pré-concentração on column; Separação cromatográfica à baixa pressão; Sequential injection chromatography

A cromatografia por injeção sequencial (SIC) expandiu a aplicabilidade de sistemas de análises em fluxo com separações à baixa pressão, permitindo a análise de diversos analitos em uma mesma amostra, explorando os benefícios da automação. Visando ampliar a aplicabilidade do SIC e explorar as suas características, foram desenvolvidas três estratégias analíticas. A primeira proposta foi o desenvolvimento de um procedimento para pré-concentração de compostos fenólicos (resveratrol, quercetina e canferol) diretamente na coluna cromatográfica. Respostas lineares foram observadas entre 0,1 e 1,00 mg L-1 (r > 0,997), com limites de detecção (LOD) estimados em 0,2, 8 e 9 g L-1 e fatores de enriquecimento de 84, 35 e 29, para resveratrol, quercetina e canferol, respectivamente. O procedimento foi aplicado à determinação de compostos fenólicos em cervejas, após clean up das amostras por uma adaptação da metodologia QuEChERS, com recuperações entre 84 e 110%. Uma estratégia pioneira para cromatografia bidimensional ampliou a capacidade de separação do SIC, explorando colunas cromatográficas com diferentes características químicas. A aplicabilidade foi demonstrada pela separação das aminas biogênicas histamina, tiramina, feniletilamina e triptamina empregando, na primeira dimensão cromatográfica, uma coluna monolítica de sílica funcionalizada com cianopropil, com fase móvel completamente aquosa e, na segunda dimensão cromatográfica, uma coluna particulada do tipo C18, com fase móvel 7% v/v de acetonitrila em solução de ácido fosfórico pH 2,5. Respostas lineares foram obtidas entre 10 e 50 mg L-1, para histamina, tiramina e feniletilamina e entre 10 e 40 mg L-1 para triptamina (r > 0,997), com LOD estimados em 3, 8, 2 e 0,3 mg L-1, para histamina, tiramina, feniletilamina e triptamina, respectivamente. Foi obtida boa precisão (CV de 3,0%, n = 12) e resolução de 1,72 foi alcançada entre os picos mais próximos (tiramina e feniletilamina). A terceira proposta objetivou a separação de aminas biogênicas com eluição por gradiente de concentração gerado pela dispersão de uma alíquota de acetonitrila em água. Histamina, tiramina, feniletilamina e triptamina foram utilizadas como analitos modelo, empregando uma coluna particulada com sílica funcionalizada com C18. O tempo de análise foi de 2,5 min, com resolução de 1,6 entre os picos da feniletilamina e triptamina, e LOD de 1,6, 1,7, 1,3 e 0,4 mg L-1, para histamina, tiramina, feniletilamina e triptamina, respectivamente. Respostas lineares foram obtidas entre 5 e 30 mg L-1 (r > 0,991), com CV (n=10) dos tempos de retenção e área de pico entre 0,08% - 0,84% e 1,5 2,5%, respectivamente